WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 

Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 8 |

«ЭКЗОГЕННАЯ РЕГУЛЯЦИЯ ПРОДУКЦИОННОГО ПРОЦЕССА, КАЧЕСТВА ЗЕРНА И УСТОЙЧИВОСТИ К ФИТОПАТОГЕНАМ ОЗИМОЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ ...»

-- [ Страница 1 ] --

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ

ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО

ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОРАЗОВАНИЯ

КУБАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи

ЯБЛОНСКАЯ Елена Карленовна

ЭКЗОГЕННАЯ РЕГУЛЯЦИЯ ПРОДУКЦИОННОГО ПРОЦЕССА,



КАЧЕСТВА ЗЕРНА И УСТОЙЧИВОСТИ К ФИТОПАТОГЕНАМ ОЗИМОЙ

МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ

Специальность 03.01.05 – физиология и биохимия растений Диссертация на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук

Научный консультант:

Д.с.-х.н., профессор Котляров В.В.

Краснодар 2015

СОДЕРЖАНИЕ

Стр.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.

Влияние регуляторов роста растений на продуктивность 1.1 16 зерновых культур и качество зерна Фитогормональная регуляция роста и развития растений 1.2 Применение антидотов и элиситоров как индукторов 1.3 иммунитета

ОБЪЕКТЫ, УСЛОВИЯ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Объекты и условия проведения исследований 2.1 Методы исследований 2.2 Схемы, методика и условия проведения полевых опытов 2.3

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ

Экзогенная регуляция посевных качеств семян и роста 3.1 проростков озимой мягкой пшеницы Влияние препаратов метионин, фуролан и их композиции 3.1.1 на посевные качества семян озимой мягкой пшеницы Влияние препаратов метионин, фуролан и их композиции 3.1.2 на посевные качества семян озимой мягкой пшеницы, пораженной фузариозом Антидотная активность препаратов метионин, фуролан и 3.1.3 их композиции в отношении к гербициду 2,4-Д Влияние препаратов метионин, фуролан и их композиции 3.1.4 на устойчивость проростков озимой пшеницы к водному стрессу Влияние обработки растений озимой пшеницы сорта 3.1.5 Краснодарская 99 препаратом фуролан на посевные качества зерна Биохимическая характеристика влияния препаратов 3.2 фуролан, метионин и их композиции на рост проростков озимой пшеницы Влияние препаратов фуролан, метитонин и их композиции 3.2.1

–  –  –

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АБК – абсцизовая кислота (АBP-1) – ауксинсвязывающий белок который, возможно, является ауксиновым рецептором Aux/IAA белки – они кодируют ядерные белки с очень коротким временем жизни, относящиеся к трансфакторам, образующие гомо- и гетеро- димеры АЗП – аглютенин зародыша пшеницы АМФ – аденозинмонофосфат CRE1( AHK2, AHK3, AHK4) – мембранные рецепторы цитокинина представляющие собой сенсорные гистидиновые киназы;

ГК – гибберелловая кислота (AHR1 и ANR2) – фосфотрансмиттеры АЦК – аминоциклопропанкарбоновая кислота GAMYB – ген продукт экспрессии которого является активатором амилазы.

SLN1 – негативный регулятор действия гиббереллина – ядерный белок, блокирующий гиббереллин-зависимую индукцию транс фактора GAMYB ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота ETR1 – рецептор этилена, относящийся к семейству бикомпонентных регуляторных систем DELLA-белки – репрессорные белки, которые подавляют рост 2,4-Д – 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота ИМК – индолилмасляная кислота ИПВК – индолилпировиноградная кислота ИУК – индолилуксисная кислота МАР киназы – Митоген активированные белки МАРК – митоген активируемые протеинкиназы МАРКК – митогенактивируемый протеинкиназный каскад 5 и – трансмембранный белок сенсорной ETR1, EIN2, EIN3 ERF1 гистидиновой киназы НУК – -нафилуксусная кислота РНК – рибонуклеиновая кислота RLK – рецептор подобная киназа брассенолида мРНК – матричная рибонуклеиновая кислота тРНК – транспортная рибонуклеиновая кислота ЭБ – 2,4-эпиброссинолид ФПФ – фарнезилпирофосфат (PAL) – фениламмиаклиазы (CS) – халконсинтазы ЖАК – жасмоновая кислота;

JAR1 – нечувствительность к ЖАК (от jasmonate resistant1);

JAZ – ЖАК(ZIM-домен (от jasmonat-ZIM); SCF - комплекс Skp1(Cullin(F-box, где Skp1 - белок, ассоциированный с киназой S-фазы, TF – фактор транскрипции (от transcriptional factor);

ZIM – "цинковые пальцы", белок экспрессированный в цветочной меристеме (от Zink-finger protein expressed in inflorescence meristem).





Жасмонаты – предшественники 12-оско-фитодиеновой кислоты (OPDA).

НАДФ – никотинамидадениндинуклеотидфосфат.

SAM - S – аденозалметионин SAT S – аденозалгомоцистеин

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Увеличение производства высококачественного зерна является одной из важнейших задач современного растениеводства и важнейшей составляющей мировой экономики. С каждым годом возрастает потребность в увеличении производства зерна, в связи с большой его народохозяйственной, а также социальной значимостью. Краснодарский край

– один из ведущих производителей зерна в нашей стране, поскольку валовой сбор зерна в этом регионе составляет около 35 % от объема его производства в Южном федеральном округе и 10 % от объема зерна, производимого на всей территории России [1].

При возделывании озимой пшеницы широкое применение нашли гербициды группы 2,4-дихлорфеноксикарбоновых кислот (2,4-Д) и его производных для снижения засоренности посевов сорной растительностью [2, 3-5].

Гербициды оказывают токсическое действие не только на сорные, но и на культурные растения, снижая их продуктивность и качество зерна. Для снижения токсичности гербицидов актуально использование антидотных препаратов, снижающих их отрицательное воздействие на продукционный процесс. Обработка гербицидами, нарушая обменные процессы в растительном организме, способствует снижению сопротивляемости культурных растений к поражению фитопатогенными организмами.

Использование для защиты растений бактерицидов и фунгицидов является экологически не безопасным и дорогостоящим приемом [3].

В связи с этим в стратегии эффективных агротехнических приемов актуально использование индукторов иммунитета, в том числе антидотов, обладающих элиситорной активностью, что позволит повысить адаптационные возможности растений, снизить загрязнение окружающей среды пестицидами, обеспечить получение экологически чистой продукции и 7 понизить ее себестоимость. К таким препаратам относятся аминокислота метионин и созданный в ФГБОУ ВПО КубГТУ регулятор роста растений препарат фуролан. Они малотоксичны, применяются в микродозах и экологически безопасны. Применение метионина и его композиции с фуроланом для снижения токсического действия гербицида 2,4-Д на растения озимой пшеницы ранее не было изучено. Некоторое время тому назад нами было установлено, что фуролан повышает продуктивность растений пшеницы, улучшает физико-химические показатели качества зерна, повышает устойчивость растений к поражению грибковыми заболеваниями и засухе и является антидотом гербицида 2,4-Д.

Диссертационная работа выполнена на кафедре физиологии и биохимии растений ФГБОУВПО «Кубанский государственный аграрный университет»

в соответствии с тематическим планом НИР (№ регистрации 01201153630) и гранта РФФИ № 08-04-99074 «Изучение молекулярных основ снижения токсического воздействия гербицидов на качество зерна пшеницы»

Цель и задачи исследований. Цель настоящих исследований – установить физиолого-биохимические закономерности действия композиции препарата фуролан и метионина на устойчивость растений к гербициду 2,4-Д и поражению фузариозной гнилью, на формирование продуктивности и качество зерна озимой мягкой пшеницы.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи исследований:

изучить физиолого-биохимические особенности влияния композиции препаратов фуролан и метионин, являющиеся антидотами гербицида 2,4-Д, на посевные качества семян, длину и массу проростков озимой мягкой пшеницы;

установить физиолого-биохимические закономерности влияния композиции препаратов фуролан и метионин на снижение токсического воздействия гербицида 2,4-Д на длину и массу растений озимой пшеницы;

выявить особенности воздействия композиции препаратов фуролан и метионин на устойчивость растений озимой мягкой пшеницы к поражению фузариозом;

установить физиолого-биохимические закономерности повышения устойчивости к засухе растений озимой мягкой пшеницы под действием композиции препаратов фуролан и метионин - антидотов гербицида 2,4-Д;

выявить влияние препаратов фуролан, метионин и их композиции на содержание промежуточных метаболитов в синтезе лигнина в листьях проростков озимой мягкой пшеницы;

дать физиологическое обоснование влияния композиции препаратов фуролан и метионин на снижение токсического воздействия гербицида 2,4Д на формирование продуктивности озимой мягкой пшеницы;

разработать и обосновать технологический прием использования композиции препаратов фуролан и метионин для снижения токсического влияния гербицида 2,4-Д на урожай и качество зерна озимой пшеницы, определить экономическую эффективность данного приема.

Теоретическая значимость работы состоит в получении новых знаний в области физиологии и биохимии устойчивости растений озимой мягкой пшеницы к абиотическим (засуха) и биотическим (фузариоз) стрессорам и к гербицидам (гербицид группы 2,4-Д).

Впервые использован комплекс аминокислоты метионин – предшественника антистрессового гормона растений этилена и препарата фуролан (2-(фурил-2)-1,3-диоксалана) для установления физиологобиохимических закономерностей проявления сопряженной устойчивости растений озимой мягкой пшеницы к комплексу стрессоров (засуха, гербицид 2,4-Д, фузариоз).

Установлены закономерности влияния композиции препаратов метионин и фуролан на водный режим, анатомо-морфологическое строение листьев в связи с устойчивостью к низкой влагообеспеченности, синтез белка, фитогормональный статус и содержание фенолкарбоновых кислот, являющихся предшественниками при синтезе лигнина, повышающих устойчивость растений озимой мягкой пшеницы к поражению фузариозом.

Научная новизна результатов исследований. Расширены теоретические представления о физиолого-биохимических закономерностях неспецифической устойчивости растений озимой пшеницы к абиогенным и биогенным стрессорам.

Для композиции препаратов метионин и фуролан установлено комплексное проявление антидотной активности к гербицидам группы 2,4-Д и элиситорной активности, повышающей устойчивость растений озимой мягкой пшеницы к поражению фузариозом.

Установлено, что аминокислота метионин проявляет антидотную активность к гербициду 2,4-Д.

Выявлены физиолого-биохимические особенности элиситорного влияния препаратов фуролан и метионин и их композиции на ответные реакции растений озимой мягкой пшеницы при воздействии фузариоза.

Установлено, что изменение эндогенного уровня АБК и ИУК под действием метионина, фуролана и их композиции способствует росту устойчивости растений к абиотическим (засуха) и биотическим стрессорам (фузариоз), а также к гербицидам группы 2,4-Д.

Установлено, что композиция препаратов метионин и фуролан ускоряют разрушение гербицида 2,4-Д в листьях озимой мягкой пшеницы.

Дано теоретическое и экспериментальное обоснование использования комплекса препаратов метионин и фуролан для повышения неспецифической полевой устойчивости растений озимой пшеницы к комплексу биогенных и абиогенных стрессоров.

Доказано, что применение композиции препаратов фуролан и метионин одновременно повышает устойчивость растений озимой пшеницы к засухе, воздействию гербицидов группы 2,4-Д и фузариозу.

Обоснована технология совместного внесения композиции препаратов метионин и фуролан с гербицидом группы 2,4-Д при выращивании озимой мягкой пшеницы.

Установлено, что комплекс препаратов фуролан и метионин снижает отрицательное влияние гербицидов группы 2,4-Д на качество зерна озимой мягкой пшеницы, повышает массу 1000 зерен, содержание белка и клейковины в зерне и улучшает его качество.

Практическая значимость работы. Предложена стратегия управления продукционным процессом озимой мягкой пшеницы с использованием композиции метионина и фуролана, применение которой позволит снизить токсическое действие гербицидов на продукционный процесс и качество зерна и повысить устойчивость растений к поражению фузариозом.

Разработаны методики определения содержания ИУК и АБК в растениях озимой мягкой пшеницы методом капиллярного электрофореза.

Предложено использовать водный раствор композиции препаратов фуролан и метионин для предпосевной обработки семян с целью улучшения посевных качеств семян озимой пшеницы и повышения устойчивости проростков к засухе.

Для снижения токсического действия гербицидов, повышения устойчивости озимой пшеницы к поражению фузариозом, повышения урожая зерна и улучшения его качества предложено использовать композицию препаратов фуролан и метионин (по 5 г/га каждого препарата) при обработке вегетирующих растений в фазе конец кущения – начало выхода в трубку совместно с внесением гербицида.

Совместное применение комплекса препаратов фуролан и метионин с гербицидами группы 2,4-Д при возделывании озимой мягкой пшеницы позволяет ускорить разрушение гербицида в листьях, повысить урожай зерна и улучшить его качество.

Основные результаты и выводы могут быть использованы при чтении курсов лекций по физиологии и биохимии растений, а также отдельных спецкурсов.

Методология и методы исследований.

Теоретическую и методологическую основу исследований составили труды отечественных и зарубежных ученых по проблемам адаптации растений к стрессовым факторам. Исходной информационно-эмпирической базой исследований послужили научные труды ведущих ученых в области физиологии и биохимии растений, материалы научно-практических конференций, а также данные полученные в ходе исследований. Характер исследуемых объектов и задачи исследования обусловили необходимость применения таких теоретических методов, как постановка проблемы, построение гипотезы, а также научные теории, проверенные практикой. При планировании исследований применялись такие информационные издания, как научные статьи, монографии, научные обзоры, материалы конференций и другие источники. Теоретико-методологическую основу исследований составили лабораторные, лабораторно-полевые и полевые методы исследований с использованием общепринятых методов изучения морфологии, физиологии и биохимии и статистической обработки полученных данных, включая расчет экономической эффективности.

Методика исследований базировалась на теории планирования многофакторных экспериментов и регрессионном и дисперсионном анализе.

Полученные данные регистрировались современными измерительными средствами, прошедшими государственную поверку. Использованные методы базировались на системном подходе и общепризнанных апробированных методиках, применяемых в научных исследованиях с озимой мягкой пшеницей, а так же новых методиках исследований, защищенных патентами РФ. Результаты экспериментальных исследований обрабатывались на ПЭВМ с использованием пакетов прикладных программ «STATISTICA» и «EXСEL».

Основные положения, выносимые на защиту.

Препарат метионин и его композиция с фуроланом улучшают посевные качества семян озимой пшеницы и повышают их устойчивость к водному стрессу и поражению фузариозом.

Препараты фуролан и метионин и их композиция снижают отрицательное воздействие гербицида группы 2,4-Д на рост, фотосинтетическую деятельность и устойчивость к поражению фузариозом растений пшеницы в период вегетации.

Закономерности влияния препаратов фуролан и метионин и их композиции на растения озимой мягкой пшеницы имеют важное значение для понимания особенностей формирования сопряженной устойчивости, позволяющей растениям противостоять воздействию неблагоприятных факторов среды различной природы.

Композиция препаратов фуролан и метионин снижает токсическое действие гербицидов группы 2,4-Д на качество зерна и повышает урожайность озимой мягкой пшеницы.

Повышение экономической эффективности применения препаратов и их композиции совместно с гербицидами группы 2,4-Д при возделывании озимой мягкой пшеницы.

Степень достоверности полученных результатов. Результаты, выводы и рекомендации, сформулированные в диссертационной работе, обоснованы экспериментальными исследованиями, проведенными в лабораторных, опытно-полевых и производственных условиях; достоверность полученных результатов обеспечена использованием современных методов анализа и подтверждена статистической обработкой экспериментальных данных и результатами внедрения на территории РФ.

Апробация и реализация результатов исследований. Результаты исследований представлены на международных конференциях: IV международной конференции молодых ученых «Биология: от молекулы до биосферы» (Киев, 2009 г), VIII международной научно-практической конференции «Дни науки» (Биологические науки), (Чехия, Прага, 2012 г.) Материалы II Международной виртуальной интернет-конференции (2013 г., Paxgrid.ru.), Годичном собрании ОФР, Всероссийской научной конференции с международным участием «Инновационные направления современной физиологии растений» (Москва, 2013 г.), Международной научно– практической конференции (Чебоксары: ЦНС «Интерактив плюс», 2014 г.) Всероссийских научно-практических съездах и конференциях: IV Съезде российского общества биохимиков и молекулярных биологов (Новосибирск, 2008 г.), Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых «Повышение эффективности растениеводства и животноводства – путь к рентабельному производству» (Москва, 2008 г.), Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых «Повышение эффективности растениеводства и животноводства – путь к рентабельному производству» (Москва, 2008 г.), 2-й Всероссийской научнопрактической конференции молодых ученых «Научное обеспечение агропромышленного комплекса», (Краснодар, 2008 г.) VII съезде Общества Физиологов России (Нижний Новгород, 2011 г), VI Всероссийской конференции молодых ученых «Стратегия взаимодействия микроорганизмов и растений с окружающей средой» (Саратов, 2012 г.), Годичное собрание ОФР, Всероссийская научная конференция с международным участием «Инновационные направления современной физиологии растений» (Москва, 2013 г.), Третий Всероссийский съезд по защите растений «Фитосанитарная оптимизация агроэкосистем» (Санкт-Петербург, 2013 г.), VII международной заочной научно-практической конференций (Новосибирск, 2013 г.), VII и международные заочные научно-практические конференции VIII (Новосибирск, 2014 г.) На ежегодных конференциях Кубанского государственного аграрного университета «Энтузиасты аграрной науки» (Краснодар, 2008-2015 г.г.).

На конференциях получателей грантов регионального конкурса «Юг»

РФФИ и администрации Краснодарского края «Вклад фундаментальных исследований в развитие современной инновационной экономики Краснодарского края» (Краснодар, 2008-2010 г.г.).

Работы по внедрению технологического приема, включающего применение препарата фуролан и композиции препаратов фуролан и метионин с гербицидами группы 2,4-Д, проводились поэтапно по мере выполнения в ОАО «Кубань» Павловского района Краснодарского края (2011-2014 гг.), на опытном поле Учхоза «Кубань» КубГАУ (2011-2012 г.г.), а также в Саратовской и Белгородской областях, Поволжье, на Урале и в Ставропольском крае (с 2012 г.).

Личный вклад соискателя в проведении научных исследований и получении наиболее существенных научных результатов состоит в следующем:

определение актуальной проблемы в области науки физиологии и биохимии растений и отрасли растениеводства и разработка программы исследований в этом направлении;

непосредственное участие в закладке опытов и проведении научного эксперимента;

получение исходных данных, их обработка и интерпретация;

личное участие в апробации результатов исследований;

личное участие в разработке методик определения содержания ИУК и АБК методом капиллярного электрофореза в растениях озимой мягкой пшеницы;

Загрузка...

обобщение полученных результатов исследований, их публикация в различных научных изданиях, включая рекомендованные журналы ВАК.

Публикации результатов исследований. Основные положения диссертационной работы опубликованы в 47 научных работах, в том числе: в 2 монографиях, 1 учебном пособии для магистров, 32 статьях (в том числе 12 в рецензируемых научных журналах и изданиях, определенных ВАК РФ), 6 патентах.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, 3 глав и заключения, рекомендаций производству, списка использованных литературных источников и приложений. Диссертация изложена на 337 страницах основного печатного текста; содержат 222 таблицы, 24 рисунка, список литературных источников включает 276 ссылок, в том числе иностранных авторов.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

–  –  –

Одной из актуальных проблем современной физиологии и биохимии является изучение закономерностей формирования продуктивности, качества зерна и устойчивости к поражению фитопатогенами [1].

Конечным результатом сложнейших физиолого-биохимических процессов, протекающих в растении в процессе онтогенеза, является продуктивность и качество урожая сельскохозяйственных культур. Большое влияние на скорость и направленность их оказывают генетический потенциал растений и условия внешней среды [2-4].

Адаптация растений выражается в реализации генетического потенциала через продуктивность и ее составляющие – рост, развитие, формирование элементов продуктивности [1].

Генетический потенциал сорта и условия возделывания, в т.ч.

абиотические, биотические и антропогенные факторы оказывают огромное влияние на продуктивность и качество зерна.

Высокое качество зерна многие из районированных сортов обеспечивают лишь в годы, благоприятные для формирования их технологических свойств. Однако в любых почвенно-климатических условиях необходимо сохранять качество зерна [4].

Внешние условия среды оказывают существенное влияние на синтез, распад и передвижение органических веществ в генеративные органы, что определяет продуктивность и высокое качество урожая. На управление процессами роста и развития растений направлено большинство технологических приемов, используемых в интенсивном растениеводстве [4Окружающая среда оказывает существенное влияние на процессы роста и развития растений. Адаптация как отдельных растений, так и агроценозов в целом определяется не только генотипом, но и комплексом факторов, воздействующих на растительный организм [10-13].

В связи с широким применением интенсивных технологий возделывания использование традиционных агротехнических приемов повышения урожайности малоэффективно. Поэтому для увеличения продуктивности культур перспективно применение биологически активных веществ [14-28].

Поскольку растение ведет прикрепленный образ жизни, важной стратегией его существования является опережающая физиологическая реакция на климатические стрессы. Чтобы осуществить превентивную реакцию, растение «оценивает информацию» из внешней среды. Каждый из факторов воспринимается с помощью рецепторов, превращаясь в сигнал.

Далее сигнал трансформируется и передается в виде «возмущения»

гормональной системы, системы вторичных мессенджеров, активности генома, изменения метаболизма и т.п. [29].

Разнородные сигналы интегрируются в растении так, чтобы его ответ стал максимально адекватным в создавшихся условиях. Оценить информацию на биохимическом уровне позволяет взаимосвязь потоков информации сигнальных систем. В случаях, когда сигналы от разных систем подтверждают друг друга, стимулы действуют как синергисты, усиливая друг друга. В других случаях растение оказывается в противоречивой непривычной ситуации и между сигналами возникает онтогонизм [30].

Крупнейшим достижением в области физиологии растений является открытие и изучение веществ, обладающих физиологической активностью, оказывающих влияние на ростовые и синтетические процессы в растительном организме, которыми являются регуляторы роста растений.

В сельскохозяйственном производстве регуляторы роста растений применяются для изменения выраженности свойств растений в онтогенезе, замедления или ускорения их роста и развития, активации корнеобразования и цветения, обеспечения синхронного созревания урожая, улучшения его товарных качеств и повышения устойчивости растений к действию стрессовых факторов среды [24, 29, 30, 31].

Применение регуляторов роста растений позволяет усиливать хозяйственно-ценные признаки и свойства растений при районировании сортов: увеличить урожай, повысить устойчивость растений к неблагоприятным факторам среды, включая засухо- или морозостойкость растений, ускорить созревание, предотвратить полегание посевов, повысить устойчивость растений к патогенам и улучшить качество урожая [30-33].

Регуляторы роста, как природного происхождения, так и синтетические активно влияют на метаболизм растения [24,29,30].

Они являются эффективным дополняющим приемом в интенсивных технологиях, способствуют продвижению системы земледелия на совершенно новую ступень развития, не заменяя элементы технологии возделывания [29, 34].

Комплексное внесение удобрений, пестицидов и регуляторов роста при возделывании озимой пшеницы способствует повышению урожайности до 30% при улучшении качества продукции [11, 35]. Благодаря современным достижениям молекулярной биологии, фитофизиологии, микробиологии, биохимии, химии и других наук, регуляторы роста растений стали не только объектом, но и инструментом биотехнологий, применяемых в селекции высокопродуктивных устойчивых к неблагоприятным условиям среды сортов сельскохозяйственных культур, и обязательным приемом в интенсивных технологиях, максимально реализующих потенциал продуктивности растений [24, 29-33].

На экспрессию генов растительных организмов влияют гормональные и другие вещества, в результате которых происходит репрессия или дерепрессия определенных участков генотипа, обуславливающих соответствующую активность морфологических процессов и биохимических реакций. Особенность действия гормонов - изменение концентрации специфических мРНК в клетках-мишенях. Биологически активные вещества участвуют в регуляции экспрессии генов на уровне стабильности мРНК [26, 34, 37]. Так например, обработка гибберелловой кислотой проростков кукурузы приводит к удлинению поли-(А)-последовательностей мРНК. Это связано с участием других фитогормонов, таких как этилен и абсцизовая кислота, стабилизирующих специфические мРНК [1, 37, 40-48, 51].

Условия внешней среды оказывает влияние на скорость и направленность распада, передвижения и отложения, синтеза органических веществ, определяющих качество и величину и урожая. Вследствие этого большинство агротехнических приемов направлено на управление процессами развития и роста растений [29, 32, 33, 49].

Особую роль, чаще негативную, в процессах обмена веществ играют стрессоры.

В условиях стресса подавляется синтез белка, снижается функциональная активность ДНК, повышается содержание пролина, изменяется водный режим в клетках и возрастает их осмотический потенциал, подавляются поглощение и транспорт ионов, снижаются синтетические процессы и усиливаются гидролитические, уменьшается биологический урожай и его качество [1, 34, 39].

Большие концентрации удобрений и пестицидов могут восприниматься растениями как стрессовые факторы, к которым растения филогенетически не приспособлены [1].

Воздействие внешних факторов может приводить к повышению устойчивости клеток и стимуляции репарационных процессов в них, синтезу шоковых белков, что способствует повышению устойчивости растений к неблагоприятным факторам [1, 39, 50].

Разработка новых технологий позволяют реализовать генетически заложенный в растении уровень продуктивности, который в условиях производства реализуется лишь на 20-30%. Главная причина этого несоответствие применяемых технологий генетическому потенциалу сортов и гибридов. Степень такого несоответствия выражается в уровне снижения урожайности, по сравнению с потенциальной [50, 51 - 55].

Генетическую информацию, заложенную в генетическом фонде растения, никогда не реализуют полностью, а используют только ее часть в зависимости от конкретных условий. В связи с этим активация различных частей генома, приводящая к интенсификации роста и развития, обусловливает наиболее полное проявление потенциальных возможностей растительного организма и повышение его продуктивности [36, 38].

Регуляторы роста как синтетические, так и природного происхождения не являются источником питания, в малых количествах влияют на жизненные процессы растений и не оказывают токсического действия. Они повышают устойчивость растений к неблагоприятным факторам окружающей среды (избытку влаги или засухе, экстремальным температурам) и устойчивость растений к фитопатогенам [38, 46, 47].

Современные представления в области физиологии растений указывают на то, что направление в передвижении пластических веществ в растительном организме определяется как составом, так и количеством и соотношением регуляторов роста [29, 34].

При попадании в организм физиологически активные вещества включаются в обмен веществ или оказывают на него опосредованное воздействие, изменяя обмен веществ, способствуя изменению уровня метаболизма растений, создавая предпосылки для управления их продуктивностью [36, 38].

Образуясь в одних тканях и органах растений, они передвигаются в другие, и в зависимости от физиологического состояния, концентрации и фитогормонального статуса растений стимулируют или тормозят различные физиологические процессы. Это является важным фактором управления продуктивностью сельскохозяйственных культур, вызывающим стимуляцию роста и морфогенеза растений, образование генеративных органов [24,36,52].

В практике регуляторы роста применяют для изменения процессов жизнедеятельности, структуры урожая, облегчения уборки и улучшения его качества [56-58].

Синтетические регуляторы роста используются для:

снижения полегания зерновых культур и стекание зерна;

увеличения урожайности сельскохозяйственных культур;

улучшения завязываемости;

улучшения вегетативного размножения;

ускорение созревания;

повышения морозо- и засухоустойчивости растений;

фитоиммунокоррекции, активирующей у растения комплексную неспецифическую устойчивость ко многим болезням бактериального и вирусного и грибкового происхождения;

уменьшения содержания радионуклидов, нитратов в выращиваемой продукции, увеличения ее сохранности [2].

Использование синтетических регуляторов роста растений в практике позволяет ускорить образование генеративных органов, усилить или затормозить рост, получить сдвиги в обмене веществ идентичные тем, которые возникают под влиянием различных внешних воздействий (длины дня, температуры и др.) и т.д. [24, 29].

1.2 Фитогормональная регуляция роста и развития растений

Фитогормоны растений – соединения, образующиеся в растениях в минимальных количествах, но оказывающие значительное влияние на весь цикл их развития, участвуя в регуляции обмена веществ на всех этапах органогенеза растений. [59, 60]. Они поступают в различные органы или ткани растения, направляя характер протекающих в них процессов и обеспечивая их функциональную целостность [24, 36].

Фитогормональная система – это один из важнейших факторов регуляции и управления ростом и развитием растений. Они играют исключительно важную роль в ответной реакции растений на внешние воздействия и в формировании устойчивости к экстремальным условиям.

Природные регуляторы роста представлены в растениях фитогормонами (стимуляторами роста – ауксинами, гиббереллинами, цитокининами и ингибиторами роста-АБК, этиленом, жасмоновой кислотой), веществами типа витаминов, а также пептидными гормонами, регулирующими развитие растений, и, вместе с жасмоновой и салициловой кислотами и др., участвующими в защите от патогенов (схема 1) [60-65].

Характер протекания важнейших физиологических процессов, таких как рост, формирование органов и пола цветков, цветение, старение листьев, переход в состояние покоя почек, клубней, луковиц и выход из него определяется системой гормональной регуляции. Регуляция этих физиологических процессов высокоспецифична [1, 24, 36].

Фитогормоны в отличие от других физиологически активных веществ (витаминов, микроэлементов) переключают физиологические и морфогенетические программы в растении [29, 34].

Исходя из современной классификации, фитогормоны – это биологические активные соединения, стимулирующие и ингибирующие морфогенетические и физиологические процессы в растениях, осуществляющие взаимодействие клеток, тканей и органов [1].

–  –  –

Активные формы фитогормонов действуют на компетентные к ним клетки, в мембранах и цитоплазме которых присутствуют специфические рецепторы [29, 30].

При взаимодействии фитогормона со своим рецептором запускается цепь каскадных реакций преобразования гормонального сигнала в функциональные ответы клетки. Эти ответы могут быть различными в зависимости от концентрации рецепторов и фитогормонального статуса растения [24, 34].

Фитогормоны влияют на деление и рост клеток растяжением, состояние покоя, созревание, старение, формирование пола, устойчивость к стрессу, тропизмы, транспирацию; обеспечивают функциональную целостность растительного организма, закономерную последовательность фаз индивидуального развития [29, 36].

Гормональная система растения регулирует экспрессию генов путем влияния на степень метилирования ДНК и связывания с белками – репрессорами на опероне. Это ведет к синтезу определенных ферментов и активации структурных генов и позволяет изменить генетические программы клеток и тканей. Эти процессы известны как дедифференциация, редифференциация и дифференциация клеток и тканей [32].

Различные виды реакции растения на один и тот же фитогормон обусловлены наличием в клетке нескольких видов рецепторов одного и того же фитогормона, что обуславливает поли функциональность его действия и определяется не только его концентрацией рецептора, но и гормона, так как полной физиологичекой активностью обладает их комплекс, а не отдельные компоненты. Это обуславливает разную чувствительность клеток к одним и тем же гормонам. Обычно клетки – продуценты данного фитогормона малочувствительны к нему, что обусловлено низкой концентрацией рецепторов, которые в настоящее время недостаточно изучены.

Соответствующие органы – рецепторы должны обладать опознавательной способностью в отношении фитогормонов. Видимо, многие из них – глобулярные белки с высоким сродством к связывающим гормонам [29, 32, 36].

Накоплено большое количество экспериментальных данных, показывающих роль фитогормонов в регуляции экспрессии генов в растительных клетках и влиянии их на синтез белка. Ключевые ферменты, действующие на развилках путей биосинтеза фитогормонов, проявляют высокую чувствительность к изменению факторов среды (освещенности, температуры и т.д.), что приводит к преимущественному синтезу определенного фитогормона [32, 36, 64, 65].

Фитогормоны перемещаются по проводящей системе растения с током пасоки и ассимилятов, а также по межклеточному пространству. Молекулы фитогормонов перемещаются к клеткам-мишеням в соответствии с градиентом концентрации по плазмодесмам – протопластным каналам, связывающим соседние клетки, или через плазмалемму [1, 64]. Нарушение структуры рецепторного белка приводит к невозможности рецептора связываться с гормоном. Аналоги гормона осуществляют процесс частичного связывания с рецептором [34, 64, 65].

Значительно влияние на сортоспецифичность действия регуляторов роста оказывают факторы внешней среды. Фитогормональная регуляция экспрессии генов обуславливает дифференцировку и дедифференцировку, деление, рост клеток и адаптацию к новым условиям [64, 66-67].

Биосинтез стимуляторов и ингибиторов, их инактивация и функционирование непосредственно находятся под контролем ядра. В основе всех корреляций в организме лежат генетически регулируемые уровни эндогенных фитогормонов и их антагонистов, что способствует переключению ростовых центров с одной системы органов на другую.

Существенные сдвиги в гормональном статусе растений вызывают возрастные изменения в клетках, что является одновременно и причиной, и следствием последних. Спектры действия различных фитогормонов перекрываются, что свидетельствует об относительности их специализации [68, 69].

Следовательно, гормональная регуляция, определяемая генотипом, оказывает существенное влияние на него и вместе с генетической регуляцией составляет основу генного контроля при реализации наследственной программы растений. Эти системы, изменяя рост, развитие и другие процессы во взаимодействии с различными факторами среды и определяют тип морфогенеза, продуктивность и адаптацию растений [1, 38, 61].

В систему оценки целесообразно включать показатели содержания индолилуксусной и абсцизовой кислот в тканях проростков, соотношение стимуляторов и ингибиторов роста в корнях и побегах, скорость смены стимуляторной активности на ингибиторную [24, 29, 69-71].

Фитогормоны различаются как по химическому составу, строению, так и по характеру действия и их действие на растение поливалентно.

По химической природе гормоны растений подразделяются на две группы: производные аминокислот (этилен – из метионина и аланина, ауксины – из триптофана), производные мевалоновой кислоты (брассины, фузикокцин, гиббереллины, абсцизины, цитокинины) [24, 70].

Синтез фитогормонов происходит в отдельных частях растений: лист служит донором ключевого продукта синтеза гиббереллинов – каурена, а также абсцизовой кислоты, в зоне растяжения корня – гиббереллины, в апексах побегов образуется ИУК– индолил-3-уксусная кислота, в апексах корней синтезируется кинетин, а источником зеатина является эндосперм проростающих семян.

По функциональности различают 5 основных групп фитогормонов – ауксины, цитокинины, абсцизовая кислота, гиббереллины, этилен и открытые относительно недавно брассиностероиды, жасминовая и салициловая кислоты [29, 34, 70-72].

–  –  –

Ауксины активируют рост стеблей, листьев и корней, а также стимулируют образование корней у черенков растений. Благодаря обнаружению в растениях ауксинов удалось установить внутренние причины ряда ростовых процессов. Они продуцируются растущими верхушками (апексами) стеблей и корней, и, перемещаясь из апексов в зону удлинения клеток, влияют на процесс растяжения. В нормальном состоянии в проростках и корнях содержится большая концентрация ауксинов. При избыточной концентрации ауксина прекращается рост растения.

Ауксин также способен вызывать клеточное деление и коррелятивное взаимодействие между органами растущего растения [70-72].

Наиболее высокие концентрации ИУК наблюдаются в основных зонах роста побега. Образуется ИУК в апексе побега, откуда транспортируется с помошью активного полярного транспорта, требующего затрат энергии.

Транспорт ауксина от клетки к клетке происходит через специальные входные (influx) и выходные (eflux) переносчики в плазматической мембране.

Полярность транспорта обеспечивается ассимметричным распределением этих переносчиков. Белки выходных переносчиков, связанные с мембранами, перемещаются при обмене участками мембран, которые осуществляются с помощью везикулярного транспорта при участии аппарата Гольджи. В результате выходные переносчики могут быстро перемещаться от одной части плазмолеммы к другой, что облегчает изменение направления полярного транспорта [71].

ИУК транспортируется через флоэму от листьев к другим органам растения. Недавно идентифицирован ауксинсвязывающий белок (АBP-1) который, возможно, является ауксиновым рецептором. На другом конце цепи передачи ауксинового сигнала находятся Aux/IAA белки (они кодируют ядерные белки с очень коротким временем жизни, относящиеся к трансфакторам), образующие гомо- и гетеро- димеры. В геноме арабидопсиса обнаружено 25 генов этих белков. Это репрессорные белки, которые связываются с другими регуляторными белками, факторами ответа на ауксин (ARFs) и снижают экспрессию генов, включаемых димером. В свободном состоянии они усиливают транскрипцию многих генов. Действие ауксина приводит к тому, что Aux/IAA-репрессоры связываются с убиквитином, который помечает их для дальнейшей деградации в протеасоме. Таким образом ауксин усиливает экспрессию генов, высвобождая сдерживаемые репрессией механизмы [71-78].

К другим свойствам ауксина относится способность вызывать ряд морфогенетических эффектов: задерживать опадение листьев и завязей, партенокарпию у плодов, активировать корнеобразование. Кроме ИУК известны и другие вещества, обладающие ауксиноподобными свойствами, например: фенилуксусная кислота [66, 69, 70, 72].

Синтетические аналоги ауксина обладают сходными свойствами. К ним относятся 2,4-дихлорфенокси-уксусная кислота (2,4-Д), индолилмасляная кислота (ИМК), -нафтилуксусная кислота (НУК), а так же природные фенольные соединения, стимулирующие рост растений [24, 66, 70].

Один из основных эффектов ауксинов – явление гео- и фототропизма.

Геотропические изгибы возникают из-за несимметрического распределения ауксинов в организме [70].

Ауксины и другие фитогормоны являются одним из необходимых условий процесса образования и самовозобновления цитоплазмы.

Образующиеся в растениях ауксины – важное звено в регуляции передвижения пластических веществ в растении [29, 71, 72].

Ткани и клетки становятся центрами притяжения воды и питательных веществ, что активирует их рост. Ауксины регулируют передвижение и распределение различных веществ в растительном организме, полярность в органах и тканях растений, ведут к перестройке исходных питательных веществ в структурные образования клеток [59, 65].

Синтез ИУК в разных растениях идет разными путями, берущими начало от триптофана (схема 2) [71].

–  –  –

Механизмы регуляции роста стебля, нарушения покоя и зеленения листьев, цветения розеточных растений выявлены после открытия гиббереллинов и цитокининов [24, 26].

Таким образом экзогенные и эндогенные ростовые вещества оказывают стимулирующее воздействие на поступление и передвижение пластических веществ в растении [34].

Ауксины, в зависимости от концентрации, действуют различным образом: при низких дозах ускоряют рост, а при более высоких - тормозят его.

Комплекс ИУК-глюкоза, в котором ИУК соединена с сахаром эфирной связью, можно рассматривать как связанную форму ИУК, выполняющую запасные функции в растении. К другим связанным формам ИУК можно отнести глюкобрассицин, дейтероауксин, неоглюкобрассицин, комплексы ИУК с белком, индолилацетаспарагиновую кислоту, [24, 29, 34, 38].

В ходе превращения триптофана в ИУК образуется в 10 раз больше связанных форм индолов, чем свободных. Введенная в растительные ткани ИУК, претерпевает очень быстрые превращения, что сопровождается исчезновением ее биологической активности, а ростовые и формообразовательные процессы, индуцированные ИУК, осуществляются через большой промежуток времени после ее превращения в неактивные формы [59, 64].

Синтез белка и нуклеиновых кислот регулируется фитогормонами [65].

Под действием ауксинов разрушаются соли кальция (пектаты), вследствие чего происходит размягчение клеточных стенок, увеличение их пластичности, и появление больших промежутков в них [70].

Этап роста, связанный с растяжением клеточных стенок, заключается в повышении содержания целлюлозы и гемицеллюлозы, а также новых порций пектинов и синтезе новых материалов.

Далее происходит осмотическое поглощение воды, поддерживающее силу набухания, которая действует на клеточную стенку [24,70,71].

Первая фаза действия ауксинов сопровождается синтезом новых порций ферментов, катализирующих ряд метаболических реакций, протекающих в растягивающихся стенках и набухающей цитоплазме. Реализация действия ауксина невозможна без синтеза белков ферментов.

Ауксины активируют специфический тип mРНК (РНК посредник), что приводит к образованию ферментов, участвующих в синтезе материала клеточных стенок [59, 72].

Пусковым механизмом для синтеза мРНК служит изменение ионного равновесия в мембранах клеточных органелл и, в частности, клеточных стенок [64, 77].

Действие синтетических аналогов ауксинов, в том числе 2,4-Д, до сих пор остается неясным. Очевидно, что они нарушают нормальный ауксиновый баланс в растении и выступают как разобщители окислительного фосфорилирования и дыхания, подавляют митотическую активность в меристемах растений [24, 66, 77].

Гиббереллины представляют собой соединения, относящиеся к дитерпеноидам флуоренового ряда и очень сходны между собой по структуре.

Гиббереллины образуются из углеводорода энт-каурена. В настоящее время в растении известно более сотни гиббереллинов. Многие из них являются промежуточными или побочными продуктами биосинтетического пути. И только некоторые могут действовать как фитогормоны. Самые важные гиббереллины это ГК -1 и ГК-4 [34, 38, 61, 64-65, 71]. Синтез ГК-1 осуществляется через изопреноид геранилгеранилпирофосфат и включает 13 этапов (схема 3) [71]. В некоторых случаях синтез гиббереллинов контролируется светом через фитохромы. В пивоварении при производстве ячменного солода используется гиббереллин ГК-3 для индуцирования аамилазы ячменных зерен.

–  –  –

Гиббереллины влияют на экспрессию генов. В плазматической мембране находятся гиббереллиновые рецепторы неизвестной природы. Передача сигнала от рецептора к гену, возможно, включает гетеротримерный G-белок, циклический цГМФ, ионы Са2+, кальмодулин и каскад протеинкиназ, возможно МАРК и типов, что приводит к модификации CDPK транскрипционных факторов различных генов. Один из эффектов ГК снижение действия репрессорных белков, которые называются DELLAбелки, подавляющие рост. В результате ГК-зависимого протеинкиназного каскада DELLA-белки убиквитинируются, что способствует их протеасомной деградации с участием убиквитина. Гиббереллин усиливает рост через освобождение от ингибирования [71].

Индукция гиббереллином а-амилазы в алейроновом слое связана с экспрессией гена GAMYB, продукт которого является активатором аамилазы.

В клетках алейронового слоя присутствует SLN1 – негативный регулятор действия гиббереллина – ядерный белок, блокирующий гиббереллин-зависимую индукцию транс фактора GAMYB. Репрессию устраняет гиббереллин, который индуцирует разрушение SLN1. При этом важна DELLA последовательность на N-конце и С-конец молекулы SLN1.

Таким образом в случае гиббереллина, как и в случае ауксина, прохождение гормонального сигнала включает в себя воздействие на убиквитиновую систему, вызывающую избирательную деградацию белковрепрессоров [71-74, 76-78].

Гиббереллины вызывают прорастание покоящихся семян и нарушают период покоя у растений, активируют рост стеблей растений, стимулируют цветение чувствительных к фотопериоду растений, способствуют образованию партенокарпических плодов, стимулируют образование и лигнификацию вторичной ксилемы клеток (с увеличением дозы гибберелловой кислоты число лигнифицированных клеток возрастает) [24, 29, 71].

Рост стебля под действием гиббереллина усиливается главным образом вследствие усиления роста этих клеток. Гиббереллин может стимулировать и растяжение и деление клеток, однако для него характерно действие на клеточные деления в меристеме. Возникшие под действием гиббереллинов митозы ориентируются вдоль главной оси, что вызывает удлинение стебля. В растении ИУК и гибберелловая кислота взаимодействуют, стимулируя образование новой ксилемы [70, 71].

Результаты последних исследований подтверждают взаимодействие ИУК и гибберелловой кислоты при росте стебля. Гиббереллин активирует базипетальный транспорт ИУК, а ИУК активирует транспорт гиббереллина к растущему апексу [1, 36, 64, 70, 72, 76-77].

Вероятный механизм действия гиббереллинов на рост состоит в снятии репрессии со специфических генов, что ведет к активации синтеза мРНК, ферментов, и возникновению новых морфогенетических образований, что проявляется в индукторном действии гиббереллина на синтез -амилазы в эндосперме. Гиббереллин индуцирует синтез -амилазы и некоторых протеиназ [1, 24, 29, 76-77].

Цитокинины стимулируют клеточное деление и повышают его скорость, индуцируют заложение и рост стеблевых почек, как у целых растений, так и у недифференцированных каллусов, а также продлевают жизнь и поддерживают нормальный обмен веществ у изолированных листьев, вызывают их вторичное позеленение [29, 34, 36, 67, 68].

Зеатин, выделенный из молодых зерен кукурузы является производным аденина – 6-(4-окси-3-метил-транс-2-бутениламино)пурин (схема 4) [71].

–  –  –

У зеатина аминогруппа аденина связана с остатком изопрена, гидроксилированным в трас-положении.



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 8 |
Похожие работы:

«Мезенцева Ольга Александровна ПСИХОФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ АДАПТАЦИЯ СТУДЕНТОВБАКАЛАВРОВ МЛАДШИХ И СТАРШИХ КУРСОВ С УЧЕТОМ ИХ ЦЕННОСТНЫХ ОРИЕНТАЦИЙ 03.03.01. Физиология Диссертация на соискание учной степени кандидата биологических наук Научный руководителькандидат биологических наук, профессор Овсянникова Н. Н. Москва...»

«Гурбанова Ляля Русдамовна Особенности вегетативной регуляции вариабельности сердечного ритма в репродуктивном, преи постменопаузальном периодах в зависимости от стереоизомерии женского организма 03.03.01 физиология 14.01.01 – акушерство и гинекология Диссертация на соискание ученой степени кандидата...»

«Мезенцева Ольга Александровна ПСИХОФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ АДАПТАЦИЯ СТУДЕНТОВБАКАЛАВРОВ МЛАДШИХ И СТАРШИХ КУРСОВ С УЧЕТОМ ИХ ЦЕННОСТНЫХ ОРИЕНТАЦИЙ 03.03.01. Физиология Диссертация на соискание учной степени кандидата биологических наук Научный руководителькандидат биологических наук, профессор Овсянникова Н. Н. Москва...»

«ХИЖНЯК Роман Михайлович ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ МИКРОЭЛЕМЕНТОВ (Zn, Cu, Co, Mo, Cr, Ni) В АГРОЭКОСИСТЕМАХ ЛЕСОСТЕПНОЙ ЗОНЫ ЮГО-ЗАПАДНОЙ ЧАСТИ ЦЧО Специальность: 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: заслуженный деятель науки РФ, доктор сельскохозяйственных наук, профессор С.В. Лукин Белгород, 2015 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ.....»

«ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ «ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ДЕРМАТОВЕНЕРОЛОГИИ И КОСМЕТОЛОГИИ» МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ НА ПРАВАХ РУКОПИСИ АРИПОВА МУКАДДАМ ЛУТФИЛЛОЕВНА ОСОБЕНННОСТИ ТЕЧЕНИЯ РОЗАЦЕА НА ФОНЕ ХРОНИЧЕСКОГО ОПИСТОРХОЗА (14.01.10 – КОЖНЫЕ И ВЕНЕРИЧЕСКИЕ БОЛЕЗНИ) Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: Доктор медицинских наук, профессор Хардикова С.А. Москва 2015 Стр. Список сокращений..4 Введение..5...»









 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.