WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |

«Биологически активные метаболиты факультативных морских грибов, выделенных из грунтов дальневосточных морей ...»

-- [ Страница 1 ] --

Федеральное государственное бюджетное учреждение наук

и

Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова

Дальневосточного отделения Российской академии наук

На правах рукописи

Юрченко Антон Николаевич

Биологически активные метаболиты факультативных морских грибов,

выделенных из грунтов дальневосточных морей

02.00.10 – биоорганическая химия

Диссертация на соискание ученой

степени кандидата химических наук



Научные руководители:

к.х.н. Афиятуллов Ш.Ш.

с.н.с., д.х.н. Калиновский А.И.

Владивосток – 2014

СОДЕРЖАНИЕ

1. ВВЕДЕНИЕ

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

2.1. Биологически активные соединения морских грибов

2.2. Жирные кислоты и их производные

2.3. Терпеноиды

2.4. Поликетиды и производные шикимовой кислоты

2.5. Меротерпеноиды

2.6. Алкалоиды

2.7. Пептиды

2.8. Некоторые заключения

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

3.1. Скрининг

3.2. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Isaria felina КММ 4639

3.3. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Aspergillus carneus

3.4. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Myceliophthora lutea

3.5. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Aspergillus versicolor КММ 4647

3.6. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Curvularia inaequalis

3.7 Установление строения индивидуальных соединений из гриба Wardomyces inflatus

3.8. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Penicillium citrinum

3.9. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Acremonium roseum

3.10 Биологическая активность выделенных соединений

4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

4.1. Приборы и оборудование

4.2. Хроматография

4.3. Биологический материал

4.4. Выделение соединений из гриба Isaria felina KMM 4639

4.5. Выделение соединений из гриба Aspergillus carneus

4.6. Выделение соединений из гриба Myceliophthora lutea

4.7. Выделение соединений из гриба Aspergillus versicolor КММ 4647............... 141 

4.8. Выделение соединений из гриба Curvularia inaequalis

4.9. Выделение соединений из гриба Wardomyces inflatus

4.10. Выделение соединений из гриба Penicillium citrinum

4.11. Выделение соединений из гриба Acremonium roseum

4.12. Определение биологической активности выделенных соединений............ 148  4.12.1. Определение цитотоксической активности и действия на формирование и рост колоний опухолевых клеток T-47D, SK-Mel-5, SK-Mel-28, THP-1 и HL-60

4.12.2. Определение цитотоксической активности и способности усиливать экспрессию белка Hsp70 в клетках асцитной карциномы Эрлиха

4.12.3. Определение цитотоксической активности в отношении спленоцитов мышей

4.12.4. Определение гемолитической активности в отношении эритроцитов мышей

4.12.5. Определение антимикробной активности

4.12.6. Определение токсичности в отношении сперматозоидов морских ежей

4.12.7. Определение токсичности в отношении оплодотворенных яйцеклеток морских ежей

5. ВЫВОДЫ

6. СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Исследование метаболитов микроскопических грибов оказало существенное влияние на развитие химии и медицины. После открытия пенициллина в 1929 году началось интенсивное изучение наземных микроскопических грибов, которые оказались богатыми источниками биологически активных соединений. За 70 с лишним лет было исследовано более 100 тысяч метаболитов из этих микроорганизмов. Более 10 тысяч из них были биологически активными и более восьми тысяч проявляли антибиотические и антиопухолевые свойства. Хотя исследования наземных грибов интенсивно продолжаются и в настоящее время, число новых метаболитов, выделяемых из них, снижается, так как около 90% культур синтезируют уже известные соединения. Поэтому закономерен интерес к изучению метаболитов грибов из других мест обитания, в том числе и из морских. Несмотря на то, что изучение морских грибов как источников биологически активных соединений было начато еще в 50-х годах прошлого столетия, они остаются еще мало изученными объектами по сравнению с наземными экоформами.





Физические факторы, воздействующие на морские грибы – высокое содержание ионов натрия, низкие температуры, олиготрофный тип питания, высокое гидростатическое давление – обуславливают способность морских грибов к синтезу необычных по структуре метаболитов с разнообразной биологической активностью. Так, из морских грибов были выделены уникальные по структуре биологически активные соединения, которые не были обнаружены у наземных экоформ, несмотря на более чем 70-летнюю историю таких исследований. К таким соединениям относятся большое количество хлорсодержащих метаболитов, макролиды и пептиды с высокой антивирусной активностью. Среди морских грибов были найдены продуценты соединений с фермент-ингибирующей, противовоспалительной, антифунгальной и антибактериальной активностью, в том числе в отношении лекарственно-устойчивых штаммов бактерий. Целый ряд метаболитов морских грибов находятся в настоящее время на различных стадиях клинических испытаний как потенциальные противоопухолевые препараты.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы являлось выделение и установление строения вторичных метаболитов факультативных морских грибов, изолированных из образцов грунта, собранных в Охотском и Южно-Китайском морях.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1) провести отбор новых перспективных грибов-продуцентов, выделенных из образцов грунта, собранных в Охотском и Южно-Китайском морях;

2) выделить индивидуальные природные соединения из экстрактов изолятов отобранных грибов;

3) установить строение новых метаболитов и идентифицировать ранее известные соединения;

4) исследовать биологическую активность выделенных соединений.

Научная новизна и практическая ценность работы. Из экстрактов восьми штаммов морских грибов, выделенных из образцов грунта, собранных в Охотском и Южно-Китайском морях (Isaria felina, Aspergillus carneus, Myceliophthora lutea, A. versicolor, Curvularia inaequalis, Wardomyces inflatus, Penicillium citrinum и Acremonium roseum) в результате хроматографического разделения были выделены 40 индивидуальных соединений различной химической природы. При помощи спектральных методов анализа и химических превращений установлено строение 18 новых соединений: десяти хроменов, двух бензопиранов, двух пирановых поликетидов, одного фенольного поликетида, одного дифенилового эфира, одного меротерпеноида, одного изопреноида. Идентифицированы структуры 22 ранее описанных соединений. Установлено строение двух спироциклических артефактных продуктов хроматографического разделения экстракта Myceliophthora lutea.

Впервые исследована цитотоксическая активность и влияние на рост колоний опухолевых клеток ряда метаболитов морских грибов. Впервые изучена способность некоторых грибных метаболитов индуцировать экспрессию белка теплового шока Hsp70.

Практическое значение данного исследования состоит в развитии методов выделения и установления строения новых природных низкомолекулярных метаболитов из морских грибов.

Положения, выносимые на защиту.

1) Морские грибы Isaria felina KMM 4639, Aspergillus carneus, Myceliophthora lutea, A. versicolor и Curvularia inaequalis являются богатыми источниками хроменов, бензофурановых и пирановых поликетидов и меротерпеноидов.

2) В морском грибе Isaria felina найдены новые высокоокисленные хромены оксирапентины B–J с редкой для природных соединений метилбутенинильной боковой цепью, а также новые пирановые поликетиды исарикетиды A и B.

3) Предложена возможная схема биосинтеза всех новых метаболитов гриба I. felina из общего пренилфенольного предшественника.

4) В экстракте гриба A. carneus обнаружены новые поликетиды варатерпол B и глицерилдиорциновая кислота, а также новое декалиновое производное декумбенон D. Глицерилдиорциновая кислота является первым описанным глицериновым производным орциновых эфиров.

5) В морском грибе Myceliophthora lutea найдено новое бензофурановое производное изоакремин D.

6) В морском грибе A. versicolor обнаружен новый меротерпеноид аспердемин.

Апробация работы. Материалы работы были представлены на XIV Всероссийской молодежной школе-конференции по актуальным проблемам химии и биологии (Владивосток, 2012), IV Annual Russian-Korean Conference «Current Issues of Natural Products Chemistry and Biotechnology» (Новосибирск, 2012), 2nd International workshop on marine bioresources of Vietnam (Ханой, 2013), 2nd International Symposium on Life Sciences (Владивосток, 2013).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ в рецензируемых журналах, рекомендуемых ВАК РФ.

Личный вклад автора в проведение исследования. Автором был выполнен анализ литературных данных по теме исследования, планирование экспериментов, получена основная часть результатов, написаны статьи и сделаны доклады на конференциях. На защиту выненсены только те положения и результаты, в получении которых роль автора была определяющей.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, литературного обзора, посвященного некоторым классам вторичных метаболитов морских грибов, выделенных из донных осадков, обсуждения результатов, экспериментальной части, выводов, списка литературы, включающего 228 цитируемых работ.

Работа изложена на 177 страницах, содержит 21 таблицу и 33 рисунка.

Автор выражает глубокую признательность своим научным руководителям к.х.н. Афиятуллову Ш.Ш. и д.х.н. Калиновскому А.И. Также автор благодарит Сметанину О.Ф. за бесценную помощь в работе, д.б.н. Пивкина М.В., к.б.н. Худякову Ю.В., к.б.н. Киричук Н.Н. за наращивание исследованных штаммов грибов и определение антибактериальной активности выделенных соединений, к.х.н. Дмитренка П.С. и Моисеенко О.П. за получение масс-спектров, к.ф.-м.н. Глазунова В.П.

и Ким Н.Ю. за получение ИК и УФ-спектров, к.х.н. Ермакову С.П., к.б.н. Юрченко Е.А., к.х.н. Дышлового С.А. за проведение испытаний биологической активности выделенных нами веществ.

Используемые сокращения:

–  –  –

HRMALDIMS – High Resolution Matrix-Assisted Lazer-Disorbtion/Ionization Mass Spectrometry – масс-спектрометрия с лазерной десорбцией/ионизацией высокого разрешения;

HREIMS – High Resolution Electron Ionization Mass Spectrometry – массспектрометрия с ионизацией электронным ударом высокого разрешения;

EIMS – Electron Ionization Mass Spectrometry – масс-спектрометрия с ионизацией электронным ударом;

HRESIMS – High Resolution Electrospray Ionization Mass Spectrometry – массспектрометрия высокого разрешения с электро-распылительной ионизацией;

ESIMS – Electrospray Ionization Mass Spectrometry – масс-спектрометрия с электрораспылительной ионизацией.

–  –  –

ЯМР – ядерный магнитный резонанс;

с – синглет, д – дублет, дд – дублет дублетов, ддд – дублет дублет дублетов, т – триплет, дт – дублет триплетов, тд – триплет дублетов, к – квартет, кв – квинтет, м

– мультиплет, уш. – уширенный;

COSY – Correlated Spectroscopy – корреляционная спектроскопия;

DEPT – Distortionless Enchancement by Polarization Transfer – неискаженное улучшение переносом поляризации;

HMBC – Heteronuclear Multiple Bond Correlation – гетероядерная корреляция через несколько связей;

HSQC – Heteronuclear Single Quantum Coherence – гетероядерная одноквантовая когерентность;

NOE – Nuclear Overhauser Effect – ядерный эффект Оверхаузера;

NOESY – Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy – двумерная спектроскопия ядерного эффекта Оверхаузера;

ROESY – Rotation-frame Overhauser Effect Spectroscopy – двумерная спектроскопия ядерного эффекта Оверхаузера во вращающейся системе координат;

ДМСО-d6 – дейтерированный диметилсульфоксид;

ТМС – тетраметилсилан.

Другие сокращения:

УФ-спектроскопия – спектроскопия в ультрафиолетовой (УФ) области электромагнитного спектра;

ИК-спектроскопия – спектроскопия в инфракрасных лучах;

РСА – рентгеноструктурный анализ;

(R)-MTPA-Cl – (R)--methoxy--(triflouromethyl) phenyl acetyl chloride – хлорангидрид (R)--метокси--(трифторметил)фенилуксусной кислоты

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

2.1. Биологически активные соединения морских грибов Несмотря на то, что первый антибиотик из морских грибов, цефалоспорин C, был выделен еще в 1949 году, исследования грибов из морских сред обитания до 90-х годов прошлого века практически не велись – к 1990 году было выделено всего 12 новых метаболитов. Многократное увеличение интенсивности исследований морских грибных метаболитов произошло в начале 2000-х годов (рис. 1).

Количествово метаболитов 1970- 1990- 2000- 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 20

–  –  –

На ранних этапах исследования морских грибов более 50% новых соединений было выделено из грибов, ассоциированных с губками и водорослями (рис.

2А). В последние годы все большую роль в качестве продуцентов новых биоактивных метаболитов начинают играть грибы морских грунтов. За последние 10 лет доля новых метаболитов из грибов этой экологической группы выросла в пять раз, достигнув 20% от общего количества выделенных новых метаболитов (рис. 2Б).

–  –  –

Особенности среды обитания морских грибов-микромицетов делают их весьма перспективными источниками биоактивных веществ. Хотя к настоящему моменту цефалоспорин C остается единственным соединением из морского гриба, производные которого используются в медицинской практике, современные интенсивные исследования метаболитов морских грибов выявляют все большее количество потенциальных лидерных молекул для разработки новых лекарственных препаратов [12]. Так, дикетопиперазин фенилахистин (1) (более известный как халимид), выделенный около 20 лет назад из Aspergillus ustus, ассоциированного с морской водорослью, стал предшественником для синтетического производного плинабулина [13]. Плинабулин успешно прошел 1 и 2 фазы клинических испытаний в качестве ингибитора образования микротрубочек в опухолевых клетках при терапии немелкоклеточного рака легких человека [14-15]. Синтетические производные пентадепсипептида сансальвамида A (2) из Fusarium sp. (морская трава Halodule wrightii) эффективно взаимодействуют с белком теплового шока Hsp90 и имеют потенциал противоопухолевых агентов [16-17]. Сорбициллактон A (3) (Penicillium chrisogenum, губка Ircinia fasculata) проявляет высокоселективные противолейкемические свойства, а также противовирусный эффект в отношении ВИЧ, что открывает перспективы использования его в противолейкемической и анти-ВИЧ терапии [18-19].

В настоящем обзоре описаны новые метаболиты грибов, изолированных из морских грунтов, впервые описанные в период с 2005 по 2013 гг. Все метаболиты разделены на шесть классов: жирные кислоты и их производные, терпеноиды, поликетиды и производные шикиматного пути биосинтеза, меротерпеноиды, алкалоиды и пептиды.

2.2. Жирные кислоты и их производные Новые метаболиты данной группы из морских грибов в последние годы практически не выделялись. Для грибов морских грунтов единственным примером является галотолерантный штамм Alternaria raphani, изолированный из образца грунта в районе Гондао (Желтое море, Китай). Гриб продуцировал три новых цереброзида 4-6, для которых была показана слабая антимикробная активность [20].

–  –  –

Соединения, являющиеся продуктами исключительно изопреноидного пути биосинтеза, также не слишком распространены среди грибов морских аквапочв. За последние девять лет было выделено менее двух десятков подобных соединений.

Два сесквитерпеноида эремофиланового типа (7–8) продуцировались грибом Penicillium sp., выделенным из морского ила в Беринговом море [21]. Соединение 8 является ацетатом известного грибного метаболита спорогена AO-1 и ранее было получено синтетически для установления его структуры [22]. Цитотоксичность соединения 8 в отношении опухолевых клеток линий P388, A-549, HL-60 и BEL-7402 оказалась на три и более порядков выше, чем у неэпоксидированного аналога 7. На основании этого факта авторы работы предположили важную роль эпоксидного кольца в проявлении биологической активности эремофиланов [21].

–  –  –

Новое декалиновое производное декумбенон C (11) было выделено из охотоморского гриба Aspergillus sulfureus [25]. Авторами показано сильное цитотоксическое действие соединения 11 в отношении клеток меланомы человека SK-Mel-5, а также ингибирование пролиферации и образования колоний этой же клеточной линии на 62 и 76%, соответственно.

Декумбенон C под названием кратереллон C был параллельно выделен китайской группой из съедобного базидиомицета Craterellus odoratus [26].

Изолят Penicillium sp., выделенный из образца океанического глубоководного (5080 м) грунта, продуцировал дитерпены конидиогеноны B–G (12–17) [27]. Соединения 12–17 структурно родственны метаболитам наземного штамма Penicillium cyclopium конидиогенолу и конидиогенону, обладающих конидиогенезиндуцирующей активностью [28]. Конидиогенон С (13) показал сильное цитотоксическое действие на клетки HL-60 и BEL-7402 (ИК50 0.038 мкМ и 0.970 мкМ, со

–  –  –

12 R1 = R2 = R3 = H 15 R1 = OH, R2= R3 = H 16 R1 = R3 = H, R2 = OH 17 R1 = R2 = H, R3 = OH Окисленные пимарановые дитерпеноиды скопарараны C-G (18–22) были выделены из гриба Eutypella scoparia, изолированного из донных осадков ЮжноКитайского моря [29]. Интересно отметить, что несмотря на большое структурное сходство с соединениями 18 и 20, только скопараран D (19) проявил цитотоксичность в отношении клеток MCF-7, SF-268 и NCI-H460 в концентрациях от 25 до 46 мкМ. Остальные соединения были практически не токсичны. Скопараран С (18) также параллельно был выделен другой китайской группой из гриба Epicoccum sp., ассоциированного с трепангом Apostichopus japonicus [30]. Повторное исследование Eutypella scoparia привело к выделению моноциклофарнезанового сесквитерпеноида 23 и акоранового сесквитерпена 24 [31].

–  –  –

Из баротолерантного гриба Penicillium sp., изолированного из грунта отобранного на глубине около 5 км в восточной части Тихого океана, выделен высокоокисленный стероид стероловая кислота (25), структура которой была определена при помощи рентгеноструктурного анализа [32].

O

–  –  –

2.4. Поликетиды и производные шикимовой кислоты Ацетатный (поликетидный) и шикиматный пути биосинтеза являются главными способами образования ароматических соединений, как в грибах, так и в других организмах. Такие соединения и неароматические вещества поликетидной природы составляют около половины всех грибных метаболитов.

Одними из самых часто встречающихся грибных поликетидов являются производные простейшего тетракетида орселлиновой кислоты (26), а также ее декарбоксилированного аналога орцина (в западной литературе – орцинола). Так, новое пренилированное производное димерного орцина авадзаноран (27) продуцировалось грибом Acremonium sp., выделенным из образца морского ила, собранного у японского острова Авадзисима [33]. Соединение 27 проявило слабую цитотоксичность в отношении клеток A-549 (аденокарцинома легких человека), а также антимикробную активность в отношении целого ряда грамположительных бактерий и дрожжей Candida albicans. Авадзаноран является одним из многих примеров образования бензофуранового скелета путем циклизации пренилированных ароматических предшественников [34].

–  –  –

Гриб A. candidus, выделенный из донных осадков бухты Гокасио (Япония), продуцировал ряд новых ароматических соединений 32–34. Все выделенные метаболиты оказались токсичны в отношении клеток KB3-1 эпидермальной карциномы человека (ИК50 8.5, 3.0 и 2.5 мкг/мл, соответственно). Вещества 32–34 – аналоги терфениллина и терпенина, известных метаболитов наземных изолятов A. candidus [36].

Новый 4-эпи-изомер известного производного гентизилового спирта KD16-U1 (35) был выделен из охотоморского изолята A. varians (залив Анива, о. Сахалин).

Соединение 35 проявило эмбриотоксичность и спермотоксичность в отношении морского ежа Strongylocentrotus intermedius [37].

Диметил-2,3'-диметилозоат (36), простейший димер производных порселлиновой и 2,3,5-тригидроксибензойной кислот, был выделен из неидентифицированного гриба рода Aspergillus, изолированного из донных осадков, собранных в бухте Бехай (Китай) [38]. На примере соединения 36 впервые для дифениловых эфиров было показано ингибирование S-фазы клеточного цикла клеток K462.

Гриб A. versicilor, выделенный из ила в районе Циндао (Желтое море, Китай), продуцировал четыре новых производных монопренилированного диорцина – диорцинолы B–E (37–40) [39]. Диорцинол D (39) проявил цитотоксичность в отношении клеток HeLa и K562 в концентрации ИК50 31.5 и 48.9 мкМ, соответственно, а соединение 40 оказалось токсичным для клеток HeLa при ИК50 36.5 мкМ. Диорцинолы B и C, а также сам диорцин не проявили цитотоксичности в отношении исследованных клеточных линий.

Новый террелактон A (41) был выделен из A. terreus, изолированного из образца грунта с повышенной соленостью (20 %), собранного в бухте Путянь (Тайваньский пролив) [40]. Соединение не показало ингибирования роста как бактерий (Enterobacter aerogenes, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus), так и дрожжей Candida albicans в концентрации до 100 мкМ.

–  –  –

Новые поликетиды протулактоны A (42) и B (43) были выделены из гриба Aspergillus sp., изолированного из литорального образца грунта, собранного в Корейском проливе в районе Пусана (Южная Корея). Соединения с подобным скелетом ранее не были описаны для грибов рода Aspergillus [41].

Гриб Aspergillus sp., выделенный из образца грунта, собранного у города Сямынь (Тайваньский пролив, Китай), продуцировал три новых ароматических метаболита – барселоновый лактон B (44), барселоновую кислоту C (45) и 5'гидроксихлофлавонин (46) [42]. Дальнейшие исследования позволили выделить из него два ароматических метаболита – терфиловую кислоту (47) и терфиловую дикислоту (48) [43].

–  –  –

Из гриба A. versicolor, изолированного из глубоководного образца грунта (Тихий океан, место не указано), были выделены оксистеригматоцистины A–C (49– 51), новые метоксилированные производные микотоксина стеригматоцистина [44].

Ни одно из новых соединений не проявило цитотоксичности в отношении клеток аденокарциномы легких и лейкемии человека в отличие от известного производного 52, имеющего неизмененное в сравнении со стеригматоцистином дигидрофурановое кольцо. Эти данные, согласуясь с ранее опубликованной работой [45], позволяют утверждать о ключевой роли дигидрофуранового цикла в проявлении активности стеригматоцистином и его производными.

–  –  –

Два новых димерных нафто--пирона 8'-O-диметилнигерон (63) и 8'-Oдиметилизонигерон (64) были выделены наряду с девятью известными нафто-пиронами из культуральной жидкости гриба A. carbonarius, полученного из донных осадков, собранных в заливе Бакбо у о. Вэйчжоу (Южно-Китайское море) [47]. Оба новых соединения проявили слабую антимикробную активность в отношении Mycobacterium tuberculosis.

–  –  –

Гриб Hypocrea vinosa, выделенный из песка, собранного в супралиторальной зоне у побережья о. Окинава (Япония), продуцировал бис-нафто--пироны гипохромины A (65) и B (66), а также соединение SC2051 (67), известный ингибитор фосфодиэстеразы, которое ранее было описано лишь в патенте [48]. Все выделенные соединения ингибировали активность тирозинкиназы, пролиферацию, миграцию и формирование микротрубочек в клетках HUVEC (эндотелиальные клетки пупочной вены человека). На основании полученных данных авторы предполагают, что выделенные метаболиты блокируют сайты фосфорилирования KDR тирозинкиназы, которая индуцирует митогенез и дифференциацию опухолевых тканей.

Из гриба Emericella variecolor, изолированного из донных осадков бухты Гокасио (Япония) были выделены стереоизомерные поликетиды шималактоны A (68) и B (69). Углеродный скелет шималактонов необычен содержанием двух бициклических систем – бицикло[4.2.0]октадиеновой и оксабицикло[2.2.1]гептановой. Абсолютная конфигурация шималактонов установлена комбинацией рентгеноструктурного анализа и спектроскопии КД их производных. Оба соединения индуцировали нейритогенез клеток нейробластомы Neuro 2A в концентрации в два раза ниже цитотоксической [49-50].

Два тетракетидных метаболита с изохроменовым (70) и хроменовым (71) скелетом были выделены при дополнительном исследовании штамма Eutypella scoparia, ранее продуцировавшего дитерпеноиды 18–22 [51].

–  –  –

Гриб Massarina sp., выделенный из образца морского ила, собранного у побережья островов Палау, продуцировал спиромассаритон (72) и массарифенон (73) [52]. Спиромассаритон является стереоизомером соединения V214w, выделенного ранее из неидентифицированного почвенного гриба [53]. Биосинтез подобных соединений был исследован в 1992 году на примере артропсолида A, для которого предположено образование из пентакетидного предшественника и яблочной кислоты [54].

Новый пироновый поликетид ацетат веррукозидинола (74) был выделен из гриба Penicillium aurantiogriseum, изолированного из образца ила, собранного в Бохайском заливе Желтого моря (Китай) [55]. Авторами также был описан в качестве нового соединения веррукозидинол (75), который ранее был синтезирован японскими исследователями в рамках работы по синтезу широко распространенных пеницилловых микотоксинов веррукозидина и цитреовиридина [56].

–  –  –

Фталидный тетракетид 6,7-дигидрокси-3-метил-3-метоксифталид (79) был выделен из гриба P. pinophilum, изолированного из донных осадков, собранных в эстуарии реки Чжуцзян (Южно-Китайское море, Китай) [59]. Соединение проявило токсичность в отношении креветок Artemia salina в концентрации ИК50 11.2 мкМ.

–  –  –

Южнокорейский штамм Penicillium sp., продуцировал необычный высокоокисленный нафтохиноновый поликетид херквеидикеталь (80) [60]. Соединение проявило умеренную цитотоксичность в отношении карциномы легких человека (ИК50 17.0 мкМ), а также в пять раз более высокую фермент-ингибирующую активность в отношении сортазы A из Staphylococcus aureus по сравнению с известным ингибитором этого фермента п-гидроксимеркурибензойной кислотой (ИК50

23.6 и 116.2 мкМ, соответственно).

Производные микофеноловой кислоты пеникациды A-C (81–83) были выделены из гриба Penicillium sp. (грунт, Южно-Китайское море, Китай) [61]. Соединение 81 умеренно ингибировало пролиферацию мышиных спленоцитов, тогда как пеникацид B (82) в концентрации ИК50 6.43 мкМ ингибировал инозинмонофосфат дегидрогеназу – фармакологическую мишень для иммуносупрессоров – производных микофеноловой кислоты.

Три новых цитрининовых производных, пеницитринолы C–E (84–86) были выделены из гриба P. citrinum, изолированного из донных осадков, собранных в Восточно-Китайском море у острова Ланкви (Китай) [62]. Абсолютные конфигурации всех стереоцентров выделенных соединений установлены на основании комбинации данных РСА и биогенетической связи с цитринином. Дальнейшие исследования экстракта этого гриба позволили выделить еще четыре пеницитринола F–I (87–90) [63], а также цитринацеталь (91) [64]. Любопытно, что в работе, опубликованной позднее, названия пеницитринолы F–H были даны другим, хотя и структурно близким, соединениям из наземного изолята P. citrinum [65]. Широко известный микотоксин цитринин и его производные являются обычными продуктами метаболизма грибов рода Penicillium (в особенности P. citrinum). Среди производных цитринина известно большое количество как простейших (подобно соединению 84), так и димерных и тримерных производных [65-68]. Тем не менее трициклические производные подобные пеницитринолам D–I (85–90) и цитринацеталю (91) практически не выделялись [62, 68].

–  –  –

При культивировании на картофельно-декстрозном агаре вместо рисовой питательной среды штамм P. commune, источник эремофилана 9, продуцировал шесть новых азафилоновых пигментов, комазафилоны A–F (92–97) [69]. Соединения 94– 96 проявили умеренную антимикробную активность в отношении ряда бактерий, при этом остальные комазафилоны были в два и более раз менее активны, что может свидетельствовать о большом значении двойной связи в боковой цепи. В свою очередь комазафилоны A–C (92–94) оказались токсичны в отношении клеток линии SW1990 (рак поджелудочной железы человека) в более низких концентрациях чем фторурацил, широко используемый в терапии этого заболевания. Другие три соединения не проявили значимой активности в этом тесте, что говорит о значительном влиянии положения остатка орселлиновой кислоты на проявление цитотоксичности к этому типу клеток.

Пенилактоны A (98) и B (99) были выделены из гриба P. crustosum, изолированного из глубоководного грунта, собранного в заливе Прюдс (Антарктида) [70].

Абсолютные конфигурации соединений были определены комбинацией методов РСА и КД-спектроскопии.

–  –  –

Пеницираистины A–D (100–103), гептакетидные метаболиты спирокетальной и изокумариновой природы, были выделены из гриба P. raistrickii (грунт, побережье Бохайского залива, Китай) [71-72]. Соединение 102 проявило цитотоксичность в отношении опухолевых клеток A549 и MCF-7 (ИК50 3.2 и 7.6 мкм, соответственно).

<

–  –  –

Трициклические поликетиды пенициллоны A (104) и B (105) [73], бензохиноновые производные 106 и 107, а также бисорбициллиноиды 108–112 [74-75], были выделены из гриба P. terrestre (залив Цзяочжоу, Китай). Стоит отметить, что это первый описанный случай выделения триходимерола 110 из морских источников.

Авторами было показано, что ди- и тетрагидропроизводные 111 и 112 подобно самому триходимеролу являются токсичными в отношении клеток лейкемии P388 и аденокарциномы A549, при этом активность 112 в отношении клеток A549 сравнима с активностью известного противоопухолевого агента этопозида. В отношении этих же клеточных линий сорбициллиновые производные 108 и 109 проявили антипролиферативную активность.

–  –  –

108 111 насыщена 109 насыщена 112 ' насыщены При культивировании этого штамма на модифицированной питательной среде были выделены девять новых производных гентизилового спирта, в том числе тримерный террестрол A (113), серия димерных производных – террестролов B–H (114–120) и мономерное производное 121 [76]. Наибольшую биологическую активность проявил террестрол G (119), который показал цитотоксичность в отношении всех исследованных клеточных линий (HL-60, MOLT-4, A-549, BEL-7402) с ИК50 от 5.1 до 6.5 мкМ, проявил антирадикальную активность в отношении 2,2-дифенилпикрилгидразила (ИК50 4.1 мкМ), а также в концентрации 10 мкМ ингибировал активность тирозинкиназ (Src и KDR) на 36 и 32 %, соответственно.

–  –  –

Последующие исследования этого изолята P.

terrestre, также культивированного на модифицированной среде, привели к выделению новых хлорированных соединений сорбициллиновой природы, хлоктанспиронов A (122) и B (123), а также их возможных предшественников террестролов K (124) и L (125) [77]. Соединения 122–125 содержат в структурах молекул спироциклогексеновые фрагменты и атомы галогенов, ранее не обнаруженные для сорбициллиноидов. Хлоктанспироны 122 и 123 показали цитотоксичность в отношении клеток HL-60 (ИК50 9.2 и 37.8 мкМ, соответственно), хлоктанспирон A (122) также был токсичен в отношении клеток A-549 (ИК50 39.7 мкМ).

–  –  –

Сорбициллиноидное производное сорбитеррин A (126) с уникальной для этого класса соединений [3,3,1]-циклической системой был выделен из гриба Penicillium terrestre (залив Цзяочжоу, Желтое море, Китай). Соединение проявило

–  –  –

130 ( -насыщена) Гриб Phialocephala sp., выделенный из образца глубоководного грунта, собранного в Тихом океане с глубины 5059 м, синтезировал оксосорбихинол (129) и его производное дигидрооксосорбихинол (130). Оба соединения были исследованы на цитотоксичность в отношении ряда опухолевых клеточных линий и наибольшую активность проявили в отношении клеток HL-60 с ИК50 8.9 и 10.5 мкМ, соответственно [80]. Бисорбициллиноиды, часто выделяемые из морских грибов, биосинтетически чаще всего образуются путем Дильс-Альдеровского циклоприсоединения двух гексациклических колец сорбицилловых производных. Соединения 129 и 130 являются примерами необычного присоединения гексациклического кольца (диен) к сорбильной боковой цепи (диенофил). Первым и единственным ранее описанным случаем выделения подобного аддукта является сорбихинол (131), выделенный из наземного гриба Trichoderma longibrachiatum [81].

Дальнейшие исследования глубоководного изолята Phialocephala sp. позволили выделить первые тримеры сорбициллина – трисорбициллиноны A–D (132–135), являющиеся продуктами уникального сочетания двух сорбициллинольных и одной оксосорбициллинольной единиц. Трисорбициллинон A (132) проявил цитотоксическую активность в отношении клеток P388 и HL-60 (ИК50 9.1 и 3.1 мкМ, соответственно) [82-83].

OH O

–  –  –

Результатом последних работ с этим же микроорганизмом стало выделение еще трех новых соединений: сорбициллинового димера дигидротриходермолида (136), дигидродеметилсорбициллина (137) и бензофуранового производного фиалофурона (138). Соединения 137 и 138 показали сильный цитотоксический эффект в отношении клеточной линии P388 с ИК50 0.1 и 0.2 мкМ, соответственно [84].

–  –  –

Сорбициллиноид 6-диметилсорбициллин (139) и бисорбициллиноид 10,11дигидробисвертинолон (140) были выделены из гриба Trichoderma sp., выделенного из грунта, собранного в Тайваньском проливе у побережья китайской провинции Фуцзянь [85]. Оба соединения проявили цитотоксическую активность в отношении клеток HL-60 (ИК50 23.9 и 49.0 мкМ, соответственно).

Другой представитель триходерм – T. reesei, выделенный из ила литоральной зоны Желтого моря (Китай), продуцировал новые поликетидные метаболиты трихотерматиды A–D (141–144) [86]. Триходерматид A (141) – первый пример пентациклического поликетида с кетальной группой. Октакетиды с редким бициклическим сопряжением,-ненасыщенного циклогексенонового и пиранового колец описаны только для грибов рода Trichoderma. Подобный скелет ранее был известен у нескольких метаболитов наземного гриба T. harzianum [87-88].

Из гриба Trichoderma koningii, изолированного из образца ила из ЮжноКитайского моря, был получен 7-O-метилконингинин D (145), а также триходермакетоны A-С (146–148) [89]. Триходермакетон А (125 мкг/мл) с кетоконазалом (0,05

–  –  –

O Новый циклопентенон триходерон (149) синтезировался грибом Trichoderma sp., изолированным из донных осадков в Южно-Китайском море [90]. Соединение проявило цитотоксичность против шести различных опухолевых клеточных линий (A549, NCI-H460, MCF-7, MDA-MB-435s, HeLa, DU-145) с ИК50 от 43 до 164 мкМ, тогда как в эксперименте с нормальными фибробластами легких человека ИК50 была более 7 мМ. Морфологические изменения, произошедшие в клетках A549 при инкубации с триходероном свидетельствовали о возможном апоптотическом механизме цитотоксического действия.

2.5. Меротерпеноиды Пересечение главных путей вторичного метаболизма (мевалонатного, полиацетатного и шикиматного) приводит к меротерпеноидам, соединениям смешанного биогенеза. Меротерпениоды, образованные в результате сочетания терпениодной и поликетидной единиц относят к поликетид-терпеноидным. Неполикетидная группа меротерпеноидов образуется при соединении шикимата и терпена. При этом к меротерпеноидам часто не относят пренилированные ароматические соединения, подобно описанным в предыдущей главе поликетидам 77 и 78 [34, 91].

Три новых меротерпеноида спиродитерпеноидного типа, бревионы F–H (150продуцировались баротолерантным грибом Penicillium sp., который был выделен из грунта собранного на глубине около 5 км в восточной части Тихого океана.

Абсолютная конфигурация соединений 150 и 152 была определена с использованием метода Мошера и подверждена для бревиона H (152) рентгеноструктурным анализом его (S)-MTPA-эфира. Соединение 150 ингибировало репликацию вируса иммунодефицита человека в клетках C8166 (ИК50 14.7 мкМ) [92]. Предлагаемая авторами схема биосинтеза подобных соединений включает присоединение геранилгеранильного фрагмента к триацетатному предшественнику. Несмотря на структурное сходство с бревионами A–E, ранее выделенными из наземного Penicillium brevicompactum [93-94], и с соединениями 150 и 151, бревион H имеет уникальный ранее не описанный скелет, образованный, по-видимому, в результате окислительной циклизации бревиона G (151).

–  –  –

Дриман-содержащие меротерпеноидные метаболиты пурпурогемутантин (157) и пурпурогемутантидин (158) продуцировались штаммом Penicillium purpurogenum, выделенным из грунта, собранного в Бохайском заливе (Китай) и подвергнутым мутагенезу действием диэтилсульфата. Предполагается, что оба соединения биосинтетически образуются из фарнезилированного гентизилового спирта [95]. Соединение 158 проявило цитотоксическую активность против клеток HL-60 и K562 (ИК50 2.5 и 0.9 мкМ). Стоит отметить, что другой группе китайских исследователей при изучении гриба Penicillium sp., изолированного из глубоководного образца грунта в северном районе Южно-Китайского моря, удалось выделить соединение пенициллиумин A с формулой идентичной пурпурогемутантидину (158) [96]. К сожалению, авторы не установили абсолютную структуру пенициллиумина, но отличие в величинах углов удельного оптического вращения для этих соединений может указывать на их стереоизомерность.

2.6. Алкалоиды Одной из особенностей вторичного метаболизма грибов, выделенных из морских грунтов, является биогенез разнообразных азотсодержащих соединений, которые составляют более трети новых соединений из этих грибов, выделенных в последние годы. Большинство из них могут быть отнесены к алкалоидам и дикетопиперазинам.

Глиотоксин (159) – широко известный представитель класса эпиполитиодиоксопиперазиновых грибных метаболитов, обладающий широким спектром биоактивности. Интерес к глиотоксину угас вследствие обнаружения токсичности in vivo, что резко ограничивало его химиотерапевтический потенциал. Однако интенсивность исследований глиотоксина и его аналогов вновь выросла после открытия его селективной токсичности в отношении клеток кроветворной и иммунной систем, а также показана способность вызывать апоптоз нескольких типов клеток (макрофаги, тимоциты, апленоциты и фибробласты) [97-98]. Гриб Aspergillus fumigatus из морских донных осадков бухты Цзяочжоу в Желтом море (Китай) наряду с глиотоксином (159) и рядом известных тиосоединений продуцировал новый аналог глиотоксина (160) [99]. Исследование цитотоксической активности выделенных соединений в отношении клеток мышиной карциномы показало важную роль дисульфидного мостика в обеспечении биоактивности глиотоксина и его аналогов.

–  –  –

Изолят гриба Gliocladium sp. из образца ила, взятого у побережья Желтого моря (Рушан, Китай), продуцировал новые дикетопиперазины глиокладрид (164), а также геометрические изомеры PJ147 (165) и PJ157 (166) [101-102]. Глиокладрин проявил цитотоксическое действие в отношении клеток A375-S2 с ИК50 3.9 мкМ.

Дальнейшее изучение этого грибного штамма привело к выделению Nгидроксилированных глиокладридов A (167) и B (168). Оба соединения проявляли цитотоксичность в отношении раковых клеток линий HL-60 и U937 с ИК50 11.6–

19.9 мкМ, что на порядок выше, чем у соединения 165. Вероятно, решающее значение в уменьшении активности имеет окисление одного из атомов азота [103].

–  –  –

Три новых соединения, п-гидроксифенопиррозин (169) и два эпимерных дикетопиперазина 170 и 171, были выделены из гриба Chromocleista sp., изолированного из образца грунта, собранного в Мексиканском заливе. Абсолютная конфигурация единственного хирального центра 169 была установлена с помощью РСА, а для дикетопиперазинов 170 и 171 – анализом геминальных и вицинальных констант ЯМР JHH и сравнением их с аналогичными соединениями [104].

Еще два новых глиотоксин-подобных дикетопиперазина бис-(детио)-10aметилтио-3a-деокси-3,3a-дигидроглиотоксин (172) и 6-деокси-5a,6-дидегидроглиотоксин (173) синтезировались штаммом Penicillium sp. (грунт, бухта Суруга, Япония) [105]. Оба соединения проявили цитотоксическую активность в отношении клеток P388 (мышиная лейкемия), причем дисульфид-содержащий метаболит оказался почти на два порядка более активен (ИК50 58 нМ), что подтверждает ключевую роль полисульфидного мостика в проявлении цитотоксичности производными глиотоксина.

Дикетопиперазиновый дисульфид деоксиапоаранотин (174) продуцировался грибом Aspergillus versicolor, изолированным из донных осадков, собранных в Японском море у берегов Южной Кореи [106]. Совместно с соединением 174 были выделены ранее не известные для морских организмов ацетилапоаранотин (175) и ацетиларанотин (176) [107]. Все три выделенных соединения, подобно глиотоксину (159), относятся к классу эпиполитиодиоксопиперазинов, которые благодаря своим дисульфидным мостикам могут инактивировать белки и генерировать реактивный кислород [108]. Соединения 174–176 индуцировали апоптоз в клетках HCT116 (рак кишечника человека). Ацетилапоаранотин (175) в опытах in vivo ингибировал рост опухоли HCT116 у мышей, проявив при этом меньшую острую токсичность по сравнению с веществом сравнения цисплатином.

–  –  –

174 R = H 175 R = OAc Структурный аналог соединения 176 альтернарозин A (177) был получен из галотолерантного штамма Alternaria raphani, также продуцировавшего цереброзиды 4–6. Абсолютная конфигурация стереоцентров альтернарозина была определена РСА его ацетатного производного. Алкалоид проявил антимикробную активность в отношении Escherichia coli, Bacillus subtilis и Candida albicans с МИК 203, 203 и 406 мкМ, соответственно [20].

Новые дикетопиперазиновые алкалоиды пренилциклотрипростатин B (178), 9гидроксифумитреморгин C (179), 20-гидроксициклотрипростатин B (180), 6гидрокситрипростатин B (181) и спироглиотоксин (182) были выделены китайскими исследователями в 2012 году из гриба Aspergillus fumigatus, изолированного из ила прибрежной зоны Бохайского залива (Желтое море, Китай) [109]. Соединения 178 и 180 ингибировали рост клеток U937 (моноцитной лимфомы человека) с ИК50

25.3 и 18.2 мкМ. Следует отметить, что 20-гидроксициклотрипростатин B (180) в течение этого же года был опубликован двумя другими китайскими группами как новый метаболит еще двух аспергиллов – циклотрипростатин Е из A. sydowii (горгонария, Хайнань, Китай) [110] и 12-гидрокси-13-метоксиверрукулоген TR-2 из наземного A. fumigatus (кора Melia azedarach) [111].

Гриб Aspergillus versicolor, изолированный из образца донных осадков Бохайского залива (Желтое море, Китай), продуцировал димерный дикетопиперазин бревианамид S (183), а также мономерные бревианамиды T–V (184–186) [112]. Бревианамид S – второй пример выделения димерных дикетопиперазинов после бревианамида J, ранее выделенного из другого штамма A. versicolor [113]. Соединение 183 проявило селективную ингибирующую активность в отношении бациллы Кальметта-Герена (ослабленного штамма возбудителя бычьего туберкулеза Mycobacterium bovis).

–  –  –

Новые алкалоиды мелеагрины B (188) и C (189), а также рокфортины F (191) и G (192) были выделены из глубоководного изолята гриба Penicillium sp., продуцирующего дитерпеноиды 12–17 [27]. Соединения 188 и 189 являются продуктами биосинтетического присоединения Михаэля, соответственно, дитерпена и пренильного остатка к имидазольному кольцу мелеагрина (187), впервые описанному в P. meleagrinum [114]. Дикетопиперазины 191 и 192 являются N-производными рокфортина C (190). Рокфортин C, биосинтетический предшественник как рокфортиновой, так и мелеагриновой групп алкалоидов [115], является обычным микотоксином многих видов рода Penicillium [116]. Широкий спектр биологической активности рокфортина С связывают с его способностью к ингибированию белков группы цитохрома P450 [117]. Из четырех новых мелеагринов и рокфортинов только мелеагрин B показал умеренную токсичность в отношении опухолевых клеток A549, MOLT-4, BEL-7402 и HL-60 с ИК50 1.8 – 6.7 мкМ.

–  –  –

Гриб Penicillium sp., изолированный из глубоководных океанических донных осадков, продуцировал новые дикетопиперазиновые алкалоиды бревикомпанины D–H (193–197) и аллобревикомпанин B (198), ранее описанный только как синтетическое соединение [118-119]. Группа бревикомпаниновых алкалоидов, обладающих способностью регулировать рост растений, впервые была обнаружена в грибе Penicillium brevicompactum [120-121]. Из шести протестированных соединений только соединения 194 и 197 показали способность ингибировать липополисахарид-индуцированную продукцию NO в микроглиальных клетках линии BV2 в концентрациях ниже цитотоксических (ИК50 27 и 45 мкг/мл, соответственно). Очевидно, что специфичность противовоспалительной активности бревикомпанинов обусловлена типом заместителя при N-6 [119].

Новые алкалоиды, плектосфаэровые кислоты A–C (199–201) были обнаружены в этилацетатном экстракте гриба Plectosphaerella cucumerina, выделенного из донных осадков тихоокеанского шельфа Баркли Саунд (Британская Колумбия, Канада) [122]. Эти соединения структурно близки ранее описанным антибиотикам вертициллинам из наземного гриба Verticillium sp. (базидиомицет Coltricia cinnamomea, Япония), а также лептозинам, выделенным из гриба Leptosphaeria sp.

(бурая водоросль Sargassum tortile, бухта Танабе, Япония) [123-124]. Биогенетически соединения 199–201 образуются из четырех триптофановых и одной сериновой или аланиновой единицы. Примечательно, что остатки триптофана участвуют в трех кардинально отличающихся путях биосинтеза, приводящих к финальной структуре. К примеру, центральный фрагмент образован триптофаном, сформировавшим пептидные связи с остатком серина/аланина, что дает модифицированное дикетопиперазиновое ядро. Частичная деградация интермедиата подобного центральному тетрациклическому фрагменту, вероятно, приводит к образованию индольного фрагмента. Катаболическая деградация триптофана через кинурениновый путь дает две 3-гидроксиантранилатных единицы, которые подвергаются окислительному взаимодействию с образованием трициклического феноксазинонового фрагмента плектосфаэровых кислот [123, 125-126]. Все три соединения ингибировали индоламино-2,3-диоксигеназу (ИДО), являющуюся перспективной молекулярной мишенью при исследовании потенциальных агентов противоопухолевой терапии [127]. Стоит отметить, что также выделенный из этого гриба известный метаболит T988A (202) в этом исследовании не проявил какой-либо значимой активности, тогда как синтезированная авторами циннабариновая кислота ингибировала ИДО в концентрациях сравнимых с плектосфаэровыми кислотами (ИК50 2 мкМ). Таким образом, содержащийся в структурах плектосфаэровых кислот феноксазиноновый фрагмент представляет собой новый фармакофор, обеспечивающий ингибирование ИДО.

–  –  –



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |


Похожие работы:

«ЮТКИН Максим Павлович СИНТЕЗ, СТРОЕНИЕ И СВОЙСТВА ГОМОХИРАЛЬНЫХ ПОРИСТЫХ МЕТАЛЛ–ОРГАНИЧЕСКИХ КООРДИНАЦИОННЫХ ПОЛИМЕРОВ 02.00.01 — неорганическая химия Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук Научный руководитель д.х.н., проф. Федин В. П. Новосибирск — 2010 Содержание Введение...............................................»

«Кузьмич Алексей Иванович Использование натрий-йодидного симпортера (NIS) для детекции доставки генотерапевтических агентов в опухолевые клетки Специальность 03.01.03 – молекулярная биология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Свердлов Евгений Давидович,...»

«НВЕ ШВАН У СОРБЦИОННОЕ ИЗВЛЕЧЕНИЕ ВАНАДИЯ (V) ИЗ РАЗБАВЛЕННЫХ РАСТВОРОВ 05.17.02 – технология редких, рассеянных и радиоактивных элементов Диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук Научный руководитель – доктор технических наук, профессор Трошкина Ирина Дмитриевна Москва – 201 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Поведение рения в водных растворах 1.2. Сорбционное...»

«Шестопалова Наталия Борисовна СИСТЕМЫ НПАВ – Н2О – ЭЛЕКТРОЛИТЫ В МИЦЕЛЛЯРНОЙ ЭКСТРАКЦИИ И ФОТОМЕТРИЧЕСКОМ ОПРЕДЕЛЕНИИ СИНТЕТИЧЕСКИХ ПИЩЕВЫХ КРАСИТЕЛЕЙ 02.00.02. – аналитическая химия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата химических наук Научный руководитель: Заслуженный деятель науки РФ, доктор химических наук, профессор Чернова Римма Кузьминична Саратов – 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.. ГЛАВА 1....»

«                      ШИЛЯЕВА ЮЛИЯ ИГОРЕВНА ИССЛЕДОВАНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ ФАЗОВЫХ ПЕРЕХОДОВ I РОДА В НИТЕВИДНЫХ НАНОКРИСТАЛЛАХ (In, Sn, Zn) В ПОРАХ АНОДНОГО Al2O3 Специальность 02.00.04 – физическая химия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата химических наук Научный руководитель: доктор...»

«Нуртдинов Руслан Фаритович Получение радиофармацевтических препаратов направленного действия, меченных радионуклидами висмута и лютеция 02.00.01. – Неорганическая химия Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук Научный руководитель Кандидат химических наук Гуцевич Евгений Игоревич Москва 2015 СОДЕРЖАНИЕ Актуальность работы Цели и задачи работы Научная новизна и практическая значимость работы...»

«ИВЧЕНКО НАТАЛИЯ ВИТАЛЬЕВНА УДК 543.422.3+543.067.5+543:544.344+543.33 ИНДИКАТОРНЫЕ ПЛЕНКИ НА ОСНОВЕ ОТВЕРЖДЕННОГО ЖЕЛАТИНОВОГО ГЕЛЯ С ИММОБИЛИЗОВАННЫМИ ГИДРОКСИКСАНТЕНОВЫМИ КРАСИТЕЛЯМИ И КОМПЛЕКСООБРАЗУЮЩИМИ РЕАГЕНТАМИ 02.00.02 — аналитическая химия Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук Научный руководитель кандидат химических наук, доцент Решетняк...»

«ГОЛОВАНОВ СЕРГЕЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ КОМПЛЕКСНАЯ КОРРЕКЦИЯ ЗДОРОВЬЯ МУЖЧИН В УСЛОВИЯХ АЭРОБНЫХ ФИЗИЧЕСКИХ НАГРУЗОК 13.00.04 – Теория и методика физического воспитания, спортивной тренировки, оздоровительной и адаптивной физической культуры...»

«СОФРОНОВ Александр Петрович ЭВОЛЮЦИЯ И ДИНАМИКА РАСТИТЕЛЬНОСТИ КОТЛОВИН СЕВЕРО-ВОСТОЧНОГО ПРИБАЙКАЛЬЯ 25.00.23 – физическая география и биогеография, география почв и геохимия ландшафта Диссертация на соискание ученой степени кандидата географических наук Научный руководитель доктор географических наук Белов Алексей Васильевич Иркутск 201...»

«Даценко Юрий Сергеевич ФОРМИРОВАНИЕ И ТРАНСФОРМАЦИЯ КАЧЕСТВА ВОДЫ В СИСТЕМАХ ИСТОЧНИКОВ ВОДОСНАБЖЕНИЯ ГОРОДА МОСКВЫ 25.00.27 – гидрология суши, водные ресурсы, гидрохимия диссертация на соискание ученой степени доктора географических наук Москва – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1. ВОДОХОЗЯЙСТВЕННЫЕ СИСТЕМЫ – ИСТОЧНИКИ ЦЕНТРАЛИЗОВАННОГО ВОДОСНАБЖЕНИЯ 1.1. Развитие городского водоснабжения в...»

«Гусев Алексей Николаевич КООРДИНАЦИОННЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ФУНКЦИАЛИЗИРОВАННЫХ ПИРИДИЛТРИАЗОЛОВ: СИНТЕЗ, СТРОЕНИЕ, ОПТИЧЕСКИЕ И МАГНИТНЫЕ СВОЙСТВА Специальность 02.00.01 неорганическая химия Диссертация на соискание ученой степени доктора химических наук Научный консультант доктор химических наук, профессор В.Ф. Шульгин Симферополь, 20...»

«СОБИНА Алена Вячеславовна РАЗРАБОТКА ГОСУДАРСТВЕННОГО ПЕРВИЧНОГО ЭТАЛОНА ЕДИНИЦ МАССОВОЙ ДОЛИ И МАССОВОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ КОМПОНЕНТА В ЖИДКИХ И ТВЕРДЫХ ВЕЩЕСТВАХ И МАТЕРИАЛАХ НА ОСНОВЕ...»

«ТУФАТУЛЛИН АРТЕМ ИГОРЕВИЧ СТЕРЕОХИМИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ КОМПЛЕКСООБРАЗОВАНИЯ КАРБОКСИЛАТНЫХ ФОСФАБЕТАИНОВ И ТИОФОСФОРИЛИРОВАННЫХ ТИОМОЧЕВИН С Zn(II), Cd(II), Hg(II), Cu(II), Ni(II) И Gd(III) 02.00.04 Физическая химия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата химических наук Научный руководитель: доктор...»

«Дубков Сергей Владимирович ИССЛЕДОВАНИЕ И РАЗРАБОТКА ПРОЦЕССА ПЛАЗМОСТИМУЛИРОВАННОГО ХИМИЧЕСКОГО ОСАЖДЕНИЯ УГЛЕРОДНЫХ НАНОСТРУКТУР ИЗ МОНООКСИДА УГЛЕРОДА Специальность 05.27.06 Технология и оборудование для производства полупроводников, материалов и приборов электронной техники Диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук Научный руководитель д.т.н., профессор Д.Г.Громов Москва 2015 Содержание Введение.....»

«Обыденнов Константин Львович СИНТЕЗ, СТРОЕНИЕ И СВОЙСТВА СОПРЯЖЕННЫХ ДИТИОЛАН-, ТИАЗОЛИ ТИЕНИЛИДЕНОВ НА ОСНОВЕ МАЛОНТИОАМИДОВ Специальность 02.00.03 – Органическая химия Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук научный руководитель доктор химических наук, профессор Ю. Ю. Моржерин...»

«ФЕДОРОВА Марина Анатольевна ИСТОЧНИКИ И ПУТИ СНИЖЕНИЯ СИСТЕМАТИЧЕСКИХ ПОГРЕШНОСТЕЙ ПРИ ОЦЕНКЕ СУММАРНОГО СОДЕРЖАНИЯ УГЛЕВОДОРОДОВ МЕТОДАМИ ИК-СПЕКТРОМЕТРИИ 02.00.02 – Аналитическая химия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата химических наук ОМСК – 2015 Посвящаю моей дочери, Федоровой Злате Оглавление Введение Глава 1. Методы определения...»

«БАЛЯЗИН Иван Валерьевич ПРОСТРАНСТВЕННО-ВРЕМЕННАЯ СТРУКТУРА И ТАКСОНОМИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ ЗООЦЕНОЗОВ ПОЧВ СТЕПНЫХ И ТАЕЖНЫХ ГЕОСИСТЕМ ЮЖНО-МИНУСИНСКОЙ КОТЛОВИНЫ 25.00.23 – физическая география и биогеография, география почв и геохимия ландшафтов Диссертация на соискание ученой степени кандидата географических наук Научный руководитель:...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «СЕВЕРО-КАВКАЗСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» ГУСЕВА Ирина Николаевна ФЛОРА ЛЕСОВ ЦЕНТРАЛЬНОГО ПРЕДКАВКАЗЬЯ И ЕЁ АНАЛИЗ 25.00.23 – физическая география и биогеография, география почв и геохимия ландшафтов Диссертация на соискание учной степени кандидата географических наук Научный руководитель: доктор биологических наук...»

«Скачков Владимир Михайлович ХИМИЧЕСКОЕ ЛЕГИРОВАНИЕ СКАНДИЕМ, ЦИРКОНИЕМ И ГАФНИЕМ СПЛАВОВ НА ОСНОВЕ АЛЮМИНИЯ специальность 02.00.04 – физическая химия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата химических наук Научный руководитель: проф., д.х.н. Яценко С.П. Екатеринбург ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1 ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ СКАНДИЯ С ЭЛЕМЕНТАМИ В ДВОЙНЫХ...»

«Губанов Александр Алексеевич РАЗРАБОТКА ПРОЦЕССА ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКОЙ МОДИФИКАЦИИ ПОВЕРХНОСТИ УГЛЕРОДНОГО ВОЛОКНА С ЦЕЛЬЮ УВЕЛИЧЕНИЯ ПРОЧНОСТИ УГЛЕПЛАСТИКОВ 05.17.03 – Технология электрохимических процессов и защита от коррозии 05.17.06 – Технология и переработка полимеров и композитов ДИССЕРТАЦИЯ на...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.