WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 

Pages:   || 2 | 3 | 4 |

«ОСОБЕННОСТИ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ГЕРБИЦИДОВ ...»

-- [ Страница 1 ] --

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РФ

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего профессионального образования

«КУБАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ»

На правах рукописи

ЗВЯГИНА Анастасия Сергеевна

ОСОБЕННОСТИ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ РЕПРОДУКТИВНОЙ

СИСТЕМЫ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ ПРИ



ВОЗДЕЙСТВИИ ГЕРБИЦИДОВ

Специальность: 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений

ДИССЕРТАЦИЯ

на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Научный руководитель доктор биологических наук, профессор Цаценко Л. В.

Краснодар – 2015

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Репродуктивная система и особенности развития мужского гаметофита озимой мягкой пшеницы

1.2 Пыльцевой анализ репродуктивной системы озимой мягкой пшеницы

1.3 Действие гербицидов на функционирование мужского гаметофита озимой мягкой пшеницы и других культур

1.4 Биологическое тестирование в системе генетического мониторинга

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛ, МЕТОДИКА И УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ

ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Почвенно-климатические условия проведения опытов

2.2 Условия проведения исследований

2.3 Характеристика материала исследования

2.4 Методика пыльцевого анализа

2.5 Оценка фитотоксичности почвы в системе генетического мониторинга

ГЛАВА 3 БИОЛОГИЧЕСКОЕ ТЕСТИРОВАНИЕ ПОЧВЫ НА ОСТАТОЧНОЕ КОЛИЧЕСТВО ПОСЛЕВСХОДОВЫХ ГЕРБИЦИДОВ

С ПОМОЩЬЮ ВЫСШИХ РАСТЕНИЙ

3.1 Сила роста семян тест-культур

3.2 Всхожесть семян тест-культур

3.3 Определение длины осевых органов проростков тест-культур..... 67

3.4 Фитоиндикация загрязнения почвы с помощью ряски малой Lemna minor L.

ГЛАВА 4 СКРИНИНГ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ ПЫЛЬЦЫ И

СОСТОЯНИЕ МУЖСКОГО ГАМЕТОФИТА У СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ

4.1 Анализ состояния пыльцы линий гербицидоустойчивого подсолнечника, обработанного послевсходовым гербицидом Евро- 79 Лайтнинг

4.2 Пыльцевой анализ у растений озимой мягкой пшеницы................. 81

ГЛАВА 5 АНАЛИЗ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ ОЗИМОЙ

МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ

5.1 Формирование элементов продуктивности озимой мягкой пшеницы с учетом действия послевсходовых гербицидов

5.2 Подходы к исследованию потомства озимой мягкой пшеницы сорта Таня на действие послевсходовых гербицидов Пума Супер 75 и Секатор Турбо

ВЫВОДЫ

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ПРАКТИКИ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. В последнее время становится актуальным вопрос сохранения генетического потенциала продуктивности сельскохозяйственных растений. Усиление антропогенной нагрузки в аграрном секторе, в частности гербицидная нагрузка, может привести к дестабилизации генофонда и необратимым последствиям его деградации, поэтому значимость цитогенетических исследований постоянно возрастает.

Существуют направления исследований, отображающиеся в публикациях, где применяются различные критерии оценки последствий гербицидной обработки на экосистему в целом. Краснодарский край относится к тем регионам, которые уязвимы к антропогенным факторам, где сельскохозяйственные растения постоянно испытывают интенсивный груз деятельности человека.

Исходя из имеющейся информации изучение всестороннего комплекса воздействий на геном растений представляет практический интерес.

Репродуктивная система каждого вида растений индивидуальна и включает характеристики репродуктивных органов, являющихся важнейшим элементом биологии растений. У мягкой пшеницы особенность заключается в том, что она является аллогексаплоидом, т. е. включает три генома, которые расширяют норму реакции растений на негативные действия биотических и абиотических факторов среды. В нашей работе мы рассматриваем действие гербицидов, как абиотического фактора, на репродуктивную систему через состояние мужского гаметофита.





Для понимания данного процесса анализ изучения влияния послевсходовых гербицидов на репродуктивную систему будет проводиться на двух культурах: подсолнечнике и пшенице. Учитывая, что растения в ценозе связаны в целом не только друг с другом, но и с почвой, не мало важное значение имеет анализ почвенной среды.

Пшеница – наиболее распространенный хлебный злак на земном шаре и является ведущей культурой Краснодарского края, которая занимает лидирующее положение в аграрном секторе. Имеющиеся работы по генетической оценки действия гербицидов на репродуктивную систему растений не дают полного представления о комплексном воздействии этого поллютанта. В нашей работе была предпринята попытка комплексного анализа факторов воздействия на растения и почвы в агроценозе на примере подсолнечника и озимой мягкой пшеницы. За основу был взят пыльцевой анализ, который характеризуется экспрессивностью и точностью.

Цели и задачи исследований. Цель наших исследований – изучение функционирования репродуктивной системы сельскохозяйственных растений на примере подсолнечника и озимой мягкой пшеницы при воздействии послевсходовых гербицидов Пума Супер 75, Секатор Турбо и Евро-Лайтнинг.

Для достижения поставленной цели ставились следующие задачи:

1. подобрать растительные тест-системы и определить критерии оценки токсического воздействия послевсходовых гербицидов на анализируемые объекты;

2. провести биологическое тестирование почвы, направленное на выявление остаточных количеств препарата в почве;

3. изучить закономерности роста и развития осевых органов проростков тест-культур при действии послевсходовых гербицидов;

4. провести цитологический анализ фертильности пыльцевых зерен сельскохозяйственных растений с целью выявления устойчивости генотипов к послевсходовым гербицидам;

5. проанализировать зависимости действия послевсходовых гербицидов на репродуктивную систему пшеницы по элементам структуры урожая;

6. разработать методологию оценки адаптивных и урожайных свойств растений озимой мягкой пшеницы при воздействии послевсходовых гербицидов, а также дать их экологическое обоснование для селекционной практики.

Научная новизна работы. Впервые проведена комплексная оценка действия послевсходовых гербицидов Пума Супер 7 и Секатор Турбо в посевах озимой мягкой пшеницы сорта Таня и линий подсолнечника, устойчивого к гербициду Евро-Лайтнинг по состоянию репродуктивной системы высших растений.

Установлены основные подходы к оценке токсичного загрязнения почвы послевсходовыми гербицидами на основе биотестирования с использованием высших растений в разных биологических состояниях.

Впервые проведено биотестирование образцов почвы в лабораторных условиях в устройствах с постоянным поддержанием микроклимата.

Выявлены основные критерии селекционной оценки генотипов подсолнечника и озимой пшеницы, подвергшихся обработке послевсходовыми гербицидами, с использованием пыльцевого анализа.

Впервые показаны информативные характеристики пыльцевого зерна при оценке действия послевсходовых гербицидов на репродуктивную систему подсолнечника и озимой мягкой пшеницы.

Установлены информативные и сопряженные с цитологическими показатели продуктивности растений озимой мягкой пшеницы на основе четырех критериев: длина колоса, число колосков, масса колоса, число зерен с колоса.

Впервые разработаны оценка действия послевсходовых гербицидов на репродуктивную систему высших растений с использованием моделей для биологических исследований.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты полученные в ходе исследований могут применяться при оценке репродуктивного потенциала озимой пшеницы в технологиях с применением послевсходовых гербицидов и могут использоваться при разработке программ по созданию гербицидоустойчивых линий подсолнечника в системе чистого поля. Оценка почвы на загрязнение послевсходовыми гербицидами позволит применять две тест-системы на основе высших растения для получения полной картины действия токсикантов в агроценозе.

Разработанные в ходе работы биологические модели для биотестирования почвы и сушки индивидуальных растений имеют многофункциональное значение и широкий спектр применения.

Материалы диссертации используются в учебном процессе кафедры генетики, селекции и семеноводства ФГБУО ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» при чтении курсов: «Цитология», «Генетический мониторинг», «Биологическое тестирование почвы».

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Оценка фитотоксичности почвы после применения послевсходовых гербицидов проводится на основе двух тест-объектов относящихся к высшим растениям, в двух состояниях: семена и взрослое растение.

2. Основным критерием селекционной оценки генотипов подсолнечника и озимой пшеницы, подвергшихся обработке послевсходовыми гербицидами, являются фертильность и однородность пыльцы.

3. Цитологические показатели пыльцы растений сопряжены с показателями продуктивности растений озимой мягкой пшеницы, а именно:

длиной колоса, числом колосков, числом зерен, массой колоса, массой зерен, числом недоразвитых колосков, числом недоразвитых зерен, массой 1000 зерен.

4. Наследование негативного действия послевсходовых гербицидов на репродуктивную систему озимой мягкой пшеницы и продуктивность растения изучится в поколении.

Апробация работы. Основные положения и результаты работы докладывались и обсуждались на конференциях и конкурсах: Всероссийская научно-практическая конференция молодых ученых и специалистов «Научное обеспечение агропромышленного комплекса» (г. Краснодар, 2011, 2012, 2013); Международная научно-практическая конференция «Наука и образование в XXI веке» (г. Москва, 2013), Международная научно-практическая конференция «Вклад ВОГиС в решение проблем инновационного развития России (г. Краснодар, 2011), Научно-практическая конференция преподавателей по итогам НИР за 2012 и 2013 год (г. Краснодар, 2013, 2014), VI съезд Вавиловского общества генетиков и селекционеров (ВОГиС) и ассоциированные генетические симпозиумы.

Экологическая генетика (г. Ростов-на-Дону, 2014).

По итогам конкурса для обучения в Международной летней школе «Биотехнология в сельском хозяйстве (AgroBioTech)», г. Москва, 2012 автор награждена грантом». Является победителем Всероссийского конкурса на лучшую научную работу среди студентов, аспирантов и молодых ученых высших учебных заведений МСХ РФ по направлению «биологические науки», Орел, 2013. По итогам конкурса награждена дипломом победителя и дипломом лауреата премии по поддержке талантливой молодежи, установленной Указом Президента Российской Федерации от 6 апреля 2006 г.

№ 325 «О мерах государственной поддержки талантливой молодежи».

В Государственном реестре изобретений Российской Федерации зарегистрировано четыре патента на полезную модель, получено три свидетельства о государственной регистрации базы данных.

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 10 научных работ, в т. ч. 3 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура работы.

Работа изложена на 120 страницах машинописного текста. Иллюстративный материал представлен в 30 таблицах и на 23 рисунках. Состоит из: введения, пяти глав с описанием современного состояния проблемы на основании источников литературы, описанием исходного материала и методов, используемых при решении поставленных задач, экспериментальных результатов и их обсуждения, выводов, рекомендаций для селекционной практики. Список литературы включает 174 источника, в том числе 19 на иностранном языке и 2 приложения.

Личный вклад автора. В соответствии с индивидуальным планом научно-исследовательской работы автор провела полевые и лабораторных исследования. В полевых условиях соискатель организовала закладку, уход и уборку полевого опыта. Оценка образцов растений по изучаемым признакам осуществлялась в лаборатории кафедры генетики, селекции и семеноводства. Интерпретировала экспериментально полученные данные, сделала выводы, предложения производству.

Автор выражает глубокую благодарность своему научному руководителю д.б.н., профессору Л. В. Цаценко за постоянную помощь, внимание, поддержку, за ценные советы при обсуждении полученных результатов и содействие в выполнении данной работы, оказываемых на всех этапах выполнения диссертационной работы.

ГЛАВА 1

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

–  –  –

Озимая пшеница представлена двумя видами: Triticum aestivum L. – пшеница мягкая и Triticum durum Desf. – пшеница твердая, относящимися к семейству Мятликовые (Роасеае) [Куперман Ф. М., 1983; Тюпаков Э. Ф., Бровкина Т. Я., 2008]. Пшеница это типичный самоопылитель, хотя возможно и перекрестное опыление. У большинства видов цветение закрытое.

Цветение – переломный момент в жизни растений, переход от вегетативного роста к генеративному развитию. Для образования цветков необходимо накопление в растении питательных веществ и фитогормонов, в т. ч. регулирующих макро- и микроспорогенез [Поддубная-Арнольди В. А., 1964; Батыгина Т. Б., 1974; Бажина Е. В. и др., 2007].

Начало цветения особей данного вида зависит от условий. Прямой солнечный свет, сухость, накопление сахаров стимулирует цветение, затенение, избыток азота – тормозит [Куприянова Л. А., Алешина Л. А., 1972].

Цветение на одном колосе протекает не одновременно. Обычно оно начинается с цветков, находящихся несколько ниже средины колоса, и идет поочередно к вышерасположенным и к нижерасположенным колоскам колоса, верхние и нижние колоски отцветают последними [Батыгина Т. Б, 1962; Морозова З. А., 1983].

Продуктивность цветков зависит от срока их цветения. Как правило, наиболее крупное зерно формируется в цветках первых сроков цветения [Albooghobaish N., Zarinkamar F., 2011].

Соцветие – сложный колос, который состоит из стержня колоса и колосков. Стержень колоса коленчатый, состоит из члеников, в местах их сочленения образуются выступы, на которых располагаются колоски. Колосок состоит из двух колосковых чешуи, в которых располагаются цветки. Количество цветков в колоске 2 – 5, количество зерен – 2 – 3 [Батыгина Т. Б, 1974; Голубинский И. Н., 1974].

Колосок состоит из двух цветковых чешуи – наружной (нижней) и внутренней (верхней), более мягкой, чем колосковые. У остистых сортов наружная цветковая чешуя несет ость. Колосковая чешуя имеет киль, колосковый (килевой) зубец и плечо. Между цветковыми чешуями находится пестик с верхней завязью и двухлопастным перистым рыльцем, три тычинки и две бесцветные пленочки (лодикуле), способствующие при набухании раскрытию цветка. Длина колосьев – 7 – 13 см, количество колосков в колосе – 12–24 [Куперман Ф. М., 1983; Челак В. Р., 1991].

Пыльца развивается в пыльниках тычинок. Пыльцевое зерно – это специализированная структура, которая включает спермии, или мужские гаметы цветковых растений. Слово «пыльца» (pollen) введено шведским ученым – ботаником Линнеем в 1760 г., которое означает сухость и сыпучесть. Пыльцевое зерно состоит из двух или трех клеток, объединенных в одно целое [Нокс Р. Б., 1985; Куприянова Л. А., Алешина Л. А., 1972].

Совокупность мужских генеративных органов в цветке называется андроцеем. Формирование микроспор – микроспорогенез – происходит в пыльниках тычинок – микроспорангиях. Образовавшиеся микроспоры затем проходят следующий цикл развития – гаметогенез, в результате которого в цветке формируется мужской гаметофит – пыльца [ПоддубнаяАрнольди В. А., 1964; Цаценко Л. В. и др, 2012].

Количество пыльцы в пыльнике различных культур варьирует от нескольких десятков до нескольких миллионов, например у кукурузы 1,5 млн. шт., а количество пыльцы у пшеницы составляет – 3000 – 5000 шт.

[Тер-Аванесян Д. В., 1949; Геодакян В. А., 1978; Chang M. X., Neuffer M.

G., 1989; Очнев А. С., 2006; Рудая Н. А., 2010].

Развитие пыльцевых зерен в пыльнике, начинается с момента заложения бугорков тычинок в конусе нарастания цветочной почки, которые дают начало двум образованиям. Из нижней части его развивается тычиночная нить, из верхней – пыльник [Бессонова В. П., 1992; Билич Г. и др.,1999; Батыгина Т. Б. и др., 2010].

Тычиночная нить развивается из меристемы и состоит из эпидермиса и тонкостенной рыхлой паренхимы, в середине ее проходит сосудистый пучок из кольчатых и спиральных сосудов ксилемы [Ali M. A. et al, 1998;

Adachi Y. et al, 2009]. Элементы флоэмы слабо выражены или отсутствуют.

Нити тычинок могут срастаться основаниями, или по всей длине нити, образуя тычиночную колонку, как у тыквенных и мальвовых. У некоторых семейств срастаются не нити, а сами пыльники, образуя при этом пыльниковую трубку, а тычиночные нити остаются свободными (сложноцветные).

Тычиночная нить делится на короткую (сидячие пыльники) и длинную, которая эластичная как, например, у ветроопыляемых злаков, иногда встречаются случаи, когда нити отсутствуют или совсем не развиваются [Эрдтман Г., 1956; Куприянов П. Г., 1989; Батыгина Т. Б., 1994].

Размер пыльцевых зерен очень сильно варьирует, но у большинства растений не превышает 50 мкм. [Голубинский И. Н., 1974; Ибрагимова Э. Э., 2009]. Известно, что у некоторых культур размер пыльцевого зерна строго индивидуален в зависимости от генотипа. Диаметр пыльцевых зерен у томата культурного (Lycopersicon esculentum Mill.) варьирует от 21,3 до 23,9 мкм [Жученко А. А., 1973], а пшеницы 25,1 – 73,1 мкм в длину, 23,2 – 64,2 мкм в ширину [Тер-Аванесян Д. В., 1949; Курманов Р.Г., Морозова З. А., 2009].

В цитологических исследованиях установлено, что форма пыльцевого зерна у пшеницы бывает экваториально-1-поровой, яйцевидной, широкояйцевидной, эллипсоидальной и шаровидной, а в очертании овальные, широкоовальные, эллиптические и округлые [Кашин А. С., 1999; Дубровский М. Л. и др., 2011].

Каждое зерно покрыто сложно устроенной оболочкой – спородермой, состоящей из двух слоев – внутреннего (интины) и наружного (экзины). Экзина содержит уникальный биополимер – спорополленин. Благодаря его невероятной химической устойчивости пыльца не разрушается даже при кипячении в растворах концентрированных кислот и щелочей [Геодакян В. А., 1978; Круглова А. Е., 2011].

Температура для прорастания пыльцы пшеницы варьирует от 4 до 20 °С, наиболее оптимальные 20 – 25°С при влажности 80 – 90 %,, тогда как при жаркой и сухой погоде пыльца пересыхает и теряет свою жизнеспособность [Голубинский И. Н., 1974; Батыгина Т. Б., 1974; Гилберт С., 1994].

По данным ряда авторов, установлено, что в состав пыльцы входят углеводы (34%), каратиноиды, их доля составляет от 0,7 до 0,212 мг на 100 гр. сухой пыльцы. В ней так же содержатся витамины, минералы, в общей сложности находятся 28 элементов, и являются стимуляторами физиологических процессов в любом живом организме [Куприянова Л. А., Алешина Л. А., 1972; Круглова А. Е., 2009; Цаценко Л. В., 2012].

У пыльцевого зерна имеются на спородерме апертуры, которые имеют различную форму и структуру. Различают: поры, борозды, бородки, щели или просто утонченные, нечетко очерченные участки экзины. Апертуры бывают простые и сложные. Наличие различных апертур позволяет идентифицировать пыльцевые зерна при проведении пыльцевого анализа [Сладков А.Н., 1967; Батыгина Т. Б., Круглова H.H., 2009].

Основная функция мужского гаметофита (пыльцевого зерна) состоит в доставке мужских гамет (спермиев) к зародышевому мешку, где и осуществляется двойное оплодотворение [Круглова Н. Н., 2001; Левина Р. И.,1981].

Последовательность событий, происходящих после опыления и приводящих к успешному оплодотворению, включает в себя попадание жизнеспособного пыльцевого зерна на поверхность рыльца, его гидратацию и прорастание, проникновение пыльцевой трубки в ткани рыльца, рост пыльцевой трубки в проводниковых тканях столбика, проникновение пыльцевой трубки в зародышевый мешок, и в заключение, слияние гамет в процессе двойного оплодотворения [Куприянов П.Г., 1989;Батыгина Т. Б., 1994; Lord Е. М., 2003].

Загрузка...

Установить реакции растений на действие различных факторов окружающей среды позволяет определить критические периоды на определенных этапах онтогенеза. Следует заметить, что любые факторы среды в наибольшей степени влияют на развитие генеративных органов (пестик, тычинка), и при неблагоприятных условиях данный процесс нарушается, что может привести к снижению продуктивности растений и отразиться на урожае [Батыгина Т. Б., 1987].

Снижение урожая зерна, связано с развитием аномальных пыльцевых зерен, зависит и от длительности действия неблагоприятных факторов, а именно высокие температуры, засуха, влажность воздуха, раз-личные факторы антропогенного происхождения, а так же болезни [Бали-на Н. В., 1976; Бессонова В. П. и др., 1997; Антохина С. П. и др., 2011; Бажина Е.

В., Аминев П. И., 2012; Черепанова О. Е., Мищихина Ю. Д., 2012].

В фазе кущения пшеницы при продолжительной засухе происходит уменьшение числа продуктивных побегов растений, некроз закладывающихся колосков в колосе, а в фазе трубкования нарушается процесс образования ткани формирующихся цветков и генеративных клеток, что может привести к снижению массы зерна [Балина Н. В., 1976].

По данным Батыгиной Т. Б. (1974) установлено, что критическим фактором формирования урожая хлебных злаков является недостаток влаги. Снижение урожая зерна при засухе связано с увеличением количества стерильной пыльцы, что является результатом нарушения редукционного деления [Батыгина Т. Б., 1974].

Влажность воздуха также определяет урожай зерна. Наиболее опасна воздушная засуха в период формирования цветка и его элементов, т. к.

снижается фертильность пыльцы, что приводит к бесплодию цветков и череззернице [Альтергот В. Ф. и др., 1998].

В образовании урожая хлебных злаков и повышении устойчивости растений к неблагоприятным факторам среды большую роль играют микроэлементы. Злаковые культуры остро реагируют на потребность в минеральном питании, так у пшеницы, недостаток азота в фазе кущения и формирования колоса приводит к снижению числа колосков, что в дальнейшем снижает урожай. В период формирования колоса растениям необходимо достаточное количество фосфора [Спиридонов Ю. Я., 1996, 2003].

Известно, что при «медном» голодании растения пшеницы не наблюдается формирование соцветий. Крайне важным элементом питания для пшеницы является бор, т. к. он необходим для формирования генеративных органов и осуществления оплодотворения. Его дефицит приводит к аномальному органогенезу, нарушению процесса образования колосьев, их выхода из трубки [Куперман Ф. М., 1972, 1983].

1.2 Пыльцевой анализ репродуктивной системы озимой мягкой пшеницы Пыльцевой анализ это метод исследования, позволяющий определять репродуктивный потенциал растений по характерным морфологическим особенностям пыльцевых зрен: размеру, рисунку экзины пыльцевого зерна, его фертильности и жизнеспособности. Все эти характеристики очень важны при проведении селекционных работ с целью получения продуктивного потомства. Пыльцевые зерна являются частью растения, поэтому изменение их базовых характеристик могут сказаться на фертильности и репродуктивной способности растения [Левина Р. Е.,1981; Круглова Н. Н., 2001; Батыгина Т. Б., Васильева В. Е., 2002].

Цитологические методы исследования на спорофитах включают несколько методов: изучение прохождения фаз митоза в меристемах побегов и корешков растений, а так же мейоза в цветковых почках растений. К цитогенетическим тестам на гаметофитах относят тесты на микроядра в тетрадах микроспор, а также прохождение митоза в пыльцевых зернах и пыльцевых трубках [Бажина Е. В. и др., 2007; Брейгина М. А. и др., 2009].

В цитологических исследованиях часто используются полигенные признаки: фертильность и стерильность, проращиваемость пыльцы [Батыгина Т. Б., Васильева В. Е., 2002; Цаценко Л. В. и др., 2012].

Пыльцевой тест хорошо зарекомендовал себя в генетическом мониторинге агроценоза [Кулинкович Е. Н. и др., 2007]. При использовании пыльцы растений в качестве тест-системы при мониторинге, скрининге и для выявления токсического действия мутагенов необходимо учитывать такие ее генетические характеристики как: вид, форма, стерильность и жизнеспособность, содержание белков и крахмала, повреждение пыльцевой оболочки, израстание пыльцевых зерен [Биологический контроль окружающей среды, 2010].

Преимущества пыльцевого теста:

1. технически прост в использовании;

2. не дорог в использовании;

3. позволяет получить результат за короткий промежуток времени.

Из исследований некоторых ученых установлено, что на различные морфологические характеристики (поверхность пыльцевого зерна, диаметр, размер) влияет множество факторов биотического, абиотического, а так же антропогенного происхождения. Аномальные пыльцевые зерна могут влиять на фертильность, тем самым снижая репродуктивный потенциал культурных растений [Голубинский И. Н., 1974; Бессонова В. П., 1991, 1992, 1997].

Пыльцевой анализ используется как метод определения плоидности растений, где по наличию фертильных и жизнеспособных пыльцевых зерен можно судить об успешности селекционных работ при отдаленной гибридизации. Для высокого получения стабильного урожая зерновых культур необходимо достаточное количество качественных семян растений с высокой всхожестью. Получение качественных семян растений, в частности, зависит от качества пыльцевых зерен, которое определяется нормальным морфогенезом пыльника [Цаценко Л. В. и др., 2012].

Пыльцевой анализ успешно может быть использован для оценки цитогистологического статуса зрелых пыльников растений, что было продемонстрировано на остролодочнике сходном (Oxytropisambigua (Pall.)), представителе семейства бобовых [Круглова А. Е., 2009, 2010, 2011].

В результаты исследования были включены следующие показатели: анализ количества качественных пыльцевых зерен (фертильных, без аномалий) и аномальных пыльцевые зерна в зрелых пыльниках.

При оценке статуса адаптивности генотипа к условиям среды качество пыльцевых зерен является одним из важных показателей его репродуктивной биологии, во многом определяющим способность размножающихся растений к образованию полноценных, качественных семян. Для воспроизводства популяций необходимо сохранение нормального прохождения микро- и магрогаметогенеза.

Многие авторы активно обсуждают проблему образования различного рода аномалий пыльцевых зерен [Устинова Е. И., 1965; Куприянова Л. А., Алешина Л. А., 1972; Хохлов С. С. и др., 1978; Веселова Т. Д. и др., 1996; Гудкова Т. И., 2000]. Качество пыльцевых зерен является одним из важнейших факторов репродуктивной биологии, которое во многом определяется способностью размножающихся растений к образованию полноценных качественных семян.

Микроспоро- и микрогаметогенез оценивают как функциональноадаптивные процессы, в числе прочих факторов обеспечивающих надежность воспроизводства популяций растений. Качество пыльцевых зерен связано с понятием «реальная семенная продуктивность» – важнейшим показателем оценки механизмов семенного размножения [Злобин Ю. А., 2000].

По мнению Кругловой А. Е. (2011), понятие «дегенерация» расценивается как остановка в развитии и последующем нарушении процесса развития пыльцевого зерна, так у остролодочника сходного это отразится на спорогенных клетках, микроспорах с невакуолизированной, слабовакуолизированной и сильновакуолизированной фазами, микроспороцитах).

Итогом процесса дегенерации пыльцевого зерна следует считать стерильность. К стерильной пыльце в зрелых пыльниках остролодочника сходного следует отнести не только все аномальные пыльцевые зерна, но и нежизнеспособные пыльцевые зерна нормальной морфологии, не прорастающие на оптимизированной питательной среде. Тем самым понятие «стерильность» шире понятия «аномальность» [Круглова А. Е., 2010].

Помимо понятия «аномальность пыльцы» следует различать понятие «дефектность пыльцы», к ним относятся те зрелые пыльцевые зерна, которые отличаются от нормальных слабым окрашиванием ацетокармином или йодным раствором, формой, величиной.

По мнению Куприянова П. Г. (1975), необходимо понимать, что в зрелом пыльнике, у растений с высокой репродуктивной способностью, помимо фертильной (нормальной) пыльцы имеется некоторое количество аномальных (абортивных, стерильных) пыльцевых зерен.

Нарушение развития пыльцевых зерен это защитная реакция растительного организма на воздействие негативных (неблагоприятных) внешних факторов, которое отраажается в критические периоды развития пыльника в цветке.

Известно, что на качество пыльцевых зерен могут оказывать влияние различные факторы: способ размножения, цитоплазматическая стерильность, внутривидовая гибридизация, антропогенное загрязнение окружающей среды, ядерная мужская стерильность [Мейер-Меликян Н. Р.

и др.,1999].

Жизнеспособность пыльцевых зерен тесно связана с таким понятием репродуктивной биологии как «достаточность опыления». Жизнеспособность пыльцы – под этим термином понимают способность фертильной пыльцы прорастать на рыльце пестика при наличии благоприятных условий опыления [Ибрагимова Э. Э., 2009].

Жизнеспособная (т. е. живая) пыльца физиологически очень активна. Разработано много методов определения жизнеспособности пыльцы, однако универсального метода, пригодного для всех растений нет. Из всех методов исследования жизнеспособности пыльцы в селекционных работах основное значение имеет метод проращивания пыльцы в искусственной питательной среде и наблюдение за прорастанием пыльцы непосредственно на рыльце пестика, а также методы окрашивания, рекомендуемые для свежесобранной пыльцы [Крюков В. И., 1999; Дьяченко Г. И., 2003].

Фертильность пыльцы – это способность производить оплодотворение. Определяется по степени сформированности (зрелости) пыльцевого зерна на основе нескольких методов [Биологический энциклопедический словарь, 1986].

Фертильность пыльцевых зерен определяют их окрашиванием красителями, например, ядерными – ацетокармином или ацетоорсеином [Макогон И. В., 2007]. У фертильных пыльцевых зерен зернистая цитоплазма и спермии окрашиваются в ярко карминово-красный цвет. Стерильные пыльцевые зерна, в свою очередь почти не окрашиваются ацетокармином или окрашиваются неравномерно. Спермиев в таких пыльцевых зернах нет, а содержимое пыльцы выходит за пределы пыльцевого зерна [Паушева З. П., 1988; Пухальский В. А. и др., 2007].

Стерильность пыльцевых зерен – неспособность зрелой пыльцы к оплодосворению. Летальность пыльцевых зерен может быть вызвана как генами ядра, генами цитоплазмы или взаимодействием генов ядра и генов цитоплазмы [Биологический энциклопедический словарь, 1986].

Стерильность пыльцы у растений может быть вызвана воздействием условий внешней среды, внеядерными наследственными детерминантами (цитоплазматическая стерильность пыльцы), генетическими дефектами развития. Нежизнеспособной оказывается пыльца у растений с нечетной полиплоидией в связи с невозможностью правильного расхождения хромосом в мейозе [Веселова Т. Д. и др.,1996; Брейгина М. А. и др., 2009].

Встречаются случаи частичной стерильности пыльцы у растений, обозначаемой терминами полустерильность или полуфертильность [Ибрагимова Э. Э., 2009].

1.3 Действие гербицидов на функционирование мужского гаметофита озимой мягкой пшеницы и других культур Семенная продуктивность, как составляющая репродуктивного процесса, является одним из важных показателей жизнеспособности вида в конкретных условиях [Вайнагий И. В., 1974].

Реальная семенная продуктивность может снижаться под действие различных внешних факторов – температуры почвы и воздуха, влажности, длины светового дня и интенсивности освещения, условий погоды конкретного сезона, приходящие на такие фенофазы, как цветение и созревание плодов [Левина Р. Е, 1981; Злобин Ю. А., 2000]. Важную роль в плодообразовании играют факторы, связанные с особенностями строения и развития репродуктивных органов, а именно дефектная пыльца, аномальные изменения зародышевого мешка, небольшое количество пыльцевых зерен в гнездах пыльника и др.), которые определяются генотипом [Барская Е. И., Балина Н. В.,1977; Бажина Е. В., Квитко О. В., 2007].

При неблагоприятных условиях окружающей среды нарушается процесс развития генеративных органов растения. Антропогенное загрязнение среды заметно снижает фертильность пыльцы, вызывает расширение спектра аномалий мужского гаметофита у цветковых и влияет на морфологические особенности пыльцевого зерна, размер, плоидность, химический состав и функционирование мужского гаметофита [Бессонова В. П. и др., 1997; Солнцева М. П., Глазунова К. П., 2010]. Исследования реакции растений на действие каких-либо факторов позволяют выявить наиболее чувствительные фенофазы и критические стадии в развитии репродуктивных структур [Челак В. Р., 1991].

В современном мире на окружающую среду все больше приходится антропогенное воздействие. Одним из таких вмешательств является химическое загрязнение экосистемы, веществами абиотического происхождения, к числу которых относятся пестициды, широко применяемые при выращивании сельскохозяйственной продукции [Мосунов С. А., 2008; Звягина А. С., 2014].

Сорняки могут нанести непоправимый вред культурным растениям и снизить урожайность на 50 – 70%. Они используют из корнеобитаемого слоя почвы огромное количество воды, макро- и микроэлементов [Лысов А. К., 2010].

Так как чувствительность мужского гаметофита растений зависит от внешних факторов и реагирует на их изменение, то пыльцевой тест стали широко применять при цитогенетическом мониторинге агроценоза. Этот метод позволяет проводить учет абберантной пыльцы и за короткий промежуток времени получить первичную информацию о степени генетической стабильности вида и экосистемы в целом [Круглова А. Е., 2009,2011;

Ибрагимова Э. Э., 2010].

Механизм действия гербицидов заключается в многостороннем влиянии на рост и развитие целого растения и его органов, клеток и тканей, на физиологические процессы, ферментативные реакции, белковые и клеточные структуры, а так же различные органеллы клеток [Антохина С. П. и др., 2011; Лукомец В. М. и др., 2012]. Комплексная оценка ценоза позволяет уловить механизм действия гербицидов на растения и почву. Действие гербицидов, в первую очередь, определяется его взаимодействием с чувствительными органами растений на молекулярном и клеточном уровнях [Захаренко В. А., 2000; Ларина Г. Е. и др., 2001; Солнцева М. П., Глазунова К. П., 2010].

Механизм действия гербицидов связан с поведением и характером

вещества-токсиканта в растении, а так же с поглощением, а затем перемещением его по тканям. Влияние гербицидов заключается в нарушении процессов образования органических соединений в ходе фотосинтеза, процессов генерирования энергетических и химических связей при дыхании и окислительном фосфорилировании. Происходит замедление синтеза белков, нуклеиновых кислот, клетчатки и крахмала, алкалоидов, пектина, кумаринов, антоциана, фитогормонов, танинов, распад и образования низкомолекулярных органических соединений, необходимых для нового синтеза [Федке К, 1985; Филипчук О. Д. и др., 2010; Проскурина А. А., 2011].

Устойчивость растений к гербицидам определяется совокупностью морфологических, физиологических и биохимических факторов, от которых зависит соотношение количеств попавшего на растение, поглощенного и разрушенного токсиканта. Если скорость детоксикации гербицида равна скорости его поступления в места действия, растение проявляет устойчивость [Яблонская Е. К., Плотников В. К., 2006].

Работы по установлению влияния загрязнителей, в том числе и гербицидов проводились на многих культурах: кукурузе, подсолнечнике, хлопчатнике, ячмене, томате.

По результатам исследований многих авторов было установлено, что поллютанты, в том числе и гербициды, оказывают негативное влияние на процессы микроспорогенеза, затрагивают различные стадии митоза и мейоза, что в дальнейшем может привести к нарушению формирования пыльцевых зерен при этом они теряют фертильность и жизнеспособность [Тер-Аванесян Д. В., 1949, 1969; Венгорек В.,1992; Веселова Т. Д. и др.,1996; Ниловская Н. Т. и др., 1999; Цаценко Л. В., Синельникова А. С., 2011, 2012].

В работе Очнева А.С. (2006) было показано, что кукуруза является высокоустойчивой к труднорастворимым симтриазинам. Это объясняется наличием в клеточном соке кукурузы специальных ферментов, способных инактивировать глюкозиды и бензоксазины, которые разрушают гербицид химически. Клеточный сок кукурузы, содержащий большой процент фермента пероксидазы, почти полностью разлагает симазин. Применение ацетала, примэкстры, харнеса, трофи, дуал и других почвенных гербицидов в рекомендованной дозе и даже в двойной дозе не влияет на микроспорогенез. Однако влияние послевсходовых гербицидов, таких как титус, магрои базис, которые на сегодняшний день наиболее часто используются по всходам кукурузы, особенно на участках гибридизации, практически недостаточно изучены в плане пыльцеообразующей способности кукурузы, полноте опыления женских соцветий пыльцой метелки растений, обработанных гербицидами [Очнев А. С., 2006].

Для подсолнечника, культуры с перекрестным типом опыления, качество пыльцы особенно актуально в биологии цветения. Появление стерильных пыльцевых зерен может приводить к снижению завязываемости семян в корзинке [Whelan E. D. P., 1978]. При проведении пыльцевого анализа важным является установление зависимости между генотипом исследуемых линий подсолнечника и их устойчивость к токсикантам. В собственных исследованиях на определение влияния гербицидов на репродуктивную систему подсолнечника было установлено, что значительного снижения фертильности у обработанных гербицидом Евро-Лайтнинг линий подсолнечника не происходило [Синельникова А. С. Цаценко Л. В., 2011; Лукомец В. М. и др., 2012]. Для культуры подсолнечник фертильность пыльцы в норме достигает 90–100% [Воронова O. H., 2008]. Во всех случаях с применением гербицидов фертильность пыльцы была в пределах нормы.

В работе по выявлению влияния гербицидов на репродуктивную систему подсолнечника был проведен анализа изменения доли основного типа пыльцевых зерен в зависимости от обработки гербицидом.

У растений подсолнечника важным качеством пыльцы является ее фертильность и однородность [Fairchild J. F. et al, 1997]. Было выявлено, что пыльца всех изученных линий гербицидоустойчивого подсолнечника характеризовалась неоднородностью, т.е. выделялись крупные и мелкие пыльцевых зерна и слипшиеся, что является основной характеристикой пыльцевой продуктивности изученных растений.

По результатам исследований Козловой Е.В. (2011) установлено, что влияние гербицидов Грассер и Овсюген Экспресс на фертильность пыльцы яровой пшеницы привело к увеличению доли аномальных пыльцевых зерен в 1,2 и 1,9 раза по сравнению с контрольным вариантом, а так же возрастала частота нарушений формирования оболочек пыльцевого зерна, более чем в 2 раза по сравнению с контролем. При анализе выделяли следующие признаки: пыльцевые зерна без вегетативного ядра, пустые, дегенеративные, с одним спермием, с отставанием цитоплазмы, с отсутствием спермиев, с несколькими признаками.

При определении фертильности пыльцы пшеницы, после обработки другими гербицидами было отмечено увеличение доли аномальных пыльцевых зерен на 14,0% и 20,5% по сравнению с контрольным вариантом на вариантах, обработанных гербицидами Фенизан и Секатор. В свою очередь, в варианте с применением Триатлона фертильность была в 2 раза ниже контроля, что выразилось в общем снижении доли аномальных пыльцевых зерен в основном за счет уменьшения частоты дефектов оболочки [Козловой Е. В., 2012].

1.4 Биологическое тестирование в системе генетического мониторинга Генетический мониторинг – это научное направление, в рамках которого разрабатывается методология оценки поступления, накопления и процесс влияния в окружающей среде генотоксических веществ, изучение спектра мутационного воздействия, а так же способность вызывать тот или иной вид генетических нарушений. Генотоксиканты – это вещества и агенты, способные индуцировать мутации в клетках организмов (половых и соматических), что является причиной наследуемых изменений в первом случае и бластомогенеза – во втором [Биологический контроль окружающей среды: генетический мониторинг, 2010].

Оценка фитотоксичности почвы является одним из методов генетического мониторинга растительных систем, т. к. позволяет выявить зависимости между загрязнением почвы поллютантами и влиянием их на репродуктивную систему высших растений [Куриленко В. В. и др., 2004].

Наиболее перспективными исследованиями фитотоксичности почвы, а также тестированием загрязнения воды пестицидами является биотестирование. Биотестирование – процедура установления токсичности среды с помощью тест-объектов, показывающих присутствие отравляющих веществ по изменению жизненно важных функций у тест-объектов. Биологические тест – системы показывают общий индекс токсичности образца и позволяют в короткие сроки определить присутствуют или нет в среде токсические агенты в опасной для живого организма концентрации [Цаценко Л. В., 2001].

При исследованиях фитотоксичности почвы или ингибирующего действия химического препарата на рост и развитие растений необходимо точно подбирать тестирующую систему, т. к. каждый биологический объект имеет индивидуальный отклик на токсические агенты. Тест на проростках достаточно прост и имеет быстрый отклик, что сокращает время на проведение исследований, анализ ведется по количеству проросших и не проросших семян. Однако есть недостаток данного теста для биотестирования и он заключается в том, что на первых этапах онтогенеза семенных культур развитие организма происходит за счет белков эндосперма, поэтому уловить токсичный эффект анализируемых гербицидов не всегда удатся [Биологический контроль окружающей среды: генетический мониторинг, 2010].

В настоящее время растительные тест-системы хорошо обоснованы

и широко используются для оценки качества окружающей среды. Растения доминируют в любом ландшафте, воздействие на них может изменить структуру и функции экосистемы, что ведет к снижению первичной продуктивности, увеличению поверхностного стока и эрозии почв, деградации среды обитания. Ответная реакция растений на воздействие оценивается на разных уровнях биологической организации от ДНК и хромосом до организма и популяции [Веселова Т. Д. и др., 1996; Ибрагимова Э. Э., 2010].

Эффекты загрязнения сначала проявляются на молекулярном уровне, что делает анализ ответных реакций клетки быстрым и удобным инструментом для ранней диагностики воздействия [Бажина Е. В., 2007;

Воронова О. Н., 2008].

Для растений характерны высокие темпы развития, быстрая смена фаз онтогенеза. Они производят большое количество потомков, что открывает широкие возможности для исследования наследственных эффектов.

Генетическая идентичность используемых в целях биоиндикации растений может быть достигнута путем вегетативного размножения. Методики работы с большинством растительных тест-систем детально отработаны и носят стандартизованный характер. Не требуют высокой квалификации персонала, а сам тест относительно недорогой и позволяет использование большинства растительных тест-систем [Цаценко Л. В., Малюга Н. Г., 2000].

Поведение поллютантов в почве достаточно хорошо изучены, однако, последствия влияния комплексного воздействия пестицидов на био- и агроценозы, фитопопуляцию в допустимых концентрациях исследованы недостаточно.

Остатки агрохимикатов в почве и растениях вступают в сложные взаимодействия различного характера, включая антагонизм, синергизм, аддитивность [Биологический контроль окружающей среды: Биоиндикация и биотестирование, 2007].

Для получения полной картины загрязнения агроценоза необходимо проводить исследования в двух и более направлениях. Должны совершенствоваться методы инструментального химического анализа с применением ряда биоиндикаторов, относящихся к разным таксономическим группам.

Применение организмов, реагирующих на загрязнение среды обитания изменением визуальных признаков, имеет ряд преимуществ. Оно позволяет существенно сократить или даже исключить применение дорогостоящих и трудоемких физико-химических методов анализа. Биоиндикаторы интегрируют биологически значимые эффекты загрязнения, которые позволяют определять скорость происходящих изменений, пути и места скопления в экосистемах различных токсикантов, делать выводы о степени опасности для человечества и окружающей среды конкретных веществ или их сочетаний [Barker E. А., Виkоvас М. J., 1971; Augustine J. J. et al, 1973;

Дзюба О. Ф., 2006].

Специальные биотесты для определения загрязнения среды остатками пестицидов, солями тяжелых металлов, микотоксинами и другими агентами сводятся к оценке степени изменения показателей биоты (морфометрических, физиологических и биохимических). Нарушения развития тест-растений, как биоиндикаторов, отражаются в изменении всхожести и энергии прорастания семян, размеров корней и ростков проростков, а так же в пoврeждeнии растeний под воздействием поллютантов.

В нашей стране для оценки фитотоксичности почвы используется значительное количество методов, проводимых с использование различных культурах: озимой и яровой пшенице (Triticum aestivum L.), гречихе (Fagopyrum L.), белой горчице (Sinapis alba L.), кресс-салате (Lepidium sativum L.), овсе (Avena L.), сое (Glycine L.), льне (Linum L.), еже сборной (Dactylis glomerata L.), огурце (Cucumis L.), редисе (Raphanus sativus L.).

На горчице, как тест-культуре, оценивают степень ингибирования первичного корешка проростка при обработки семян противодвудольным гербицидом по показателям торможения прироста листьев надземной массы проростков и увядание растений [Лисовицкая O. B. И др., 2010].

Овес, ежу сборную и рис используют как индикаторы почвенных противозлаковых гербицидов, они являются наиболее чувствительными видами среди злаковых культур. Основным тестом является торможение роста зародышевого корня и листа [Галицкая П. Ю. и др., 2011; Васильев А. В. и др., 2012].

Редис и кресс-салат являются традиционными биотестерами при исследовании остатков пестицидов в почве и воздухе. Они являются наиболее высокочувствительными к токсичным препаратам, и определяются высокой энергией прорастания семян. Тест длится 7 – 14 дней. При наличии вредных веществ снижается процент всхожести и ингибируется рост зародышевых корешков [Заболотских В. В. и др., 2012].

Проанализировав литературу многих ученых можно предположить, что возможно в скором времени будут созданы сорта (линии) культурных растений чувствительные к загрязнению, для проведения биоиндикации, а это приведет к поиску успешного решения проблемы экологического состояния окружающей среды, но, к сожалению, в настоящее время подобные сорта и линии отсутствуют, в этом случае у исследователей усилия должны быть направлены на поиск информативных и перспективных форм, а так же работу с ними.

Для оценки токсичности гербицидов используют помимо семенных культур рясковый тест, т.е. в качестве тестирующего объекта выступают водные высшие растения семейства рясковых Lemnaceae, которые характеризуются простотой строения, быстрой скоростью размножения и высокой чувствительностью [Пашкевич В. Д. и др., 1978; Цаценко Л. В., Филипчук О. Д., 1999; Евгенъев М. И., 1999; Руководство по определению методом биотестирования токсичности вод, донных отложений, загрязняющих веществ и буровых растворов, 2002].

Среди видов рясок для биотестирования используют ряску малую (Lemna minor L.), ряску горбатую (Lemna gibba L.), многокоренник обыкновенный (Spirodella polyrrhiza L.). В природе рясковые особенно хорошо растут в достаточно обогащенных питательными веществами (фосфаты, нитраты, аммиак), водоемах [Цаценко Л. В., Перстенева А. А., 2010].

При биологическом анализе загрязнения почв на основе водной вытяжки с помощью видов рясок используют следующие показатели: количество листецов и их диаметр, наличие или отсутствие корней, а также их количество, цвет, кроме этого анализируют длину корней, сухую или сырую биомассу, интенсивность фотосинтеза, содержание хлорофилла. Продолжительность тестирования от 3 до 14 суток [Методы биоиндикации и биотестирования природных вод, 1987; Биологический контроль окружающей среды: биоиндикация и биотестирование, 2007].

По литературным данным комплексных исследований действия гербицидов на репродуктивную систему озимой пшеницы знаний еще недостаточно. Однако, имеются некоторые подходы к оценке и наблюдению за элементами агроценоза, присутствует фрагментарность таких работ.



Pages:   || 2 | 3 | 4 |
Похожие работы:

«Деревянко Ксения Николаевна ОРГАНИЗАЦИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ ПРОВЕДЕНИЯ КАДРОВОГО АУДИТА В КОММЕРЧЕСКИХ ОРГАНИЗАЦИЯХ Специальность 08.00.12 – Бухгалтерский учет, статистика Диссертация на соискание ученой степени кандидата экономических наук Научный руководитель: доктор...»

«АЛЕКСАНДРОВА ТАТЬЯНА СЕРГЕЕВНА Совершенствование оценки и технологических приемов выращивания цыплят-бройлеров Специальность: 06.02.10. частная зоотехния, технология производства продуктов животноводства Диссертация на соискание ученой степени кандидата...»

«САГИНА ОКСАНА АЛЕКСАНДРОВНА УПРАВЛЕНИЕ МОДЕРНИЗАЦИЕЙ ОРГАНИЗАЦИЙ ХЛЕБОПЕКАРНОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ Специальность 08.00.05 – Экономика и управление народным хозяйством (экономика, организация и управление предприятиями, отраслями, комплексами: АПК и сельское хозяйство) ДИССЕРТАЦИЯ на...»

«КУМЕЙКО Юлия Владимировна ОСОБЕННОСТИ АЗОТНОГО РЕЖИМА РИСОВОЙ ЛУГОВОЧЕРНОЗЁМНОЙ ПОЧВЫ ЗАПАДНОГО ПРЕДКАВКАЗЬЯ И УРОЖАЙНОСТЬ РИСА ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ИНГИБИТОРОВ НИТРИФИКАЦИИ Специальность 03.02.13 – Почвоведение Диссертация на соискание учёной степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный руководитель кандидат сельскохозяйственных наук...»

«МИХАЙЛЕНКО Ирина Ивановна ОЦЕНКА ЭКОЛОГИЧЕСКОЙ ПЛАСТИЧНОСТИ РЕГИОНАЛЬНО ДОМИНИРУЮЩИХ ВНУТРИВИДОВЫХ ВАРИАНТОВ ОЗИМОЙ ПШЕНИЦЫ В ПРЕДЕЛАХ СКЛОНОВЫХ ЛЕСОСТЕПНЫХ АГРОЛАНДШАФТОВ ЦЧЗ РОССИИ 03.02.08. – экология (биология) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Смирнова...»

«СМИРНОВА СВЕТЛАНА КОНСТАНТИНОВНА УСКОРЕННОЕ СОЗДАНИЕ ГАЗОННЫХ АГРОФИТОЦЕНОЗОВ В УСЛОВИЯХ СЕВЕРА НЕЧЕРНОЗЕМНОЙ ЗОНЫ РОССИИ 06.01.08 – ПЛОДОВОДСТВО, ВИНОГРАДАРСТВО Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук...»

«Тимерханова Эльвира Накиповна РЕГИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ УПРАВЛЕНИЯ МОДЕЛЯМИ РАЗВИТИЯ МАЛОГО БИЗНЕСА Специальность 08.00.05 Экономика и управление народным хозяйством (региональная экономика) ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата экономических наук Научный руководитель: доктор экономических наук, профессор Шишкин М.И....»

«Деревянко Ксения Николаевна ОРГАНИЗАЦИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ ПРОВЕДЕНИЯ КАДРОВОГО АУДИТА В КОММЕРЧЕСКИХ ОРГАНИЗАЦИЯХ Специальность 08.00.12 – Бухгалтерский учет, статистика Диссертация на соискание ученой степени кандидата экономических наук Научный руководитель: доктор...»

«Анатольевна ОТНОШЕНИЙ управление хозяйство) Диссертация степени наук консультант: наук, профессор С.Оглавление ВВЕДЕНИЕ ХОЗЯЙСТВА хозяйства экономикой ОСНОВЫ 2.ОТНОШЕНИЙ хозяйства хозяйстве экономики отношений ХОЗЯЙСТВЕ землю 15 многоукладной 17 экономики издержек рынка социальноПРОИЗВОДСТВА АПК задачи области области преобразований экономики партнерства –  –  – варианту инновационному варианту варианту варианту ВВЕДЕНИЕ агроэкономики. культур. задачей. реальных...»

«Маджар Дмитрий Андреевич ОСОБЕННОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ДЛЯ РЕГУЛЯЦИИ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ ПЛОДОВЫХ РАСТЕНИЙ Специальность 03.01.05 – физиология и биохимия растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный...»

«Царахова Марина Вячеславовна ОРГАНИЗАЦИОННО-ЭКОНОМИЧЕСКИЙ МЕХАНИЗМ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ И РАЗВИТИЯ КРЕСТЬЯНСКИХ (ФЕРМЕРСКИХ) ХОЗЯЙСТВ (на материалах Республики Северная Осетия-Алания) Специальность 08.00.05 – Экономика и управление народным хозяйством:...»

«ЛОЩИНИНА ЕВГЕНИЯ ВИКТОРОВНА ОЦЕНКА БЕЗОПАСНОСТИ И ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТА «ГЕПАСЕЙФ» ПРИ ГЕПАТИТАХ ЖИВОТНЫХ 06.02.01 – Диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой...»

«Губаев Александр Владимирович ОЦЕНКА И МОНИТОРИНГ ЛЕСНОГО ПОКРОВА ПО СПУТНИКОВЫМ СНИМКАМ СРЕДНЕГО И ВЫСОКОГО ПРОСТРАНСТВЕННОГО РАЗРЕШЕНИЯ (НА ПРИМЕРЕ СРЕДНЕГО ПОВОЛЖЬЯ) 06.03.02 – «Лесоведение, лесоводство, лесоустройство и лесная таксация» Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук...»

«ФАРНИЕВА КАТЕРИНА ХАИРБЕКОВНА «ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИНТРОДУКЦИИ И ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЭХИНАЦЕИ ПУРПУРНОЙ (Echinacea purpurea (L) Moench) В УСЛОВИЯХ РСО-АЛАНИЯ» Специальность 03.02.14 – Биологические ресурсы Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Заслуженный деятель науки РФ и РСО-Алания, доктор сельскохозяйственных наук,...»

«ОСЕПЧУК ДЕНИС ВАСИЛЬЕВИЧ НАУЧНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ НЕТРАДИЦИОННЫХ РАСТИТЕЛЬНЫХ ИСТОЧНИКОВ БЕЛКА И ЖИРА В КОРМЛЕНИИ МЯСНОЙ ПТИЦЫ 06.02.08 – кормопроизводство, кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов Диссертация на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук Научный консультант: Кононенко Сергей Иванович доктор сельскохозяйственных наук, доцент Краснодар – 2014...»

«ЗАНИНА ОЛЬГА ВЛАДИМИРОВНА СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕХАНИЗМОВ СОЦИАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ НАСЕЛЕНИЯ Специальность: 08.00.05 – Экономика и управление народным хозяйством (5. Экономика труда) ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата экономических наук Научный руководитель: доктор экономических наук, профессор А.Е. Ильин Курск –...»

«Васильева Татьяна Владимировна Формирование профессиональных ценностных ориентаций студентов сельскохозяйственного вуза на современном этапе развития общества Специальность 13.00.08 – Теория и методика профессионального образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических...»

«ОНИЩЕНКО Людмила Михайловна Агрохимические основы воспроизводства плодородия чернозема выщелоченного Западного Предкавказья и повышение продуктивности сельскохозяйственных культур Специальность 03.02.13– почвоведение Диссертация на соискание ученой степени доктора...»

«САЗЫКИНА КСЕНИЯ ИГОРЕВНА ОЦЕНКА БЕЗОПАСНОСТИ И ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТА «ДОКСИЦИКЛИН – КОМПЛЕКС» ПРИ БРОНХОПНЕВМОНИЯХ И ГАСТРОЭНТЕРИТАХ ПОРОСЯТ 06.02.01 – диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных...»

«БУЛАНКИН Артем Борисович Фауна и экология клещей семейства Ixodidae, средства и методы защиты животных от иксодовых клещей в московской области 03.02.11 Паразитология Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных...»









 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.