WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |

«ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ВЛИЯНИЯ УГЛЕРОДНОГО НАНОСТРУКТУРНОГО МАТЕРИАЛА «ТАУНИТ» НА ОРГАНИЗМ САМОК БЕЛЫХ МЫШЕЙ И ИХ ПОТОМСТВО ...»

-- [ Страница 3 ] --

Морфологические исследования. Для морфологических исследований были взяты от животных всех групп образцы следующих органов: головной мозг, сердце, лимфатические узлы, селезенка, щитовидная и паращитовидная железы, тимус, надпочечники, гипофиз, желудок, тонкий и толстый кишечник, поджелудочная железа, печень, легкие, почки, яичники. Гистологический материал фиксировали в 10 %-м формалине, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и заключали в парафин. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином.


При изучении эмбриогенеза в условиях воздействия УНМ «Таунит»

показателями служили пред- и постимплантационная эмбриональная смертность, а также анатомические особенности развития. Предимплантационную смертность определяли по разности между количеством желтых тел в яичниках и количеством мест имплантаций в матке, постимплантационную смертность – по разности между количеством мест имплантаций и количеством живых плодов.

Извлеченные плоды взвешивались, определялись их краниокаудальные размеры.

Затем проводилась декапитация и висцеральное исследование органов плодов по Стейплсу. После исследования состояния внутренних органов проводилось изучение скелетов плодов модифицированным методом Доусона путем окрашивания ализарином (Онищенко Г.Г., 2007).

Изучение репродуктивной функции самок и постнатального развития потомства первой генерации под влиянием УНМ «Таунит».

Репродуктивную функцию самок оценивали по количеству мышат в приплоде (плодовитость), доли неродивших самок, числу живых и мертвых детенышей, гибели молодняка (в течение 21 суток постнатального развития) и половому составу потомства.

Оценка постнатального развития потомства осуществлялась на мышатах, родившихся от самок обеих групп (не раньше 24 ч. после рождения). Проводилось общее наблюдение за физическим развитием (динамика массы и длины тела с 5 по 23 сутки), биологическим созреванием (срок отлипания ушных раковин, появление первичного волосяного покрова, прорезывание резцов и открытие глаз); изучение созревания сенсорно-двигательных рефлексов и эмоциональнодвигательного поведения (переворачивание в свободном падении, реакция на акустический стимул, обонятельная реакция, избегание обрыва, переворачивание на плоскости, маятниковый рефлекс, отрицательный геотаксис), ориентировочных и координационных движений (тест «открытое поле» и спонтанная двигательная активность).

В обеих группах потомства проводили тесты на различных сроках постнатального развития, соответствующих среднему времени проявления рефлексов.

Отрицательный геотаксис. На 7 сутки после рождения мышат помещали на наклонную поверхность (25о) головой вниз. Регистрировали время до разворота животного на 180о. Продолжительность теста – до 1 мин.

Маятниковый рефлекс. Тест проводили на 7 сутки после рождения.

Определяли количество изменений направления головы и туловища приблизительно на 90о за счет перемещения передних лап, когда задние конечности поджаты и неподвижны. Количество поворотов на 90о и реверсий (изменений направления на обратное) измеряли в течение 1 мин.

Переворачивание на плоскости. На 8 сутки после рождения мышат клали на спину на плоской поверхности, быстро отпускали и измеряли время, необходимое для возвращения в нормальное положение. Продолжительность опыта – 30 с.

Избегание обрыва. На 9 сутки после рождения мышат клали на стол таким образом, чтобы передние лапы касались края стола. Исход теста считался положительным, если в течение 10 с животное отползало от края стола.

Обонятельная реакция. Тест проводили на 11 сутки после рождения.

Животное помещали по середине рейки шириной 6 см с делениями, которую клали на клетки. Расстояние между клетками можно было измерять с шагом в 2,5 см. Определяли дистанцию, на которой мышонок правильно выбирал направление на клетку с сибсами и матерью, в которой он содержался перед опытом.

Реакция на акустический стимул. На 13 сутки после рождения мышат помещали на небольшую площадку в звукоизолированной клетке. Оценивали наличие или отсутствие реакции животных на акустический стимул длительностью до 0,5 с.

Переворачивание в свободном падении. Тест проводили на 20 сутки после рождения. Мышат держали спиной вниз на высоте 60 см над мягкой поверхностью и быстро отпускали. Визуально регистрировали, переворачиваются ли животные в воздухе, чтобы упасть на все 4 лапы.

Открытое поле. Тест проводили на 30 сутки после рождения. Мышат помещали на площадку размерами 30х30 см, на которой проведены линии, образующие 36 квадратов. Регистрировали: горизонтальную и вертикальную двигательную активность, груминг, исследовательское поведение (заглядывание в норки). Продолжительность теста – 3 мин.





Спонтанная двигательная активность. Тест проводили на 30 сутки после рождения на актометре «Ugo basile» (Италия) в течение 3 минут.

3.4. Методы вариационно-статистического анализа полученных данных

Биометрическая обработка полученных данных выполнена на персональном компьютере при помощи пакета программ STATISTICA for Windows 7,0.

Использовали методы параметрической и непараметрической вариационной статистики. Методы описательной статистики включали в себя оценку среднего арифметического (М), ошибки среднего значения (m) - для признаков, имеющих непрерывное распределение, а также для частоты встречаемости признаков с дискретными значениями. Определение достоверности различий между качественными показателями сравниваемых групп проводили с помощью критерия 2 (хи-квадрат) с учетом поправки Йетса для сравнения частот бинарного признака в двух несвязанных группах парных сравнений. Для оценки различий значений количественных показателей в разных группах применяли t-критерий Стьюдента для независимых выборок и критерий Мана-Уитни (Плохинский, Н.А.

Биометрия / Н.А. Плохинский – М.: Изд-во МГУ, 1970. – 367 с.; Коросов, А.В.

Компьютерная обработка биологических данных / А.В. Коросов – Петрозаводск:

Изд-во ПетрГУ, 2007 – 76 с.).

4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

–  –  –

На первом этапе оценивалась динамика массы и длины тела, а также морфологические изменения внутренних органов мышей, в организм которых поступал УНМ «Таунит» в различных концентрациях. Были сформированы 4 экспериментальные группы (n=10), при этом использовали различные дозы УНМ «Таунит»:

- группа № 1 – концентрация УНМ «Таунит» в воде для поения – 0,0008 %, что соответствует 1,2 мг/кг массы тела животного;

- группа № 2 – концентрация УНМ «Таунит» в воде для поения – 0,004 %, что соответствует 6 мг/кг массы тела животного;

- группа № 3 – концентрация УНМ «Таунит» в воде для поения – 0,02 %, что соответствует 30 мг/кг массы тела животного;

- группа № 4 – концентрация УНМ «Таунит» в воде для поения – 0,1 %, что соответствует 150 мг/кг массы тела животного.

Животные контрольной группы получали обычную питьевую воду.

Продолжительность эксперимента составляла 65 суток, в течение которых экспериментальные животные потребляли с питьевой водой УНМ «Таунит».

Сравнительная оценка динамики массы тела показала, что в группе с меньшей концентрацией УНМ «Таунит» (1,2 мг/кг) уровень данного показателя был ниже, чем у контрольных и других подопытных животных, начиная с 7 суток и до конца эксперимента (рисунок 2).

* *

–  –  –

Рисунок 2 – Динамика среднегрупповых значений массы тела самок экспериментальных групп по сравнению с контрольной (в %) Примечание: * - различия достоверны (p0,05) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

Однако достоверные отличия были зафиксированы только на 28 сутки, когда показатель уменьшился на 7,7 % по сравнению со значениями контрольной группы животных (p0,05) (рисунок 2).

УНМ «Таунит» в дозировке 6 мг/кг (группа № 2) при пероральном поступлении не вызывал значимых (р0,05) отклонений динамики массы тела, в то же время наблюдалась тенденция к повышеню показателей до 35 суток, с последующим снижением к концу эксперимента (рисунок 2).

Масса тела самок белых мышей в группе № 3 (УНМ «Таунит» 30 мг/кг) достоверно не отличалась от контроля (р0,05), но имела следующую динамику:

до 21-28 суток происходило повышение показателей, затем значения находились на уровне контрольных до конца эксперимента (рисунок 2).

В экспериментальной группе № 4 (УНМ «Таунит» 150 мг/кг) масса тела самок превышала контрольные значения начиная с 7 суток и до конца эксперимента. На 28 и 63 сутки показатель был выше контроля на 6,0 и 6,2 % соответственно (р0,05). (рисунок 2).

Таким образом, при поступлении в организм УНМ «Таунит» отмечаются дозозависимые изменения в динамике массы тела. Малые дозы УНМ «Таунит»

(1,2 мг/кг) оказывают угнетающий эффект, который наиболее выраженно проявляется в снижении массы тела (на 7,7 %) на 28 сутки эксперимента.

Увеличение дозы УНМ «Таунит» до 150 мг/кг приводит к интенсивному скачкообразному возрастанию массы тела, которая на 28 и 63 сутки эксперимента достигает максимальных значений (+6,0… +6,2 %) (р0,05).

Следует отметить, что 28-и суточная экспозиция является критической, что выражается в достоверном изменении показателей (р0,05). Возможно к этому сроку УНМ «Таунит» аккумулируется в достаточном количестве в органах и тканях (рисунок 2).

Динамика длины тела самок контрольной и экспериментальных групп представлена на рисунке 3.

–  –  –

Рисунок 3 - Динамика среднегрупповых значений длины тела самок экспериментальной и контрольной групп Примечание: * - различия достоверны (p0,05) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

Оценка динамики длины тела выявила увеличение показателя, сходное у всех животных, при этом только в группе № 1 (УНМ «Таунит» 1,2 мг/кг) длина тела была ниже (-0,23…–0,34 см) (p0,05), чем у других самок (УНМ 6; 30 и 150 мг/кг), начиная с 28 суток и до окончания эксперимента (рисунок 3).

Осмотр экспериментальных животных после эвтаназии показал, что все они нормально упитаны, имеют правильное телосложение, опрятны, волосяной покров и естественные отверстия чисты, органы расположены правильно, свободная жидкость в грудной и брюшной полостях отсутствует. Выраженных визуальных изменений в органах и тканях не обнаружено, за исключением печени, цвет который был темнее у 35 % особей экспериментальной группы животных (рисунок 8).

Мышцы сердца и клапаны не изменены. Просветы трахеи и крупных бронхов свободны. Ткань легких воздушная, розового цвета, без признаков отека.

Слизистые оболочки желудка, 12-перстной кишки, тонкого и толстого кишечника без изъязвлений и кровоизлияний. Капсула почек снимается легко, на разрезе корковое и мозговое вещество хорошо различимы. Тимус серо-розового цвета, не увеличен. Щитовидная железа розового цвета, хорошо различима паращитовидная железай. Надпочечники без изменений. Оболочки головного мозга не напряжены, извилины хорошо выражены. Половые органы без какихлибо изменений.

Для морфологических исследований были взяты от подопытных животных всех групп следующие органы: головной мозг, сердце, лимфатические узлы, селезенка, щитовидная и паращитовидная железы, тимус, надпочечники, гипофиз, желудок, тонкий и толстый кишечник, поджелудочная железа, печень, легкие, почки, яичники.

Исследование показало ряд отличий массы внутренних органов животных разных групп. Так, из рисунка 4 видны различия среднегрупповых показателей массы сердца у самок белой мыши в условиях поступления в организм УНМ «Таунит» различных доз. Не смотря на выявление достоверных отличий только в группе № 4 (УНМ 150 мг/кг), значение показателя в которой было выше на 15,6 % (p0,01), отчетливо прослеживается взаимосвязь дозы вводимого вещества с массой сердца.

15,61%*

–  –  –

5 2,25% 0,68%

-5

-10

-8,99%

-15 1,2 6 30 150

–  –  –

Рисунок 4 – Среднегрупповые характеристики массы сердца мышей экспериментальных групп по отношению к контрольной (%) Примечание: * - различия достоверны (p0,01) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

Таким образом, при дозе УНМ «Таунит» 1,2 мг/кг наблюдается тенденция к уменьшению массы сердца на 8,99 %, а дозировка 150 мг/кг вызывает достоверный рост показателя (на 15,6 %) (р0,01).

Возможно, выявленное увеличение массы сердца у самок экспериментальной группы № 4 обусловлено гипертрофией миокарда, что связано с выявленным увеличением массы других внутренних органов (матка с яичниками, желудочно-кишечный тракт, почки), как показали дальнейшие исследования.

Так, на рисунке 5 представлены среднегрупповые значения массы лгких у самок белой мыши в экспериментальных группах, по отношению к контрольной.

7,04 6,1 Масса легких, %

–  –  –

Рисунок 5 – Среднегрупповые характеристики массы легких мышей экспериментальных групп по отношению к контрольной (%) В условиях поступления в организм УНМ «Таунит» различных концентраций отклонений в массе легких не выявлено (р0,05), хотя у экспериментальных животных наблюдалась похожая тенденция: снижение показателя под действием низких доз наноматериала (1,2 мг/кг), с последующей нормализацией (УНМ 6 мг/кг) и увеличением значений (УНМ 30 и 150 мг/кг).

На рисунке 6 представлены среднегрупповые значения массы желудочнокишечного тракта (ЖКТ) у самок белой мыши в экспериментальных группах, по отношению к контрольной.

При поступлении в организм УНМ «Таунит» в дозировках 30 и 150 мг/кг наблюдается увеличение массы ЖКТ на 16,5 и 15,9 % соответственно (р0,05). В то же время увеличение массы отмечалось и у особей в группах № 1 и 2, но данные изменения не являлись достоверными (р0,05).

При извлечении ЖКТ у самок экспериментальной группы отмечался выраженный специфический запах, который, возможно, свидетельствует о протекающих бродильных процессах и нарушении микрофлоры толстого кишечника в результате перорального поступления УНМ «Таунит».

18 16,5* 15,9*

–  –  –

Рисунок 6 – Среднегрупповые характеристики массы ЖКТ мышей экспериментальных групп по отношению к контрольной (%) Примечание: * - различия достоверны (p0,05) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

Очевидно, что влияние многостенных углеродных нанотрубок проявляется в гипертрофии не только тканей ЖКТ, но и других органов, снабженных гладкой мускулатурой.

На рисунке 7 представлены среднегрупповые показатели массы печени самок мышей в условиях поступления в организм УНМ «Таунит» различных доз.

В подопытной группе с дозой УНМ 1,2 мг/кг наблюдалось снижение массы данного органа на 13,9 % по сравнению с контрольной (р0,05). Более высокие концентрации наноматериала вызывали обратный эффект, что проявлялось тенденцией к увеличению массы печени в группах № 2 и 3, соответственно на 1,9 и 2,0 %, однако данные различия не были достоверны. Возможно, некоторое увеличение органа обусловлено возрастанием массы соединительной ткани, либо происходит за счет увеличения ткани паренхимы.

1,93

–  –  –

Рисунок 7 - Среднегрупповые характеристики массы печени мышей экспериментальных групп по отношению к контрольной (%) Примечание: * - различия достоверны (p0,05) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

У 35% особей экспериментальных групп цвет печени был несколько темнее, чем у животных контрольной группы, что в свою очередь может быть следствием замедления венозного оттока в данном органе (рисунок 8).

На рисунке 9 показаны среднегрупповые значения массы почки у самок белой мыши экспериментальных и контрольной групп. При концентрации УНМ «Таунит» 1,2 мг/кг выявлено снижение массы данного органа на 14,0 % (р0,05).

При дозе УНМ 6 и 30 мг/кг отмечается разнонаправленные сдвиги показателей (р0,05). В первом случае наблюдается тенденция к увеличению массы на 8,05 %, во втором – к снижению на 4,9 %. Максимальная доза (УНМ 150 мг/кг) вещества оказывает стимулирующий эффект, вызывая повышение значений на 10 % (р0,05).

А

Б Рисунок 8 – Печень самки белой мыши при поступлении УНМ «Таунит»

Примечание: А – контрольная группа; Б – экспериментальная группа.

Основное свойство наноматериалов – это способность к аккумуляции и тропность к различным органам и тканям организма. Так как почки представляют собой основной отдел выделительной системы, возможно, наблюдаемые отличия являются следствием гипо- и гипертрофии, которая в свою очередь развивается за счет изменений в клубочках и извитых канальцах из-за поступления и накопления УНМ «Таунит».

10,0* 8,05

–  –  –

Рисунок 9 – Среднегрупповые характеристики массы почки мышей экспериментальных групп по отношению к контрольной (%) Примечание: * - различия достоверны (p0,05) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

На рисунке 10 представлены среднегрупповые значения массы селезнки у самок белой мыши в условиях поступления в организм УНМ «Таунит» различных концентраций. Во всех экспериментальных группах отмечена тенденция к снижению показателей данного органа, по мере увеличения дозы наноматериала.

Таким образом, в группах № 1 (УНМ 1,2 мг/кг), № 2 (УНМ 6 мг/кг) и № 3 (УНМ 30 мг/кг) отмечались не достоверное изменение массы селезенки (-6,81…р0,05), тогда как концентрация УНМ 150 мг/кг приводила к уменьшению показателей этого органа на 19,45 % (p0,01), что, возможно, связано с гипотрофией вследствие истощения иммунной системы при ее перенапряжении в ходе адаптационных процессов.

–  –  –

Рисунок 10 - Среднегрупповые характеристики массы селезнки мышей экспериментальных групп по отношению к контрольной (%) Примечание: * - различия достоверны (p0,01) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

На рисунке 11 представлены среднегрупповые значения массы тимуса в экспериментальных группах. У всех подопытных животных этот показатель имел тенденцию к увеличению, но его динамика не зависела от концентрации УНМ «Таунит» в растворе.

6,7

–  –  –

6 5,3 5,1 5 4,2

–  –  –

Рисунок 11 - Среднегрупповые характеристики массы тимуса мышей экспериментальных групп по отношению к контрольной (%) Возможно, некоторое увеличение массы тимуса в экспериментальных группах обусловлено разрастанием соединительной и жировой ткани, которое происходит при поступлении в организм УНМ «Таунит» или является результатом активации иммунной системы.

На рисунке 12 приведены среднегрупповые показатели массы щитовидной железы в условиях поступления в организм УНМ «Таунит» различных концентраций.

10 6,7 7,7 7,6

–  –  –

5.6 1,2 6 30 150 Концентрации УНМ "Таунит", мг/кг Рисунок 12 - Среднегрупповые характеристики массы щитовидной железы мышей экспериментальных групп по отношению к контрольной (%) У подопытных животных всех групп наблюдалась тенденция к увеличению массы данного органа, но полученные результаты не являлись статистически значимыми (р0,05) и не отражали зависимости от дозы вводимого вещества.

Однако мы можем утверждать, что данный орган является щитовидной железой лишь по анатомическому расположению и внешнему строению (рисунок 13), так как реакция с крахмалом не дала должного окрашивания. По-видимому, при поступлении в организм животных МУНТ происходят не только морфологические, но и функциональные изменения тиреоцитов, в результате чего клетки щитовидной железы не усваивают йод, поступающий в организм животного с кормом и питьевой водой.

При этом также наблюдалась гипертрофия лимфатических сосудов и узлов, окружающих щитовидную железу. Гипертрофия лимфатических сосудов обусловлена в основном развитием в них пучков гладкой мускулатуры, что наблюдается при застое лимфы и является приспособительной гипертрофией стенок лимфатической системы в условиях ее перегрузки.

Рисунок – Щитовидная железа (отмечена стрелкой) самки

экспериментальной группы на момент окончания эксперимента Сравнительная оценка среднегрупповых значений массы матки и яичников у самок белых мышей в экспериментальных и контрольной группах показала выраженные отклонения этого показателя от контрольных значений (p0,001) (рисунок 14).

Загрузка...

Поступление УНМ «Таунит» вызывает увеличение массы матки с яичниками во всех подопытных группах. При концентрации УНМ 6 мг/кг наблюдается повышение на 63,21 % (p0,05); УНМ 30 мг/кг - на 65,49 % (р0,01);

УНМ 150 мг/кг – на 56,7 % (р0,01).

70 65,49** 63,21* 56,7** Масса матки с яичниками, 27,5 % 1,2 6 30 150 Концентрации УНМ "Таунит", мг/кг Рисунок 14 - Среднегрупповые характеристики массы репродуктивных органов (матки с яичниками) мышей экспериментальных групп по отношению к контрольной Примечание: * - различия достоверны p0,05; ** - р0,01 по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

Таким образом, в результате поступления в организм УНМ «Таунит» в различных концентрациях у самок белой мыши наблюдается дозозависимое изменение показателей массы сердца, ЖКТ, печени, почек, в виде снижения при низких и увеличении - при высоких дозах вещества. Обратная зависимость наблюдается в отношении селезенки, масса которой уменьшается, по мере возрастания концентрации УНМ «Таунит» до 150 мг/кг.

–  –  –

Для дальнейшего исследования эффектов УНМ «Таунит» при пероральном поступлении в организм самок белых мышей нами использовалась дозировка 450 мг/кг, исходя из предварительных экспериментов на других тест-объектах, результатов, полученных на 1 этапе работы и литературных данных о подобных опытах (Гусев, А.А. Влияние углеродных нанотрубок на ранние стадии онтогенеза мышей (Mus Domestica Linnaeus, 1758) / А.А. Гусев, А.В. Емельянов, С.В. Шутова и др. // Современные проблемы контроля качества природной и техногенной сред / Материалы Всероссийской научно-практической конференции.- Тамбов, 2009. - С. 78-79; Горшенва, Е.Б. Углеродный наноструктурный материал – перспективный вектор доставки лекарственных препаратов меняет некоторые функциональные показатели самок Mus musculus L.

при пероральном введении / Е.Б. Горшенва, А.А. Гусев, С.В. Шутова и др. // Вестник тамбовского университета. Серия: Естественные и технические науки. Т.

16, № 1 - Тамбов, 2011.- С. 273-277; Убогов, А.Ю. Углеродные нанотрубки как фактор развития воспалительного процесса в печени мышей / А.Ю. Убогов, И.А.

Полякова, А.А. Гусев и др. // Вестник тамбовского университета. Серия:

Естественные и технические науки. Т. 16, № 5- Тамбов, 2011.- С. 1338-1343).

Исследование показало, что суточное потребление сухого корма и воды подопытными животными при поступлении в организм УНМ «Таунит» (450 мг/кг) не отличалось от показателей контрольной группы (р0,05). На рисунке 15 представлены среднегрупповые значения метрических характеристик самок белых мышей.

82,2 87,3 88,4 89,0 59,3 60,0

–  –  –

экспериментальной и контрольной групп на 45 сутки исследования Таким образом, на момент окончания эксперимента у подопытных животных показатели длины хвоста (87,3±1,42 мм), туловища (60±2,5 мм), головы (28,9±1,2 мм), тела (89±3,7 мм) и задней правой лапы (16,3±0,3) не отличались от соответствующих характеристик (хвост - 82,2±0,7 мм; туловище - 59,3±1,4 мм;

голова - 28,7±0,4 мм; тело - 88,4±1,5 мм; задняя правая лапа - 16,2±0,1 мм) контрольных животных (p0,05).

В то же время, среднегрупповые значения массы тела самок белых мышей в момент окончания эксперимента имели межгрупповые отличия: в экспериментальной группе она составили 26,73±1,16 г., а в контрольной группе были ниже - 23,99±0,63 г. (p0,05) (рисунок 16).

Таким образом, отмечено значимое (на 2,7 г.) увеличение массы тела самок белых мышей в условиях поступления в организм УНМ «Таунит» (450 мг/кг), которое, как показали дальнейшие исследования, обусловлено увеличением массы внутренних органов экспериментальных животных.

29 26,7* 24,0

–  –  –

Рисунок 16 – Масса тела мышей экспериментальной и контрольной групп Примечание: * - различия достоверны (p0,05) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе На рисунке 17 представлены среднегрупповые значения массы внутренних органов (в %) мышей экспериментальной группы по отношению к контрольной.

Показано, что в подопытной группе выше, чем в контрольной масса тела (+12,8 %, p0,05), сердца (+28,6 %, p0,01), ЖКТ (+31,2 %, p0,05), почек (+20 %, p0,05) и репродуктивных органов (матки с яичниками) (+65,7 %, p0,001).

Однако, масса селезнки в экспериментальной группе была значительно снижена (на 45,8 %) (р0,01).

–  –  –

Рисунок 17 – Среднегрупповые характеристики (в %) массы тела и внутренних органов мышей экспериментальной группы по отношению к контрольной Примечание: * - различия достоверны p0,05; ** - p0,01; *** - p0,001 по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

4.2.2. Гистологическая картина паренхиматозных органов По завершении эксперимента было проведено гистологическое исследование паренхиматозных органов животных. Материал фиксировали в 10% забуференном формалине, осуществляли обработку в процессоре Tissue-Tek японской фирмы «Sakura», заливали в парафин для приготовления блоков, из которых производили по 4-5 срезов толщиной 5-7 мкм.

При микроскопическом исследовании внутренних органов мышей, которые получали МУНТ, наибольшие изменения были обнаружены в ткани печени (рисунок 18). У всех мышей получавших УНМ «Таунит» (450 мг/кг) с питьевой водой отмечалась инфильтрация печночной паренхимы, чего не наблюдалось в контрольной группе животных.

Так, при дозировке УНМ «Таунит» 450 мг/кг была отмечена очаговая инфильтрация портальных трактов лимфоидными клетками в количестве до 200клеток (рисунок 18).

А Б Рисунок 18 – Микропрепарат печени самки белой мыши при поступлении УНМ «Таунит»

Примечание: А – экспериментальная группа; Б – контрольная группа 12 человек Происходило разрушение пограничной пластинки, вследствие чего границы инфильтрата становились размытыми. В гепатоцитах отмечены значительные изменения с появлением вакуолей в цитоплазме.

Учитывая высокие компенсаторные возможности печени, можно сделать вывод о достаточно выраженном эффекте УНМ «Таунита» в отношении ткани данного органа.

Проведенные гистологические исследования так же показали следующее.

В экспериментальной группе:

головной мозг, мозжечок, гипофиз – венозное полнокровие соответственно у 1, 2 и 2 животных;

- лимфоузел – фолликулы с реактивными центрами, макрофагальная реакция синусов, фолликулов у всех мышей;

- тимус – макрофагальная реакция у 4 мышей, у 2 - стертость границ между корковым и мозговым слоем;

- щитовидная железа и сердце – незначительные изменения в строме у 4 и 1 животных;

- легкие – умеренное полнокровие;

- желудок – очаговая лимфоидная инфильтрация слизистой оболочки у 2 животных;

- поджелудочная железа – изменения отсутствуют;

- почка – незначительныелокальные изменения в интерстициальной ткани у 2 мышей;

- надпочечник – умеренное венозное полнокровие мозгового слоя в 1 случае;

- селезенка – размытость контуров фолликулов у 3 мышей (рисунок 19).

В контрольной группе обнаружено умеренное полнокровие ткани легкого у 3 мышей. Строение остальных внутренних органов не изменялось.

А Б Рисунок 19 – Микропрепарат селезенки самки белой мыши при поступлении УНМ «Таунит» (стрелкой обозначен лимфатический фолликул с реактивным центром, окраска гематоксилином и эозином. х 60) Примечание: А – экспериментальная группа; Б – контрольная группа.

Микроскопическое исследование яичников показало у самок экспериментальной группы слабое венозное полнокровие, у контрольных животных изменений данного органа не было выявлено. У всех самок в контрольной и экспериментальной группах в корковом веществе яичников хорошо визуализируются группы примордиальных фолликулов, многочисленные растущие фолликулы, а также единичные граафовы пузырьки и атретические тела. Тека-клетки крупные, со светлой цитоплазмой, формируют скопления с нечеткими очертаниями (рисунок 20).

А Б Рисунок 20 – Микропрепарат яичника самки белой мыши при поступлении УНМ «Таунит»

Примечание: А – экспериментальная группа; Б – контрольная группа.

Покзано, что поступление УНМ в организм подопытных животных не приводило к значительным изменениям в гаметогенезе.

Таким образом, у самок опытной группы наблюдались умеренные или слабо выраженные изменения в виде венозного полнокровия. У всех мышей экспериментальной группы отмечены реактивные изменения иммунных органов (макрофагальная реакция фолликулов и синусов лимфоузлов, селезенки (рисунок

19) и коркового слоя тимуса, стертость границ между корковым и мозговым слоями в тимусе, размытость контуров фолликулов селезенки).

–  –  –

При поступлении в организм экспериментальных животных УНМ «Таунит»

в периферической крови мышей не изменялось большинство оцениваемых показателей - количество эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, уровень гемоглобина (таблица 1).

Таблица 1 – Показатели крови белых мышей при поступлении УНМ «Таунит» в организм в течение 45 суток (М±m) Гемоглобин, Эритроци- Тромбоци- Лейкоциты Группа ты, x1012/л ты, x109/л x109/л г/л животных Экспериментальная 134,6±5,0 6,6±0,9 423,6±13,7 15,8±1,8 (n=15) УНМ 450 мг/кг Контрольная 130,8±4,9 6,1±0,8 428,2±15,9 14,0±2,1 (n=15) Отмечались изменения в лейкоцитарной формуле в сторону повышения уровня лимфоцитов на 5,9 % (p0,01) и нейтрофильный сдвиг в сторону снижения количества сегментоядерных форм на 5,1 % (p0,01) в экспериментальной группе мышей по сравнению с соответствующими показателями в контроле (таблица 2).

Полученные данные могут свидетельствовать о возможной при пероральном введении УНМ «Таунит» (450 мг/кг) активации иммунной системы мышей, что также подтверждают результаты макро- и микроскопических исследований иммунных органов, как показано далее.

–  –  –

Исследование функции печени подопытных мышей с помощью пробы с бромсульфалеином (БСФ) показало, что поступление УНМ «Таунит» (450мг/кг) в организм не влияло на выделительно-поглотительную и белоксинтезирующую функции печени экспериментальных животных (таблицы 3 и 4).

–  –  –

Таблица 4 – Влияние поступления в организм мышей УНМ «Таунит» на концентрацию общего белка (г/л) в пуле сывороток крови (М ± m) Группа животных До начала Через 14 суток Через 45 суток эксперимента Экспериментальная 72,08±3,22 70,38±3,26 73,60±4,39 (УНМ «Таунит» 450 мг/кг) (n=15) Контрольная 72,65±4,3 71,51±2,86 72,60±2,51 (n=15) Бромсульфалеиновая проба также является универсальным методом по оценке состояния паренхимы печени. Как видно из таблиц 3 и 4, показатели ретенции БСФ не отличаются в исследуемых группах самок (p0,05), что свидетельствует об отсутствие каких-либо изменений в функционировании печени мышей.

Одним из параметров при оценке состояния поджелудочной железы является уровень глюкозы в пуле сыворотки крови. Полученные результаты свидетельствуют, что данный показатель не отличался у контрольных и экспериментальных самок (p0,05). Тем не менее, наблюдалась тенденция к повышению уровня глюкозы у мышей подопытной группы на 14 сутки и к концу эксперимента (таблица 5).

–  –  –

4.4. Влияние УНМ «Таунит» на поведенческие реакции белых мышей Изучение функционального состояния нервной системы подопытных животных оценивалось по поведенческим реакциям, а именно: спонтанной двигательной активности, отражающей уровень тревожного состояния; порогу эмоциональных реакций, который характеризует соотношение процессов возбуждения и торможения в нервной системы, а также тесту «открытое поле», раскрывающему двигательную, ориентировочную и эмоциональную составляющие поведения.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что поступление УНМ «Таунит» в течение 2 недель в организм мышей приводит к повышению спонтанной двигательной активности, что проявляется в увеличении количества локомоций в экспериментальной группе самок на 32,6 % (p0,01) по сравнению с животными контрольной группы (таблица 6).

–  –  –

К концу 45 суток поступления УНМ «Таунит» количество локомоций и порог эмоциональных реакций у мышей подопытной группы не отличались от контроля (р0,05), но прослеживалась тенденция к их изменению в сторону угнетения спонтанной двигательной активности и возбудимости.

Как известно, поведение животных в тесте «открытое поле» характеризует их двигательную ориентировочную активность, исследовательское поведение и эмоциональное состояние. Проведенные исследования через 45 суток от начала эксперимента показали отсутствие значимых отличий по большинству показателей теста, за исключением параметра общей двигательной активности, уровень которой был ниже у мышей экспериментальной группы (таблица 8).

Ориентировочно-исследовательское поведение мышей в тесте «открытое поле» по показателю «вертикальные стойки» раскрывает мотивационную составляющую. Установлено, что поступление в организм УНМ «Таунит» не влияет на вертикальную и горизонтальную двигательную активность, а соответственно и мотивацию животных.

Разновидностью ориентировочно-исследовательского поведения мышей является показатель норкового рефлекса, который свидетельствует о способности животного исследовать «открытое поле», в частности, заглядывать в норки.

–  –  –

Груминг (косметическое поведение) мышей является важной характеристикой поведения животных в «открытом поле», тесно коррелируя с двигательной активностью. Результаты свидетельствуют о том, что в условиях поступления УНМ «Таунит» в организм мышей данный показатель не изменяется.

Не выявлено достоверных различий и по количеству дефекаций, что отражает отсутствие существенных изменений эмоционального состояния и вегетативных функций подопытных животных.

Однако следует отметить, что, несмотря на отсутствие достоверных отличий, в целом параметры теста «открытое поле» в экспериментальной группе были несколько ниже, а уровень общей двигательной активности оказался меньше на 16 % (p0,05) у мышей, в организм которых поступал УНМ «Таунит», по сравнению с соответствующим показателем контрольной группы животных.

Таким образом, при перорально введении УНМ «Таунит» существенно не изменяет поведение мышей в «открытом поле», однако через 45 суток его потребления наблюдается снижение общей двигательной активности на 16 % (р0,05) и тенденция к снижению показателей исследовательского поведения.

4.5. Особенности репродуктивной функции самок белых мышей при поступлении в организм УНМ «Таунит»

Влияние поступления в организм УНМ «Таунит» на репродуктивную систему самок белой мыши представлено на рисунке 21. При оценке плодовитости самок, было установлено, что в контрольной группе количество молодняка в помете (6,0±0,15 шт.) было меньше, чем в экспериментальной (9,3±0,14 шт.) (p0,05). Таким образом, при поступлении в организм углеродного наноматериала «Таунит» у самок мышей наблюдается повышение плодовитости.

Так же, обращал на себя внимание низкий уровень смертности в потомстве подопотных животных. Из рисунка 22 видно, что доля гибели молодняка в помете экспериментальных самок оказалась ниже (15 %), чем в контроле (27 %) (p0,05). Полученные данные свидетельствуют о том, что при поступлении в организм самок мышей УНМ «Таунит» во время беременности и периода молочного вскармливания наблюдается снижение смертности молодняка в течение первых 21 суток постнатального развития.

9,3±0,14*

–  –  –

Рисунок 21 – Среднегрупповые характеристики плодовитости самок белых мышей экспериментальной и контрольной групп Примечание: * - различия достоверны (p0,05) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

40±1,9 33±1,5

–  –  –

На рисунке 22 также приведена доля неродивших самок белых мышей, которая в контрольной группе составляет 40 %, в экспериментальной – 33 %.

Таким образом, можно предположить, что в условиях поступления УНМ «Таунит» в организм самок имеет место тенденция к повышениею частоты наступления беременности.

На рисунке 23 представлен половой состав потомства первого поколения самок мышей экспериментальной и контрольной групп.

–  –  –

Доля самцов в приплоде экспериментальной группы оказалась ниже (41 %), чем в контрольной (60 %) (p0,05).

Таким образом, УНМ «Таунит», поступающий в организм самок во время беременности, вызывает уменьшение доли самцов в потомстве первой генерации, что согласно теории В.А. Геодакяна свидетельствует об экстремальных и неблагоприятных условиях окружающей среды (Геодакян, В. А.

Дифференциальная смертность и норма реакции мужского и женского пола / В.А.

Геодакян // Журн. общ. биологии, - 1974. - Т. 35. - № 3 – С. 376-385).

В целом результаты проведенного исследования свидетельствуют о том, что под воздействием УНМ «Таунит» у белых мышей уменьшается количество неродивших самок, снижается смертность молодняка, также возрастает количество особей в приплоде, их весоростовые показатели. Кроме того, видимо, влияние УНМ «Таунит» на репродуктивную функцию мышей, проявляющееся увеличением в потомстве доли самок, является индикатором воздействия среды обитания (Геодакян, В. А. Дифференциальная смертность и норма реакции мужского и женского пола / В.А. Геодакян // Журн. общ. Биологии. - 1974. - Т. 35.

- № 3 – С. 376-385).

В условиях поступления многостенных углеродных нанотрубок у самок белых мышей не выявлено значимых отличий в эмбриогенезе в сравнении с контрольной группой (таблица 9). Пред- и постимплантационная смертность у экспериментальных и контрольных особей не отличалась (р0,05). Однако в подопытной группе можно отметить тенденцию к увеличению количества живых плодов (7,9±0,3), по сравнению с контролем (6,9±0,2) (таблица 9), что согласуется с полученными ранее данными при изучении плодовитости самок (9,3±0,14*) (рисунок 21).

Внешне плоды выглядели одинаково, у всех имелись правильно сформированные голова, туловище, конечности и хвост. Грудная клетка и передняя брюшная стенка имели обычную форму. Сердце располагалось в обычном месте, все камеры и перегородки его были сформированы; однако при вскрытии в правой половине определялись сгустки крови. Отчетливо была видна

–  –  –

Кишечник сформирован. Петли толстого и тонкого кишечника лежали отдельно, белого цвета. Поджелудочная железа сформирована, белого цвета, мягко-рыхлой консистенции. Почки определялись в забрюшинном пространстве, бобовидной формы, эластической консистенции. Чашечно-лоханочная система на разрезе сформирована. Мочеточники и мочевой пузырь сформированы. Половые органы не сформированы.

При изучении состояния окрашенных ализарином скелетов плодов видимых изменений развития и различий между группами животных, родившихся от мышей различных групп, не обнаружено.

Кости лицевого и мозгового черепа сформированы симметрично, типичной формы. Между костями черепа четко наблюдаются большой и малый роднички.

Шов между теменными костями не сформирован, поэтому визуально роднички сливаются в единое пространство. Зачатки носовых костей и верхней челюсти сформированы симметрично, зачатки нижней челюсти представлены в виде симметричных трубчатых костей, глазницы правильной формы. Позвоночник представлен в виде тяжа симметрично расположенных зачатков окостенения отростков позвонков по сторонам спинномозгового канала. Зачатки окостенения тел позвонков наблюдаются в виде отдельных ядер. Ребра представлены в виде симметрично расположенных участков окостенения с типичными местами отхождения от позвоночника, изменений развития не выявлено.

Пояс верхних конечностей представлен симметрично расположенными зачатками лопаток и ключиц. Пояс нижних конечностей выглядит в виде зачатков тазовых костей в типичном для них месте. Кости плеча, предплечья, бедра и голени представлены зачатками окостенения трубчатых костей. Точки окостенения костей запястья и плюсны видны в виде симметрично расположенных ядер, в количестве 9,26±1,4 у плодов контрольной группы и 10,0±1,6 – экспериментальной группы (р0,05).

Таким образом, можно констатировать, что УНМ «Таунит» не влияет на эмбриогенез; не вызывает постимплантационной гибели, задержки развития плодов, анатомических изменений, в том числе костной системы.

4.6. Постнатальное развитие потомства первой генерации белых мышей, подвергшихся воздействию УНМ «Таунит»

Изучение влияний УНМ «Таунит» на постнатальное развитие потомства F1 генерации проводили на мышатах, родившихся от самок контрольной и экспериментальной групп. Результаты исследований представлены в таблице 10.

Наблюдения за физическим развитием потомства мышей обеих групп в течение 21 суток позволило заключить, что по числу живых и мертвых новорожденных, срокам отлипания ушей, прорезывания резцов, открытия глаз и появления первичного волосяного покрова достоверных различий между экспериментальной и контрольной группами не наблюдалось. В то же время, обнаружены отличия по среднему размеру помета, гибели молодняка, количеству самок и самцов в потомстве (p0,05).

–  –  –

Результаты тестов «обонятельная рефлекс» и «спонтанная двигательная активность» также свидетельствуют об отсутствии значимых различий между показателями групп животных (таблица 11).

Согласно тесту «открытое поле», потомство от экспериментальных самок не отличалось по двигательной активности от потомства контрольных особей (таблица 12).

Таким образом, наноматериал «Таунит» при поступлении в организм самок белых мышей во время беременности и в период молочного вскармливания приплода не влиял отрицательно на физическое развитие, сроки созревания сенсорно-двигательных рефлексов и эмоционально-двигательное поведение потомства первой генерации.

–  –  –

Динамика массы тела потомства самок контрольной и экспериментальной групп представлена на рисунке 24.

7,2* 7 6,5* 5,8*

–  –  –

2,3 Сроки эксперимента, сут.

Рисунок 24 - Среднегрупповые характеристики динамики массы тела у потомства первой генерации самок контрольной и экспериментальной групп Примечание: * - различия достоверны (p0,05) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

Можно отметить, что масса тела мышат экспериментальной группы с 5 по 23 сутки постнатального развития превышала аналогичный показатель в контроле (р0,05). Все мышата быстро набирали массу.

Возможно, присутствие в среде УНМ «Таунит» влияет на развитие белой мыши на ранних этапах онтогенеза, что проявляется увеличением массы тела и ее выраженной динамикой. Межгрупповые различия в первые сутки постнатального развития обусловлены внутриутробным влиянием УНМ «Таунит» в результате его беспрепятственного прохождения через ткани плаценты. Кривые динамики изменения массы тела до 11 суток идут практически параллельно, а затем заметно расходятся. Это связано с тем, что примерно на 11 сутки развития мышата начинают самостоятельно передвигаться, и, соответственно, имеют доступ к коллоидному раствору УНМ «Таунит», который используется для поения экспериментальных самок.

К концу 3 недели постнатального развития метрические показатели потомства экспериментальных животных (длина хвоста - 59,8±1,5 мм.; туловища мм.; головы - 22,5±1,1 мм. и задней правой лапы - 16,5±0,4 мм. не отличались от параметров в контроле (хвост - 53,9±2,8 мм.; туловище - 30,9±1,9 мм.; голова - 21,1±1,3 мм.; задняя правая лапа - 14,5±1,0 мм.). Однако показатель общей длины тела у потомства подопытной группы (60,4±1,3 мм.) по сравнению с контрольной (52,0±1,5 мм.) был выше (р0,05) (рисунок 25).

В целом наблюдалась тенденция к увеличению всех метрических характеристик у животных экспериментальной группы, что, видимо, вызвано поступлением в организм УНМ «Таунит» в течение внутриутробного и постнатального развития мышей.

60,4* 59,8 53,9 52,0 Длина, мм 37,9 30,9 22,5 21,1 16,5 14,5

–  –  –

Рисунок 25 - Метрические характеристики потомства первого поколения самок белой мыши контрольной и экспериментальной групп (21 сутки постнатального развития) Примечание: * - различия достоверны (p0,05) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

По достижению половозрелого возраста мышат умерщвляли, после чего проводилось морфологическое исследование внутренних органов. У всех животных экспериментальной группы определяли массу сердца, легких, ЖКТ, селезенки, печени, почек, тимуса, семенников и матки с яичниками, с последующим сравнением данных показателей с контрольными (рисунок 26).

В потомстве самок экспериментальной группы показано увеличение массы тела (на 37,3 %) и всех исследуемых органов, а именно: сердца (на 30,1 %), легких (на 53,2 %), ЖКТ (на 33,3 %), селезнки (на 20,0 %), печени (на 29,0 %), почек (на 40,3 %), тимуса (на 57,3 %), семенников (на 53,8 %), матки с яичниками (на 61,9

–  –  –

Рисунок 26 - Среднегрупповые характеристики массы тела и внутренних органов у мышей экспериментальной группы (%) по отношению к контрольной Примечание: * - различия достоверны p0,05; ** - р0,01 по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

Таким образом, УНМ «Таунит» (450 мг/кг), поступая в организм на стадии его формирования и развития, приводит к увеличению массы и длины тела, а также внутренних органов. К тому же, морфофункциональные изменения у потомства экспериментальной группы оказались более выраженными, по сравнению с эффектами у самок, в организм которых УНМ «Таунит» поступал уже в половозрелом возрасте, как показано ранее (рисунок 17).

4.7. Сравнительная оценка биоэффектов УНМ «Таунит» и углеродного наноматериала другой структуры Для сравнения эффектов перорального поступления УНМ «Таунит» и углеродного наноматериала, имеющего другую структуру, мы использовали суспензию сажи. Для поения особей в группе № 1 был взят УНМ «Таунит» в концентрации 0,02 % по массе в дистиллированной воде. Концентрация сажи в приготовленной суспензии составляла 0,02 % (группа № 2). Для поения контрольной группы использовали питьевую воду.

Первоначально оценивали динамику массы тела у исследуемых групп самок (рисунок 27).

27,5

–  –  –

Рисунок 27 - Динамика среднегрупповых значений массы тела самок белых мышей в контрольной и экспериментальных группах Примечание: * - различия достоверны (p0,05) по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе; - различия достоверны (p0,05) по сравнению с соответствующим показателем в группе № 1 (УНМ «Таунит»).

Как показано на рисунке 27, до 35 суток эксперимента масса тела у исследуемых групп самок изменялась однонаправленно. В более поздние сроки наблюдались разнонаправленные сдвиги. В подопытной группе № 1 (УНМ «Таунит») отмечалась тенденция к снижению величины показателей относительно уровня контроля, однако достоверные отличия отсутствовали. В группе № 2 на 56-е и 63-е сутки эксперимента масса тела увеличилась на 1,15 и 1,23 г. относительно контроля и на 1,55 и 2,28 г. по отношению к группе № 1 (УНМ «Таунит») (р0,05). Таким образом, можно сделать вывод, что УНМ (сажа) оказывает более выраженный эффект в отношении массы тела и ее динамики по сравнению с УНМ «Таунит». При оценке длины тела, достоверных отличий между группами животных не обнаружено.

При изучении показателей массы внутренних органов у животных группы № 1 показано увеличение массы ЖКТ (p0,05) и матки с яичниками (p0,01) на 16,5 и 65,5 % соответственно. Также наблюдалась тенденция к повышению массы тела, легких, печени и сердца (рисунок 28).

–  –  –

Рисунок 28 – Среднегрупповые характеристики массы тела и внутренних органов мышей экспериментальной группы № 1 по отношению к контрольной группе (%) Примечание: * - различия достоверны p0,05; ** - р0,01 по сравнению с соответствующим показателем в контрольной группе.

В то же время данные показатели для селезенки в экспериментальной группе на 11,93 % снизились (p0,05).

Оценка изменений в группе № 2 (УНМ сажа) показала повышение массы тела (на 8,94 %) и всех внутренних органов, наиболее выраженное в отношении легких (на 17,18 %), ЖКТ (на 13,21 %), матки с яичниками (на 26,78 %) (p0,05…0,01), по сравнению с контрольной группой животных (рисунок 29). Это свидетельствует о большем эффекте наночастиц сажи на экспериментальных животных, по сравнению с УНМ «Таунит», вводимым в аналогичной дозировке (рисунок 28).

тело

–  –  –



Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |
Похожие работы:

«Мезенцева Ольга Александровна ПСИХОФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ АДАПТАЦИЯ СТУДЕНТОВБАКАЛАВРОВ МЛАДШИХ И СТАРШИХ КУРСОВ С УЧЕТОМ ИХ ЦЕННОСТНЫХ ОРИЕНТАЦИЙ 03.03.01. Физиология Диссертация на соискание учной степени кандидата биологических наук Научный руководителькандидат биологических наук, профессор Овсянникова Н. Н. Москва...»

«ШОШИНА ИРИНА ИВАНОВНА ЛОКАЛЬНЫЙ И ГЛОБАЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ИЗОБРАЖЕНИЙ В НОРМЕ И ПРИ ШИЗОФРЕНИИ 03.03.01 – физиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора биологических наук НАУЧНЫЙ КОНСУЛЬТАНТ: ШЕЛЕПИН ЮРИЙ ЕВГЕНЬЕВИЧ, ДОКТОР МЕДИЦИНСКИХ НАУК, ПРОФЕССОР САНКТ-ПЕТЕРБУРГ 2014 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1. ПРОСТРАНСТВЕННО-ЧАСТОТНЫЙ АНАЛИЗ КАК МЕТОД...»

«ХИЖНЯК Роман Михайлович ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ МИКРОЭЛЕМЕНТОВ (Zn, Cu, Co, Mo, Cr, Ni) В АГРОЭКОСИСТЕМАХ ЛЕСОСТЕПНОЙ ЗОНЫ ЮГО-ЗАПАДНОЙ ЧАСТИ ЦЧО Специальность: 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: заслуженный деятель науки РФ, доктор сельскохозяйственных наук, профессор С.В. Лукин Белгород, 2015 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ.....»

«Куценко Диана Олеговна Особенности структуры пространственной организации ЭЭГ при различных клинических вариантах проявления депрессивного синдрома 03.03.01 – физиология. Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: Д.б.н. В.Т. Шуваев Консультант: К.м.н. А.А. Ивонин Санкт-Петербург 2015 Содержание Введение 3 1. Обзор...»

«КИРЕЕВА НАТАЛИЯ СЕРГЕЕВНА ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОЕ ВОССТАНОВЛЕНИЕ ПАЦИЕНТОВ ПРИ ДЕКОМПРЕССИВНЫХ ВМЕШАТЕЛЬСТВАХ ПО ПОВОДУ ШЕЙНОЙ СПОНДИЛОГЕННОЙ МИЕЛОПАТИИ (КЛИНИКО-НЕЙРОФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ) 14.01.11 – нервные болезни 14.01.18 – нейрохирургия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научные руководители: Доктор медицинских наук Шахпаронова Н.В. Доктор медицинских наук...»

«Гвоздева Алиса Петровна ИНЕРЦИОННЫЕ ПРОЦЕССЫ В СЛУХОВОЙ СИСТЕМЕ ПРИ ЛОКАЛИЗАЦИИ ПРИБЛИЖАЮЩЕГОСЯ ЗВУКОВОГО ОБРАЗА 03.03.01 – физиология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д.б.н., в.н.с. Андреева Ирина Германовна САНКТ-ПЕТЕРБУРГ ОГЛАВЛЕНИЕ стр. ОБЩАЯ...»

«Радюкина Наталия Львовна ФУНКЦИОНИРОВАНИЕ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ ДИКОРАСТУЩИХ ВИДОВ РАСТЕНИЙ ПРИ КРАТКОВРЕМЕННОМ ДЕЙСТВИИ СТРЕССОРОВ Специальность 03.01.05 – «физиология и биохимия растений» Диссертация на соискание учёной степени доктора биологических наук Научный консультант – чл.-корр РАН Кузнецов Вл.В. Москва – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ Список сокращений...»

«Шведов Денис Николаевич РАННИЕ ПРИЗНАКИ ПСИХОФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ У СТУДЕНТОВ-БАКАЛАВРОВ В ПРОЦЕССЕ УЧЕБНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ 03.03.01. Физиология Диссертация на соискание учной степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, профессор Овсянникова Н. Н. Орел 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ...»

«Митин Игорь Николаевич Психофизиологическая адаптация как ведущий фактор обеспечения безопасности дорожного движения 05.26.02. Безопасность в чрезвычайных ситуациях (медицина катастроф) Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель доктор биологических наук, профессор В. Ю. Щебланов Москва,...»

«КРЯЖЕВ ДМИТРИЙ ВАЛЕРЬЕВИЧ ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ДИАГНОСТИКИ ПРОЦЕССОВ БИОДЕСТРУКЦИИ ПРИРОДНЫХ И СИНТЕТИЧЕСКИХ ПОЛИМЕРНЫХ МАТЕРИАЛОВ В УСЛОВИЯХ ВОЗДЕЙСТВИЯ РЯДА АБИОТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ Специальность: 03.02.08 – экология (биология) ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»

«Мезенцева Ольга Александровна ПСИХОФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ АДАПТАЦИЯ СТУДЕНТОВБАКАЛАВРОВ МЛАДШИХ И СТАРШИХ КУРСОВ С УЧЕТОМ ИХ ЦЕННОСТНЫХ ОРИЕНТАЦИЙ 03.03.01. Физиология Диссертация на соискание учной степени кандидата биологических наук Научный руководителькандидат биологических наук, профессор Овсянникова Н. Н. Москва...»

«ГУРЬЯНОВА ЮЛИЯ ВИКТОРОВНА ПОВЫШЕНИЕ ЗИМОСТОЙКОСТИ И ПРОДУКТИВНОСТИ ЯБЛОНИ РЕГУЛИРОВАНИЕМ УСТОЙЧИВОСТИ ПОКОЯ ОРГАНИЧЕСКИМ И МИНЕРАЛЬНЫМ ПИТАНИЕМ 06.01.08 – плодоводство, виноградарство Диссертация на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук Научный консультант, доктор сельскохозяйственных наук, профессор Воробьев Вячеслав Филиппович Москва 2015 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ..4 1....»

«Фролов Александр Акимович Функциональные особенности респираторной системы в предродовом периоде и в родах в зависимости от стереоизомерии женского организма и их влияние на состояние плода 03.03.01 физиология 14.01.01 акушерство и гинекология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук...»

«Хайбуллина Светлана Францевна МОЛЕКУЛЯРНЫЕ И КЛЕТОЧНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ПАТОГЕНЕЗА ХАНТАВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ 14.03.03 – патологическая физиология Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: д.б.н., доцент Ризванов А.А. КАЗАНЬ – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ ГЛАВА 1. ВВЕДЕНИЕ 1.1 Актуальность исследования ГЛАВА 2. ОБЗОР...»

«ЕРМОЛИН Сергей Петрович ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ ОРГАНИЗМА ВОЕННОСЛУЖАЩИХ В УСЛОВИЯХ АРКТИЧЕСКОЙ ЗОНЫ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 03.03.01 – Физиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Гудков А.Б. Архангельск 2014 СОДЕРЖАНИЕ стр. СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И...»

«21 мая 2014 года на заседании Диссертационного совета Д.002.044.01 при Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институте высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН состоялось рассмотрение диссертации Карантыш Галины Владимировны «Онтогенетические особенности поведенческих реакций и функциональных изменений в мозге крыс в моделях ишемии/гипоксии» на соискание ученой степени доктора биологических наук по специальности 03.03.01 – «Физиология». Присутствовало на заседании _20_...»

«УЛЬЯНОВ Владимир Юрьевич ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ И САНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ ГОМЕОСТАЗА В ОСТРОМ И РАННЕМ ПЕРИОДАХ ТРАВМАТИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ...»

«ДАНИЛОВА МАРИЯ НИКОЛАЕВНА Влияние мутаций по генам мембранных рецепторов цитокининов на экспрессию генов хлоропластных белков Arabidopsis thaliana Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Специальность 03.01.05 – физиология и биохимия растений Научные руководители: Доктор биологических наук, профессор В.В. Кузнецов...»

«СВЕДЕНИЯ о результатах публичной защиты Великановой Елены Анатольевны 1. Великанова Елена Анатольевна.2. Диссертация на тему: «Патогенетическое обоснование оптимальных способов доставки ростовых факторов при инфаркте миокарда (экспериментальное исследование)», представленная на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности: 14.03.03 – патологическая физиология.3. На заседании 29 января 2015 г. диссертационный совет Д 001.038.02 при ФГБНУ «Научный центр проблем здоровья...»

«Котельникова Светлана Владимировна НЕЙРОЭНДОКРИННЫЙ ГОМЕОСТАЗ В УСЛОВИЯХ ТОКСИЧЕСКОГО СТРЕССА ПРИ РАЗЛИЧНЫХ РЕЖИМАХ ОСВЕЩЕННОСТИ Специальность 03.03.01 – физиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант доктор биологических наук, профессор Д.Л....»









 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.