WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 

Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |

«Спонтанные и индуцированные сорта и формы чая (Сamellia sinensis (L.) Kuntze) во влажных субтропиках России и Абхазии, перспективы их размножения и сохранения в культуре in vitro ...»

-- [ Страница 1 ] --

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение

«Всероссийский научно-исследовательский институт

цветоводства и субтропических культур»

На правах рукописи

Гвасалия Майя Валериановна

Спонтанные и индуцированные сорта и формы чая

(Сamellia sinensis (L.) Kuntze) во влажных субтропиках России и

Абхазии, перспективы их размножения и сохранения

в культуре in vitro

Специальность 06.01.05 – Селекция и семеноводство



сельскохозяйственных растений

Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Научный руководитель:

Туов Маджид Тахирович доктор сельскохозяйственных наук Сочи – 2015 г.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ……………………………………………………………………4

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ……………………………………………………..11

1.1 История развития чаеводства в Краснодарском крае и Абхазии………..11

1.2 Современное состояние и перспективы развития чаеводства…………...13

1.3 Морфобиологические особенности растений чая (Camellia sinensis ( L.) Kuntze)…………………………………………………15

1.4 Климат и почвы влажной субтропической зоны, требования растений чая к условиям произрастания………………………………………………….19

1.5 Размножение чая……………………………………………………………23 1.5.1 Клональное микроразмножение чая в культуре in vitro………………..24

1.6 Селекция чая…

1.7 Естественная изменчивость растений чая…

1.8 Спонтанная изменчивость, ее роль в эволюции и селекции растений….47

2. УСЛОВИЯ, ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ…

2.1 Почвенно-климатические условия в зонах проведения полевых опытов…………………………………………………...56

2.2 Изучаемые сорта, формы, популяции чая и методы их исследования.....58

3. СПОНТАННАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ СОРТА КОЛХИДА,

ПОПУЛЯЦИИ КИМЫНЬ И МЕСТНОЙ ПОПУЛЯЦИИ ЧАЯ В ДВУХ

АГРОЭКОЛОГИЧЕСКИХ ЗОНАХ АБХАЗИИ………………………………66

3.1 Частота и спектр спонтанных соматических мутаций сорта Колхида и популяций чая…………………………………………………………………..66

3.2 Перспективные спонтанные формы чая…………………………………..73 3.2.1 Морфобиологическая характеристика спонтанных форм чая…………73 3.2.2 Кариологический анализ спонтанных форм чая ……………………….81 3.2.3 Хозяйственная ценность спонтанных форм чая………………………..82 3.2.4 Биохимический анализ спонтанных форм чая…

4. СЕЛЕКЦИОННАЯ ОЦЕНКА СПОНТАННЫХ СОРТОВ И

ИНДУЦИРОВАННЫХ ФОРМ ЧАЯ В УСЛОВИЯХ ВЛАЖНЫХ

СУБТРОПИКОВ РОССИИ…………………………………………………….88

4.1 Продуктивность спонтанных сортов и индуцированных форм чая…….88

4.2 Морфобиологические особенности спонтанных сортов и индуцированных форм чая……………………………………………………..95

4.3 Основные показатели качества чайного сырья спонтанных сортов и индуцированных форм чая……………………………………………………..99

4.4 Экономическая эффективность спонтанных сортов и индуцированных форм чая………………………………………………………………………..103

5. КЛОНАЛЬНОЕ МИКРОРАЗМНОЖЕНИЕ ЧАЯ И СОХРАНЕНИЕ

ЦЕННЫХ ГЕНОТИПОВ В КУЛЬТУРЕ IN VITRO…………………………106

5.1 Введение эксплантов чая в стерильную культуру in vitro……………...106

5.2 Индукция морфогенеза и получение микропобегов чая в культуре in vitro……………………………………………………………...109

5.3 Укоренение микропобегов чая в культуре in vitro………………………112

5.4 Индукция органогенеза из каллусной ткани в культуре in vitro……….115

5.5 Адаптация микрорастений чая к условиям ex vitro………

5.6 Депонирование микропобегов чая в культуре in vitro…………………….120 ЗАКЛЮЧЕНИЕ…

ПРЕДЛОЖЕНИЯ СЕЛЕКЦИИ И ПРОИЗВОДСТВУ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ…………………………..125 ПРИЛОЖЕНИЯ………………………………………………………………..152

ВВЕДЕНИЕ

Субтропические районы Краснодарского края и Абхазии относятся к самым северным регионам промышленного возделывания культуры чая в мире. Заложены они были в период с 1936 по 1956 годы семенами грузинских сортов-популяций Бахтадзе К.Е., а также семенами, завезенными из основных чаепроизводящих стран мира. Вследствие этого, практически все чайные плантации состоят из множества гибридов китайской, ассамской и японской разновидности чая и являются носителями как положительных, так и отрицательных признаков.

Отечественными учеными накоплен большой опыт селекционной работы по чаю. В своих исследованиях они использовали высокотехнологичный метод индуцированного мутагенеза, с применением радиационного облучения и химических мутагенов, позволивший создать формы с измененным генотипом, с высокой частотой и спектром наследственных изменений (Керкадзе, 1986).





Культура чая отличается высокой частотой спонтанной изменчивости, а метод, основанный на отборе в естественных условиях форм с ценными признаками, остается традиционным и доминирующим в селекции (Керкадзе, 1983). В современных условиях производства повышению естественной изменчивости растений чая способствуют такие факторы внешней среды, как высокий фон радиации, температурные шоки, нагрузка пестицидами и удобрениями (Керкадзе, 1972, 1978; 1983; Пивоваров, 2004; Бекман, 2006).

Большое влияние на частоту спонтанных мутаций оказывают также особенности генотипа и физиологические изменения, происходящие в растениях (Преображенская, 1971; Кротова, 2010). Спонтанный и индуцированный мутагенез вызывает изменение ряда наследственных признаков, затрагивающих морфологические, физиологические, биохимические и органолептические показатели растений чая (Керкадзе, 1980; Старков, 2003).

Располагая огромным генофондом, адаптированным к местным условиям произрастания, наиболее перспективные гетероплоидные индуцированные и диплоидные, спонтанные сорта и формы чая в нашей работе были изучены и рекомендованы для селекции и производства.

Переход на сортовое производство позволит повысить продуктивность чайных плантаций, а качество готовой продукции приблизить к уровню мировых стандартов.

Помимо проблемы сортового разнообразия большую тревогу вызывает прекращение ухода за чайными насаждениями и беспрецедентное их изъятие под градостроительство. В связи с этим актуальность получили исследования по усовершенствованию метода клонального микроразмножения чая и разработке условий и режимов депонирования ценных генотипов в культуре in vitro. Благодаря высокому коэффициенту размножения, даже при дефиците исходного материала можно получить генетически однородный посадочный материал для закладки сортовых чайных плантаций. Разработанные биотехнологические приемы позволят не только быстро размножить и депонировать ценные генотипы, но и ускорят селекционный процесс в создании новых сортов, способных расширить ареал распространения культуры чая в более северные районы Краснодарского края.

Степень разработанности темы Вопросы по изучению спонтанной изменчивости растений чая нашли свое отражение в трудах Керкадзе И.Г., Капанадзе И.С., Долидзе К.Г. и других, где были разработаны наиболее актуальные теоретические и практические аспекты. Вместе с тем, в этих работах не было проведено сравнительного изучения спонтанной изменчивости сортов и популяций чая, произрастающих в разных агроэкологических зонах и влияния условий произрастания и генотипа на частоту соматических мутаций, тогда как в наших исследованиях этот вопрос был достаточно изучен.

Большой вклад в изучение новых спонтанных сортов и индуцированных форм чая внес Туов М.Т., под его руководством в 1996 г.

был заложен опытный участок по методике ГСИ, где проводились исследования на молодых насаждениях чая. Наши исследования были продолжены на растениях, вступивших в активный период (10 – 11 лет) полного листосбора, что позволило получить достоверные результаты их урожайности и просчитать экономическую эффективность от внедрения этих сортов и форм в производство.

Клональным микроразмножением чая в культуре in vitro активно занимались в конце 80-х годов прошлого века ученые: Кутубидзе В.В., Таварткиладзе О.К., Вечернина Н.А., Бутенко Р.Г., Катаева Н.В., Иддагода Н.

После распада страны эти работы были полностью прекращены. Несмотря на то, что были получены первые положительные результаты, методика не была достаточно отработана, отмечался низкий процент выхода стерильных эксплантов и ризогенеза, не были разработаны условия и режимы депонирования, рассмотренные и усовершенствованные в нашей работе.

Цель и задачи исследования Пополнить генофонд новыми сортами и формами чая, а также изучить возможности метода клонального микроразмножения для ускоренного размножения и депонирования ценных генотипов в культуре in vitro.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

- изучить спонтанную изменчивость сорта Колхида, популяции Кимынь и местной популяции чая по частоте и спектру соматических мутаций на листосборных плантациях двух агроэкологических зон Абхазии;

провести отбор перспективных форм чая, изучить их морфобиологические особенности, хозяйственную ценность, биохимические показатели, определить кариотип и размножить;

- во влажных субтропиках России, провести селекционную оценку биологического потенциала (урожайности, биохимических и качественных показателей сырья, экономической эффективности) спонтанных сортов Колхида, Каратум, Сочи и индуцированных мутантных форм чая №№ 582, 2264, 3823;

- усовершенствовать методику культивирования in vitro изолированных органов чайного растения сорта Колхида и местной популяции, с подбором питательных сред, режимов выращивания на всех этапах клонального микроразмножения, включая депонирование in vitro.

Научная новизна

На примере сорта Колхида, популяции Кимынь и местной популяции установлена высокая спонтанная изменчивость растений чая по частоте и спектру соматических мутаций, которая зависела от их генотипа и зоны произрастания. Селекционный интерес представляет популяция Кимынь, отличившаяся высокой частотой изменчивости.

В процессе изучения радиамутантных форм чая №№ 582, 3823 выявлено, что гетероплоидия в их кариотипе способствовала улучшению целого ряда наследственных признаков, таких как продуктивность, качество и адаптивность. Показатели селекционной ценности индуцированных форм превысили лучший районированный сорт Колхида.

Отработаны и усовершенствованы все этапы клонального микроразмножения чая в культуре in vitro. В пересадочной культуре поддерживаются микропобеги чая сорта Колхида и местной популяции. Из меристематических очагов каллуса индуцирован органогенез, получены сомаклоны чая. Определены условия для длительного депонирования (в течение 12 месяцев) в культуре in vitro микропобегов чая.

Практическая значимость

Методом спонтанного мутагенеза выделены 23 перспективные формы, отличающиеся от исходного сорта Колхида, популяции Кимынь и местной популяции чая высокой продуктивностью и качеством сырья. Заложен маточно – коллекционный участок (п. Ачигвара, Абхазия).

Внедрение в производство в субтропиках России высокорентабельных спонтанных сортов Колхида, Сочи и перспективных индуцированных форм чая №№ 582 и 3823 повысит экономическую эффективность отрасли чаеводства.

Метод клонального микроразмножения позволит размножить и депонировать ценные генотипы чая в культуре in vitro. Благодаря высокому коэффициенту размножения (1:4,8) можно в короткие сроки обеспечить производство высокосортным посадочным материалом.

Результаты научных исследований прошли производственную проверку и внедрены в 2014 году в ОАО «Адлерский чай» для реконструкции чайных плантаций, на площади 3 га.

Методология и методы исследований При планировании и проведении исследований в виде источников информации использовались информационные издания, научные статьи, монографии, книги и учебники по культуре чая, отчеты по данной тематике, и другие материалы, применялся системный подход. Теоретикометодологическую основу исследований составили методы планирования и проведения опытов, а также лабораторные исследования.

Основные положения, выносимые на защиту:

Спонтанная изменчивость сорта Колхида, популяции Кимынь и 1.

местной популяции чая на примере двух агроэкологических зон Абхазии. Влияние генотипа и зоны произрастания на частоту соматических мутаций, анализ их спектра. Отбор и изучение селекционно-ценных форм чая.

Во влажных субтропиках России селекционная оценка 2.

спонтанных сортов Колхида, Каратум, Сочи и индуцированных форм чая №№ 582, 2264, 3823 по основным показателям продуктивности и качества. Экономическая оценка эффективности от внедрения в производство новых сортов и форм чая.

Усовершенствованная методика клонального микроразмножения 3.

чая в культуре in vitro, с подбором питательных сред, режимов выращивания и депонирования – от введения эксплантов в стерильную культуру, до получения укорененных и адаптированных растений.

Степень достоверности и апробация результатов исследований подтверждается значительным объемом полученных экспериментальных данных, накопленных в результате восьмилетних полевых и лабораторных опытов, выполненных с применением методик: полевого опыта, цитологических и биохимических исследований, клонального микроразмножения в культуре in vitro, а также методов математического анализа, с положительными результатами апробации, подтвержденными в производственных и лабораторных условиях.

Результаты исследований докладывались на международных, всероссийских и научно-практических конференциях: в Майкопе (2008 г.), Сочи, (2009 г., 2014), Грузии, Анасеули (2010 г.), получена золотая медаль за разработку «Метода клонального микроразмножения чая и сохранения ценных генотипов в культуре in vitro» (Москва, ВВЦ, «Золотая Осень», 2013) (Приложение А).

Публикации По теме диссертации опубликовано 17 статей, в том числе 4 из них в изданиях из Перечня, рекомендованного ВАК Российской Федерации.

Структура и объем диссертации Диссертация изложена на 159 страницах компьютерного текста.

Состоит из введения, пяти глав, заключения, и предложений для селекции и производства, содержит 21 таблицу, 37 рисунков, 8 приложений. Список использованной литературы включает 262 источника, в том числе 83 – зарубежных авторов.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 История развития чаеводства в Краснодарском крае и Абхазии В 1878 году из Сухумского Ботанического сада чайные кусты были привезены в Сочи, и высажены в имении Мамонтовых садоводом Рейнгольдом Гарбе, ставшим впоследствии первым директором сочинской опытной плодовой станции, ныне ФГБНУ ВНИИЦиСК. В 1901 году Иуда Кошман, заложил в селе Солох – Аул (в 30 км от Сочи) на площади 1350 м 2, небольшую чайную плантацию из 800 кустов семенами, привезенными из Чаквы (Грузия). В 1923 году на сельскохозяйственной выставке в Москве он получил золотую медаль «За самый северный в мире чай» (Дараселия, 1989).

Первые опытные насаждения чая в Краснодарском крае были заложены семенами с плантации Кошмана.

Первые промышленные чайные плантации, площадью 150 га начинают закладываться уже в 1936 году в Адлерском и Лазаревском районах г. Сочи.

В 1932 г. создана отечественная семенная база, позволившая полностью освободиться от импорта семян из Индии, Японии и Китая. Чайное хозяйство строилось темпами, каких не знала история. Организованы чайные совхозы в Дагомысе, Верхней Хосте, Верхней Мацесте, Солох – Ауле, Лазаревской и Гойтхе. Строятся чайные фабрики в Дагомысе (1940 г.) и Адлере (1953 г.).

Для совершенствования управления чайным производством в 1972 году создано производственное объединение «Краснодарский чай», куда вошли шесть крупных чайных совхозов, кроме Гойтха. Первым руководителем объединения стал Герой социалистического труда У.Г. Штейман.

Совхозы объединения выращивали около 8 тыс. тонн чайного листа.

Общая площадь чайных плантаций составляла 1650 га. Самым крупным чаеводческим совхозом был Дагомысский, с 709 га листосборных плантаций, средней урожайностью 61,9 ц/га, при этом 60 % плантаций были орошаемы, широко применялась малая механизация.

Большая заслуга в развитии чаеводства в Краснодарском крае принадлежит НИИГСиЦ (ныне ФГБНУ ВНИИЦиСК) и ученым: А.Д.

Александрову, Н.М. Вильчинскому, И.И. Лаврейчук, В.П. Гвасалия, М.Т.

Туову, А.И. Троянской, В.А. Евстафьевой, Т.П. Алексеевой. Ими были разработаны и внедрены в производство новые системы подрезки чайных плантаций, способы сбора листа, повышающие урожайность на 20 – 25 %, а также технология вегетативного размножения чая, позволившая поднять чаеводство на качественно новый уровень. Проведены исследования по селекции, агротехнике, орошению и удобрению чая. Изданы методические указания по технологии возделывания чая в субтропической зоне Краснодарского края (Алексеева, 1977). В отделе механизации, В.С.

Подгоричани изобретены машины для проведения шпалерной подрезки и сбору чайного листа. Получили государственное признание новые селекционные сорта, выведенные учеными института. Это сорта:

Мацестинский (Гвасалия В.П.) и Каратум, Сочи (Туов М.Т.).

Чаеводство в Абхазии являлось самой высокорентабельной отраслью сельского хозяйства, чистая прибыль от которой составляла 69,7 % от всех отраслей сельского хозяйства. Первые 27 га чайных плантаций были заложены в 1927 году. Большую помощь в развитии чаеводства оказали специалисты Эшба Г.Ф., Накопия В.Ш., Хашба Д., Гвасалия В.П. Чай выращивали в пяти районах Абхазии. Наиболее выраженная специализация была сконцентрирована в Гальском и Очамчирском районах, где было сосредоточено до 90 % всех чайных плантаций республики. Площадь листосборных плантаций по районам составляла: Гальский – 6667 га;

Очамчирский – 4238 га; Гульрипшский – 308 га; Сухумский 80 га;

Гудаутский – 767 га. Всего в Абхазии насчитывалось 12 тыс. га листосборных плантаций. В настоящее время общая площадь чайных насаждений составляет 6 тыс. га, в листосборе осталось всего 2 тыс. га. Всю деятельность отрасли координирует «АО Абхазчай».

1.2 Современное состояние и перспективы развития чаеводства Чай для россиян является составной частью национальной культуры.

Приверженность к чаю не поколебали ни кофе, ни другие напитки.

Потребление чая в России составляет 180 тыс. тонн и на рынке чая сохраняется стабильная динамика роста. За год «среднестатистический»

житель России заваривает чуть больше 1,3 кг чая.

Краснодарский край является единственным производителем чая в Российской Федерации. Сейчас мы являемся свидетелями того, как некогда прибыльная отрасль стала убыточной и находится на грани кризиса.

Объясняется это рядом причин, прежде всего увеличением себестоимости чайной продукции, снижением ее конкурентной способности, обусловленной нерегулируемой поставкой на российский рынок дешевого импортного чая, а также фальсифицированного и фасованного под маркой «Краснодарский чай».

В результате расформирования объединения «Краснодарский чай»

была разрушена единая система по производству, переработке и реализации отечественного чая и на его основе были созданы акционерные общества:

ЗАО «Дагомысчай», «Адлер – чай», ОАО «Мацестинский чай», ЗАО «Хоста

– чай», ЗАО «Солох – Аул чай» и ЗАО «Шапсугский чай».

По состоянию на 01.03.2014 г. общая площадь чайных плантаций составляет 1428 га, из которых 1422 га находится в общественном секторе (6 чаеводческих хозяйств) и 6,0 га в частном секторе. Согласно полученным данным от управления сельского хозяйства г. Сочи (2014 г.) в эксплуатации фактически находится 214 га, что составляет всего 15 % от общей площади насаждений чая. Резко снизилась урожайность, так в 2008 году валовый сбор чайного листа составил 800 тонн с 506 га, в 2009 году – 573 тонны с той же площади, а в 2013 году – с 214 га – 151 тонна. В период с 2005 по 2014 годы на 80 % плантаций не проводятся элементарные агротехнические мероприятия, а с 1993 года полностью вышла из эксплуатации оросительная система, что привело к значительному снижению урожайности. Появилась негативная тенденция к сворачиванию производства чая в крупнейших чаеводческих хозяйствах, таких как ЗАО «Дагомысчай».

Загрузка...
Главные причины – это нежелание собственников и учредителей заниматься чаеводством, недостаточное государственное финансирование, отсутствие законодательных и нормативных актов, дефицит трудовых ресурсов и отсутствие оборотных финансовых средств. Для устойчивого развития чаеводства потребуется целевая программа по развитию чаеводства на период до 2020 года, предусматривающая меры государственной поддержки и субсидирования затрат на реконструкцию отрасли. Необходимо строить новые и реконструировать старые оросительные системы, провести закладку сортовых и обновление старых чайных плантаций, включая инвентаризацию всех насаждений. Для ускоренного восстановления возрастных плантаций требуются: срочная тяжелая и полутяжелая подрезка кустов, а для изреженных насаждений – ремонт. Для выращивания сортового посадочного материала необходим мощный агрокомплекс по вегетативному размножению. Увеличение площадей под культуру чай можно проводить за счет расширения ареала его возделывания, освоением предгорных районов, расположенных на высоте 600 м над уровнем моря. Превосходство горных районов перед низменностями обусловлено высокой и регулярной увлажненностью почвы и наличием снежного покрова в холодные месяцы года, что обеспечит защиту растений от действия низких температур.

Мировое потребление чая растет и составляет 4 млн. т, производство находится на уровне 4,1 млн. т (ФАО, 2010). Каждый день на планете выпивается больше полутора миллиардов чашек чая. Чай выращивают в 37 государствах мира, и его производство в последние годы неуклонно растет.

Прежде всего это: Индия, Китай, Шри-Ланка (о. Цейлон), Япония, Индонезия, Иран, Пакистан, Вьетнам, Бирма, Кения, Уганда, Тайвань, Турция, Малага, Мозамбик, Перу, Аргентина, Бразилия, Мексика, Гватемала, Боливия, Колумбия и др.

Китай остается самой крупной страной по производству чая с объемом производства в 1,4 млн тонн, и его доля в мировом производстве составляет 33% (FAO: Прогнозы по ценам на чай — AGRO XXI). Индия - бесспорно, самый крупный в мире производитель высококачественных сортов чая в мире – 945 тыс. т (Мировой рынок чая: состояние и тенденции watermarket.ru›articles/2351).

–  –  –

Внутри вида Thea sinensis – японскую, китайскую и крупнолистную китайскую; внутри Thea assamica – Ассам, Цейлонский гибрид, Бурма, Манипури, Юньнань и Лушаи (Чхаидзе, 1991).

По принятой современной ботанической классификации, чайное растение относится к типу Angiospermae (покрытосеменные), классу отряду семейству Dicotyledones (двудольные), Parietales, Camelliae (камелиевые), роду Camellia (камелия), виду чай китайский (Camellia sinensis L.) В 1933 году на 6-ом Международном Ботаническом конгрессе в Амстердаме, было принято окончательное решение о принадлежности чая к роду и виду – Camellia sinensis L. K., по классификации Карла Линнея, и Отто Кунце. Вид Camellia sinensis L.K. имеет три разновидности (или подвида):

Китайская камелия (Camellia sinensis var. sinensis, var. japonica) – китайская и японская разновидности (формозский, вьетнамский, индонезийский, грузинский чай) Ассамская камелия (Camellia sinensis var. assamica) — ассамский чай и другие индийские разновидности (индийский, цейлонский, кенийский, угандийский чай и др.) Гибридная или камбоджийская камелия (Camellia sinensis Camellia assamica) – естественный гибрид китайской и ассамской разновидности (в других источниках его называют цейлонская камелия). Выращивается в некоторых районах Индокитая (Чхаидзе, 1991).

Во влажно субтропическом климате Черноморского побережья России и Абхазии широкое распространение получили китайская, китайско – ассамская разновидности чая.

Китайский вид (Camellia sinensis (L.) Kuntze) – небольшой кустарник, высотой не более 2 – 3 метров, с полураскидистой кроной, листья удлиненноовальные, длиной 4,0 – 10,0 см, пластинка листа жесткая, темно-зеленого цвета, кончик листа тупой и короткий, иногда раздвоен.

Молодые побеги антоциановой окраски. При понижениях температуры антоциан залегает в верхнем слое, распределяясь и по губчатой ткани. С наличием антоциана связана морозостойкость чая. В составе антоциана – глюкоза и антоцианиды с присоединением щелочного вещества, тогда антоциан синий, либо кислого, тогда антоциан красный. В зависимости от реакций, какие он претерпевает в клеточном соке с солями, кислотами, дубильными веществами, он придает различную окраску листьям чая. Известно защитное действие антоциана не только от низких температур, но и вредных коротких световых волн и даже грибковой инфекции. Обнаружено, что температура антоциановых листьев выше, по сравнению с зелеными. Органолептическая и технологическая оценка подтверждает, что формы с различной антоциановой окраской в большинстве случаев характеризуются лучшими биохимическими показателями, по сравнению с формами со светло-зеленой и темно-зеленой окраской (Бахтадзе, 1948). Китайская разновидность чая отличается высокой о морозостойкостью, выдерживают минус - 10 - 12 с, а под снежным покровом, при наличии ветрозащитных полос до - 25 - 30 ос. Обусловлено это расположенной в мезофилле листа 2-х слойной палисадной паренхимы (Рисунок 2 – b). Разновидность представлена естественными популяциями:

Янлоудун, Нинджоу, Кимынь, Кангра (Бахтадзе, 1948).

–  –  –

низкорослостью, густым ветвлением. Листья мелкие 4,0 – 5,0 см, с коротким кончиком, ланцетные, кожистые, грубые, с 3-х слойной палисадной паренхимой (Рисунок 2 – а), поэтому из всех видов чая является самым морозостойким. Вследствие низкой урожайности, не получил широкого промышленного распространения, произрастает в виде различных китайско – японских гибридов.

Китайские и индийские разновидности легко скрещиваются между собой путем естественной гибридизации, образуя многочисленные гибриды.

Тогда как скрещивание японской и индийской разновидности происходит труднее и реже.

Чайный куст является растением подлеска и растет за счет продуктов разложения лесной растительности и приспособился к кислой реакции почвенной среды pH = 4,5 – 5,5. Чай перекрестно – опыляемое растение, анемо и энтемофильное. Цветки одиночные или собраны в пучки по 3 – 4 шт., сидят в пазухах листьев, белые, с яркими желтыми пыльниками, располагаются на ложной кисти. Закладка цветочных почек происходит в июне – июле, цветение – в конце сентября, вплоть до наступления о заморозков. Для цветков губительна температура - 2 С. Генеративная активность низкая, всего 2,0 % цветков образуют семена. Плод (3 – 4 – 5) створчатая коробочка, при высыхании трескается и семена, попадая в почву, прорастают. В ядрах семян находится 30 – 35 % чайного масла. При неправильном хранении масло окисляется, и семена теряют всхожесть. В субтропиках России полное вызревание семян – в конце октября, начале ноября.

о Вегетация чайного растения начинается при температуре 10 С, в начале марта. В апреле начинается развитие побегов I порядка. Общий ритм побегообразования включает 2 периода: весенний (май) и летний (июль – август). Соответственно существует 2 периода покоя: зимний (ноябрь – февраль) и летний (июнь). Летний период покоя – представляет собой непродолжительную паузу между двумя волнами интенсивного роста, когда апикальная часть флешей прекращает рост и переходит в состояние глушка.

При наличии орошения и высокого адаптивного потенциала сорта, фаза летнего покоя отсутствует, либо сведена к минимуму.

Удаление значительной массы листьев при сборе ведет к нарушению физиологического состояния растений, снижается активность фотосинтеза и транспирация. Стремление растения восстановить листовой аппарат приводит к сокращению продолжительности его жизни. Поэтому так важен агротехнический уход и орошение листосборных плантаций. Кроме этого часть листьев подвержена естественному опаданию, средняя продолжительность их жизни 2 – 3 года. Наиболее продуктивными, с хорошо действующим ассимиляционным аппаратом являются однолетние листья, накапливающие к зиме пластические вещества. Продолжительность жизни чайного куста свыше ста лет, при должном уходе даже 100 – летние растения остаются листосборными (Дараселия, 1989).

–  –  –

Влажные субтропики России и Абхазии относятся к зонам высокой биологической продуктивности растений (Шашко, 1967). По своему географическому положению они находятся на северных границах субтропических поясов (40 – 44о сев. шир.), и занимают прибрежные южные склоны юго-западных отрогов Кавказских гор (Кварацхелия, 1934, 1952).

Субтропики России – общая протяженность 125 км, от реки Псоу в Адлере и до реки Шепси в Туапсе. Ровных земельных площадей, не считая долин рек, здесь нет. Однако теплый климат, позволяет возделывать культуру чая на высоте до 600 м над уровнем моря. Горный, пересеченный рельеф местности создает большое разнообразие микроклимата в зоне. По признаку вертикальной зональности влажные субтропики Черноморского побережья подразделяются на: предгорье (0 – 200 м над ур. м.), низкогорье (200 – 600 м над ур. м.), среднегорье (600 – 1800 м над ур. м.) и высокогорье (1800 м и выше над ур. м.) (Пиньковский и др., 2011). Культура чая возделывается в основном в предгорной зоне.

Предгорье (0 до 200 м над уровнем моря). Среднегодовая температура о С, влажность воздуха – 70 %. Осадки – 1534 мм в год, + 14,2 преимущественно в осенне-зимний период. Весной и летом – ежегодно повторяющиеся засушливые периоды. Средняя температура самых холодных месяцев (январь, февраль) + 6 оС, теплых месяцев (июль, август) + 23 оС.

Снежный покров – не более 8 дней за зиму, заморозки начинаются с 20 декабря и заканчиваются 5 марта. Морозы в отдельные годы могут достигать минус -14 -16 оС. Продолжительность дня зимой 9 – 10 часов, на 2 часа меньше, чем в тропиках. Продолжительность вегетационного периода 7 – 8 месяцев, сумма активных температур – 4300 оС. Высокие горные хребты, достигающие 1500 – 3000 м над уровнем моря играют роль естественного барьера от проникновения континентальных холодных масс воздуха и одновременно задерживают тепло и влагу, аккумулирующую Черным морем (Селянинов, 1936, 1961). Почвы в основном бурые лесные развитые на красно-бурых и желто-бурых глинах, а также желтоземы. При движении от берега моря в долинах рек встречаются наносные или аллювиальные почвы.

Бурые лесные почвы, развитые на красно-бурых глинах – близки к классическим красноземам, гумус 2,0 – 4,0 %, с кислой реакцией почвенного раствора (pH 4,5 – 5,5). Сформированы на элювии глинистых сланцев, легко разрушаются, образуя мощные наносы. В верхних горизонтах целинных почв накапливается до 10 % гумуса, в обрабатываемых 4 – 5 %, характеризуются средней обеспеченностью азотом, фосфором и калием. По механическому составу отличаются высоким содержанием физической глины (60 – 90 %), но в связи с оструктуренностью, обладают хорошими физическими свойствами.

Это лучшие почвы для чайных плантаций (Богатырев, 1964; Бушин, 1978;

Беседина, 2004, 2007).

Бурые лесные почвы, развитые на желто-бурых глинах, образовались на элювии известково-глинистых сланцев на границе между зоной бурых лесных и желтоземных почв. Характеризуются менее благоприятными свойствами. Содержание гумуса не высокое, максимум 2,8 %.

Обеспеченность азотом и фосфором – средняя. Калий распространен более равномерно. Реакция почвенного раствора кислая. По механическому составу

– тяжело суглинистые, глинистые. Эти почвы пригодны под чай, но необходимо предусматривать мелиоративные мероприятия, направленные на устранение избыточного увлажнения (Юрченко, 1956).

Субтропики Абхазии. Климат мягкий, влажный. Среднегодовая температура + 15,4оС. Средняя температура теплых месяцев + 24оС, холодных + 6 оС (Сухуми) +7,1 оС (Н. Афон). Средняя из абсол. min - 7 оС.

Сумма активных температур – 4507 оС. Влажность воздуха 65 – 77 %.

Осадков выпадает в году 1641 – 1700 мм.

Почвы представлены красноземами, на менее богатых кислых породах желтоземами, на молодых рыхлых отложениях формируются бедные гумусом кислые ненасыщенные подзолисто-желтоземные почвы, на переувлажненных террасах – подзолисто-желтоземные глеевые. По признаку вертикальной зональности культура чая в Абхазии произрастает в первых двух зонах:

I зона – предгорье, ограниченная высотой 0 – 200 м над ур. моря, охватывает холмистые предгорья и приморскую низменность. Почвы сформировались слабоподзолистые и подзолистые, бурые лесные, развитые на красно-бурых глинах. Эта зона наиболее освоена хозяйственной деятельностью, здесь произрастают чайные и цитрусовые плантации.

II зона – низовых лесов, низкогорье, расположенных на высоте 200 – 600 м над ур. моря, зона представлена сочетанием желтоземов с подзолистыми и перегнойно-карбонатными и бурыми лесными почвами (Адзинба, 2011).

Для успешного возделывания культуры чая необходимо наличие:

среднегодовой температуры не ниже + 12,5 оС, средней температуры за вегетационный период выше + 20 оС. Абсолютный зимний минимум при снежном покрове минус -12 -14 оС, при его отсутствии -8 -9 оС. Особенно чай требователен к осадкам и влажности воздуха. Годовые осадки должны быть не ниже 1300 мм, а за вегетационный период (с апреля по октябрь) не ниже 700 – 900 мм. Годовая относительная влажность воздуха не ниже 70 – 75 %, а за вегетационный период 75 – 80 % и выше. Установлена минимальная сумма активных температур 3500 оС (Селянинов, 1936).

Лучшими почвами для чая являются красноземы и бурые лесные почвы, подходят желтоземные и желтоземно-подзолистые, но они требуют окультуривания и проведения мелиоративных мероприятий. Почвы должны быть глубокими до 70 – 80 см, кислыми (pH 4,5 – 5,5), и не иметь избытка влаги.

Всем выше перечисленным требованиям отвечают климатические и почвенные условия наших влажных субтропиков. Многочисленные исследования подтверждают, что чай хорошо растет в ряде предгорных районов Кубани и Адыгеи, где абсолютный минимум при снежном покрове достигает минус -34 оС, а количество осадков за вегетационный период выпадает всего 400 – 500 мм, что указывает на высокую пластичность культуры чая (Александров, 1949).

1.5 Размножение чая

Чай размножается генеративным (семенами) и вегетативным (черенками) способами, которые имеют свои преимущества и недостатки. К недостаткам семенного размножения можно отнести высокую частоту расщепления генетических признаков, приводящую к образованию популяций, с большой пестротой биологических и хозяйственных признаковов, а к преимуществам – экономия затрат и простота способа. В начале 70-х годов была разработана технология вегетативного размножения чая, открывшая большие перспективы в деле создания сортовых промышленных чайных плантаций. Вегетативное размножение тоже имеет свои недостатки – это накопление и передача инфекции, а также большие материальные затраты, связанные со строительством специальных камер с оросительными установками. Преимущества – получение генетически однородного посадочного материала.

Плантации, заложенные вегетативно размноженными саженцами, отличаются выравненностью шпалер, интенсивностью побегообразования, продуктивностью и равномерным подходом побегов к сбору. Это позволяет успешно применять комплексную механизацию. Вегетативное размножение исключает возможность появления низкоурожайных форм и гибридов. Все это ведет к повышению урожайности и качества готовой продукции (Дараселия, 1989).

С 1960 года масштабные исследования в этом направлении проводились в 2-х научных центрах: ВНИИЧиСК (Грузия, Анасеули) и ВНИИГСиЦ (Сочи). Лучший способ – черенкование. При летнем сроке укореняемость составляет – 98 %, при весеннем – 76 %, субстратом служит чаепригодная почва. В одну емкость 20 х 15 см рекомендуется сажать по 2 однолистных или 2-х листных черенка без пятки. До последнего времени этот способ размножения чая был единственно эффективным, но достижения в области биотехнологии позволили использовать метод клонального микроразмножения в культуре in vitro (Катаева, 1981; Шевелуха, 2000).

1.5.1 Клональное микроразмножение чая в культуре in vitro

Одной из важнейших задач в деле охраны природы является сохранение ее биологического разнообразия. Связано это с ограниченностью территорий произрастания биологических ресурсов и угрозой их истощения.

С начала XX века происходит массовое исчезновение сортов, видов и даже родов растений (Драгавцев, 1995). Тревожная ситуация сложилась и в российских субтропиках по культуре чая, происходит сокращение площадей под чайными насаждениями. Метод клонального микроразмножения чая в культуре in vitro, благодаря высокому коэффициенту размножения позволит не только сохранить имеющийся генофонд, но и в короткие сроки размножить ценные сорта и формы чая (Andersson, 1980; Высоцкий, 1986;

Таварткиладзе 1990, 1999; Вечернина, 2004) (Рисунок 3).

Микропобеги чая, культивируемые in vitro, могут также служить в качестве модельных систем для изучения генетических, физиологических и др. изменений, происходящих в растительных клетках (Поляков, 2002). В основе метода лежит уникальная способность растительной клетки реализовывать присущую ей тотипотентность, которую открыл ботаник и физиолог Г.И.Ф. Габерланд.

Продолжили исследования – американец Филипп Уайт и француз Роже Готре, показав, что камбиальные ткани древесных растений также способны к каллусогенезу в культуре in vitro.

Признанным пионером этого метода считается французский ученый Жан Морель, который в 50-х Рисунок 3 – Сорт Колхида в культуре in vitro годах прошлого века получил первые растения (Гвасалия, 2014) регенеранты орхидей (Диксон, 1989).

Первые исследования по клональному микроразмножению чая были предприняты Р.Г Бутенко совместно с Н.В Катаевой в ИФР (Катаева, 1981, 1983). Большая работа в этом направлении проводилась и грузинскими учеными, работавшими в Чаквинском филиале ВНПОЧСКиЧП (Кутубидзе, 1988; Вечернина, 1988; Таварткиладзе 1990).

Благодаря тотипотентности, свойственной верхушечной и пазушной меристемной ткани и ярко выраженной пластичности вегетативных тканей и органов растений можно добиться высокой степени воспроизводства растений (Murashige, 1962, 1974, 1976; Хасси,1987; Ajithkumar, 1998; Thomas, При выборе экспланта необходимо учитывать его возраст, 2005).

физиологические и видовые особенности, а также исключить грибковую и бактериальную инфекцию (Тиссера, 1989; Quraishi, 1998; Karthikeyan, 2009).

Следует знать, что способность к размножению детерминирована генетически. Обычно, в качестве эксплантов используют молодые апикальные и латеральные почки, содержащие меристемы роста (Cameiro, 1990; Deshpande, 1998; Diaz, 1999; Vadawale, 2006). Крупные по размеру экспланты обладают большей жизнеспособностью в культуре ткани, однако в их тканях содержится много вирусов и патогенов. Апикальная меристема – идеальный вариант экспланта, при котором вирусная инфекция не успевает проникнуть в активно делящиеся клетки меристемы апекса (Aitken, 1981;

Диксон, 1989; Johnson, 2006). С увеличением пассажей морфогенетический потенциал экспланта повышается, что способствует пролиферации (Вечернина, 1988, 1991; Ghanti, 2004).

Весь процесс клонального микроразмножения чая сводится к 4-м основным этапам:

выбор здорового растения – донора, изолирование эксплантов и получение хорошо растущей стерильной культуры;

пролиферация, микроразмножение и получение максимального количества мериклонов;

укоренение микропобегов, с последующей адаптацией, депонирование при пониженных плюсовых температурах;

доращивание микрорастений в условиях лаборатории и подготовка к высадке в открытый грунт.

I Этап – введение эксплантов чая в стерильную культуру in vitro. Для сохранения способности эксплантов к морфогенезу, необходимо максимально точно подобрать концентрацию и экспозицию стерилизующего агента (Cameiro, 1990; Кутас, 2000). На этом этапе экспериментатор сталкивается не только с экзофитной, но и с эндофитной инфекцией, которая находясь в симбиозе с тканями экспланта, при его изолировании активируется (Arulpragasam, 1986).

Некоторые авторы предлагают культивировать изолированные почки в течение нескольких дней на провокационных средах, стимулирующих проявление скрытой инфекции, а затем повторно проводить поверхностную стерилизацию (Lane, 1979). Однако вследствие агрессивного воздействия дезинфицирующих средств, происходит некроз тканей и гибель эксплантов (Bonga, 1982). Отмечены случаи, когда после 3 – 4х месячного культивирования эксплантов наблюдалось спонтанное развитие микробиальной флоры, которая ранее ингибировалась стероидными гликозидами, природными продуцентами растительных клеток (Бутенко, 1999). Поэтому, для подавления эндофитной инфекции рекомендуется добавлять в питательные среды антибиотики широкого спектра действия (Young,1984; Иддагода, 1990; Ownley, 1992; Arapetyan, 1998). Достаточно часто возникает проблема «сопротивления» эксплантов, когда без видимых на то причин происходит их массовая гибель (Высоцкий, 1986).

Дополнительным барьером в получении стерильной культуры могут служить фенольные соединения. В результате травмы полученной при изолировании экспланта, активируются ферменты, окисляющие фенолы. Продукты окисления фенолов далее ингибируют морфогенез (Вечернина, 1993;

Черевченко, 2008). В этом случае используют антиоксиданты (промывание эксплантов в растворе аскорбиновой кислоты или добавление древесного угля в питательные среды) (Иддагода, 1990). Продолжительность первого этапа составляет 1 – 2 месяца, в процессе которого под действием цитокининов происходит индукция морфогенных структур экспланта.

II Этап – пролиферация и микроразмножение. На этом этапе необходимо добиться получения максимального количества мериклонов. С увеличением субкультивирований, могут появляться мутантные формы, с выраженными изменениями морфологических признаков (Orton, 1987). Для индукции роста используют различные модифицированные минеральные питательные среды по прописям: Мурасиге – Скуга (Murashige, 1962), Гамборга B5 (Gamborg,1968) и WPM (Lloyd, 1980), содержащие биологически активные вещества и регуляторы роста (Amo – Marco, 1994). Источником углеродного питания служат углеводы: сахароза, глюкоза, фруктоза, которые добавляются в питательные среды. Основную роль при подборе оптимальных условий культивирования эксплантов играет соотношение и концентрация внесенных в питательную среду цитокининов и ауксинов. Из цитокининов наиболее часто используют 6 – БАП в концентрациях от 1 до 10 мг/л, а из ауксинов – ИМК, ИУК и НУК в концентрациях 0,5 – 2,0 мг/л (Skoog, 1957; Bhattacharya, 1990; Datta, 1983; DeKlerk, 1997).

Долгое культивирование эксплантов на средах с повышенным содержанием цитокининов (5 – 10 мг/л) способствует их избыточному накоплению, и токсическому действию, приводящему к возникновению растений с измененной морфологией. Кроме этого, высокие дозы цитокининов вызывают витрификацию (оводнение) микропобегов и уменьшают способность растений к укоренению (Вечернина, 2004).

Отрицательное действие цитокининов можно устранить путем чередования циклов культивирования с высоким и низким уровнем фитогормонов (Hartmann, 1975). Состав питательной среды должен тщательно подбираться применительно для каждой культуры и этапа клонального микроразмножения (Кильчевский, 2012).

При культивировании растений могут быть использованы как твердые, так и жидкие питательные среды. Жидкие среды имеют преимущество, поскольку обеспечивают подвижность трофических элементов. В некоторых случаях успешным бывает культивирование микропобегов на двухслойной питательной среде: нижний слой – агаризованный, верхний – жидкий (Диксон, 1989).

На освещение и газообмен в культуральных сосудах влияет соотношение размера экспланта и объем питательной среды (Debergh, 1983).

К физическим факторам культивирования относятся – температура и условия освещения. Высокая интенсивность света может вызывать хлорозы и задерживать морфогенез. Спектральный состав также играет немаловажную роль. Некоторые исследователи (Катаева, 1981) указывают на синий свет, как основной компонент морфогенеза. Температура культивирования обычно варьирует в интервале 22 – 26 оС днем и 18 – 22 оС ночью. Относительная влажность воздуха 65 – 70 %. В некоторых случаях понижение температуры ведет к повышению эффективности размножения. Для повышения коэффициента размножения необходимо каждому виду, с учетом его естественного ареала произрастания, подбирать индивидуальные условия культивирования.

На III и IVэтапах – происходит укоренение микропобегов и адаптация к условиям ex vitro. Это ответственный процесс, от которого зависит успех всего цикла микроразмножения (Kubalakova, 1988; Вечернина, 2001). Как правило, на третьем этапе меняют основной состав питательной среды:

уменьшают в два, а иногда и в три раза концентрацию минеральных солей, углеводов, полностью исключают цитокинины. Для стимуляции ризогенеза оставляют одни ауксины: 3 – индолилмасляную кислоту (ИМК), индолил 3 – уксусную кислоту (ИУК) или 1 – нафтилуксусную кислоту (НУК) (DeRijck, 1998).

Укоренение микропобегов обычно проводят двумя способами:

1) выдерживают микропобеги в течение 2 – 24 часов в стерильном растворе ауксина (20 – 50 мг/л) и далее культивируют на агаризованной питательной среде, без гормонов или непосредственно в подходящем почвенном субстрате;

2) культивируют микропобеги в течение 3 – 4 недель на питательной среде, содержащей ауксины в невысоких концентрациях (1,0 –5,0 мг/л). Для индукции корнеобразования затеняют нижнюю часть культуральных сосудов черным материалом или добавляют в питательную среду активированный древесный уголь. Благоприятным временем для адаптации является – весна или начало лета.

Перед адаптацией, корни микрорастений отмывают от остатков агара, и высаживают микрорастения чая в перлит или вермикулит. После пересаживают в пикировочные горшочки с чаепригодной почвой и помещают в условия с регулируемым температурным режимом (20 – 22 °С), освещенностью 5 тыс. лк и влажностью 65 – 90 %. Регулярно проводится полив, а через 20 – 30 дней после посадки, растения подкармливают растворами минеральных солей Мурасига – Скуга (Murashige, 1962) или комплексным минеральным удобрением. По мере роста растений их рассаживают в большие емкости (Диксон, 1989). Нередко после посадки в почву, наблюдается угнетение роста, опадение листьев и гибель растений.

Это связано с нарушением деятельности устьичного аппарата, вследствие чего происходит потеря воды. Для предотвращения обезвоживания листья растений опрыскивают 50 % водным раствором глицерина или смесью парафина, или жира в диэтиловом эфире (1:1). Этот метод сокращает период закаливания пробирочных растений и обеспечивает их 100 % приживаемость (Диксон, 1989).

Ученые ИФР (Катаева, 1983) выделяют два принципиально различных типа клонального микроразмножения: 1 – активация уже существующих в растении меристем (апекс стебля, пазушные и спящие почки стебля);

2 – индукция почек или эмбриоидов de novo (образование адвентивных побегов непосредственно тканями экспланта; индукция соматического эмбриогенеза; дифференциация адвентивных почек в первичной и пересадочной каллусной ткани.

Основной метод, использующийся при клональном микроразмножении растений – активация существующих в растении меристем. Он основан на снятии апикального доминирования.

Достигается это двумя путями: а) удалением верхушечной меристемы, с последующим микрочеренкованием побега на безгормональной среде; б) добавлением в питательную среду цитокининов, индуцирующих развитие многочисленных пазушных побегов. Полученные таким образом побеги отделяют от первичного экспланта, и вновь самостоятельно культивируют на свежеприготовленной питательной среде, стимулирующей пролиферацию пазушных меристем и возникновение побегов более высоких порядков.

Образующиеся пучки побегов делят, либо черенкуют дальше. После нескольких пассажей, добавляя в питательную среду ауксины, побеги укореняют in vitro (Катаева, 1983) (Рисунок 4).

Существует много методов клонального микроразмножения, а также различных их классификаций. Согласно классификации, предложенной Мурасиге, (Murashige, 1976) он состоит из: активации пазушных меристем; образования адвентивных побегов тканями экспланта; пролиферации Рисунок 4 – Схема размножения растений методом активации адвентивных побегов в каллусе; индукции существующих меристем: 1 – путем соматического эмбриогенеза в клетках удаления верхушечной меристемы; 2

– добавлением цитокининов в среду экспланта; соматического эмбриогенеза в (б/г – среда без гормонов, Ц – цитокинин, А – ауксин) каллусной ткани.

Использование метода клонального микроразмножения способствует эффективности селекционной работы, ускоряет в 2 раза процесс создания нового сорт (Binsfeld, 2000). Например, можно получить сомаклоны из базального каллуса экспланта, содержащего многочисленные меристематические очаги (Larkin, 1981; Barwale, 1987; Morrison, 1988).



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |
Похожие работы:

«Постольник Юлия Александровна Формирование профессиональных компетенций студенток на занятиях плаванием средствами водных видов спорта Шифр специальности 13.00.04 – Теория и методика физического воспитания,спортивной тренировки, оздоровительной и адаптивной физической культуры...»

«ИЗ ФОНДОВ РОССИЙСКОЙ ГОСУДАРСТВЕННОЙ БИБЛИОТЕКИ Алексеева, Анастасия Олеговна Новые интерактивные медиа в контексте теорий информационного общества Москва Российская государственная библиотека diss.rsl.ru Алексеева, Анастасия Олеговна.    Новые интерактивные медиа в контексте теорий информационного общества  [Электронный ресурс] : дис.. канд. филол. наук : 10.01.10. ­ М.: РГБ, 2007. ­ (Из фондов Российской Государственной Библиотеки). Культура. Наука. Просвещение ­­ Телевидение ­­ Теория и...»

«Слепцова Галина Николаевна Формирование межкультурной компетентности бакалавров-педагогов средствами иностранного языка (на примере Республики Саха (Якутия)) Специальность 13.00.01 Общая педагогика, история педагогики и образования ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научный руководитель: доктор педагогических наук, профессор Неустроев Николай Дмитриевич Якутск...»

«ЕГОРЫЧЕВА Элина Викторовна ТЕХНОЛОГИЯ ПРИМЕНЕНИЯ СРЕДСТВ ОЗДОРОВИТЕЛЬНОЙ ФИЗИЧЕСКОЙ КУЛЬТУРЫ НА ЗАНЯТИЯХ СО СТУДЕНТКАМИ СПЕЦИАЛЬНОГО УЧЕБНОГО ОТДЕЛЕНИЯ 13.00.04 – «Теория и методика физического воспитания, спортивной тренировки, оздоровительной и адаптивной физической культуры» ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научный руководитель доктор биологических наук, профессор А.Д....»









 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.