WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 

Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |

«МИНЕРАЛЬНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ РОГОВИЦЫ И НЕОРГАНИЧЕСКИЕ БИОХИМИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ СЛЕЗЫ ПРИ КЕРАТОКОНУСЕ ...»

-- [ Страница 1 ] --

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение

«Научно-исследовательский институт глазных болезней»

На правах рукописи

Патеюк Людмила Сергеевна

МИНЕРАЛЬНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ РОГОВИЦЫ

И НЕОРГАНИЧЕСКИЕ БИОХИМИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ СЛЕЗЫ

ПРИ КЕРАТОКОНУСЕ

14.01.07 – глазные болезни

Диссертация



на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Научный руководитель – академик РАН, доктор медицинских наук, профессор С.Э. Аветисов Москва – 2015

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Теории патогенеза, этиопатогенетические факторы и сопутствующие проявления кератоконуса

1.2. Бионеорганическая химия соединительной ткани и роговицы

1.2.1. Роль металлов в метаболизме соединительной ткани.... 26 1.2.2. Роль металлов в метаболизме роговицы и пигментации роговицы

1.2.3. Современные представления о кольце Флейшера.......... 33

1.3. Понятие о физико-химическом барьере

1.4. Неорганические биохимические параметры слезы............ 38 1.4.1. Неорганические компоненты слезы

1.4.2. Кислотность слезы

1.4.3. Осмолярность слезы

1.5. Современные методы аналитической химии

ГЛАВА 2. ХАРАКТЕРИСТИКА МАТЕРИАЛА И МЕТОДОВ

СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Элементный анализ роговицы

2.1.1. Рентгенофлуоресцентный анализ роговицы

2.1.2. Энергодисперсионная рентгеновская спектроскопия со сканирующей электронной микроскопией роговицы......... 62

2.2. Элементный анализ слезы

2.3. PH-метрия слезы

2.4. Осмометрия слезы

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Распределение минеральных элементов в роговице в норме и при кератоконусе

3.1.1. Распределение минеральных элементов в роговице по данным рентгенофлуоресцентного анализа

3.1.2. Распределение минеральных элементов в роговице по данным энергодисперсионной рентгеновской спектроскопии со сканирующей электронной микроскопией

3.1.3. Физико-химический барьер в тканях роговицы при кератоконусе

3.2. Элементный состав слезы в норме и при кератоконусе.... 81 3.2.1. Элементный состав слезы по данным электронно-зондового рентгеноспектрального анализа.......... 81 3.2.2. Буферная система слезы

3.3. Кислотность слезы в норме и при кератоконусе................. 89 3.3.1. Оригинальная методика pH-метрии слезы

3.3.2. Кислотность слезы в норме

3.3.3. Кислотность слезы при кератоконусе

3.4. Осмолярность слезы при кератоконусе

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

Практические рекомендации

Список литературы

Список иллюстративного материала

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

КК – кератоконус РСМА – (рентгеноспектральный микроанализ) электронно-зондовый рентгеноспектральный анализ СГП – система глазной поверхности (англ. ocular surface system) СКП – сквозная кератопластика СОД – супероксиддисмутаза ССГ – синдром сухого глаза SEM-EDS – (англ. scanning electron microscopy, energy-dispersive X-ray spectroscopy) энергодисперсионная рентгеновская спектроскопия в сочетании со сканирующей электронной микроскопией XRF – (англ. X-ray fluorescence) рентгенофлуоресцентный анализ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы и степень ее разработанности Кератоконус (КК) – невоспалительное эктатическое заболевание роговицы, проявляющееся деструктивными изменениями, прогрессирующим истончением и выпячиванием ее центральной части с соответствующим изменением формы до конусовидной. Вопрос о происхождении КК попрежнему остается открытым: достоверно неизвестны ни его этиология, ни патогенез. Не установлены ультраструктурные механизмы и нарушения, лежащие в основе развития этого вида протрузии, несмотря на огромное число исследований, теорий и гипотез о природе КК.

Согласно немногочисленным эпидемиологическим данным заболеваемость КК широко варьирует (0,0003–2,3%) в зависимости от региона наблюдения [18, 142, 186]. Высока социальная значимость этого заболевания в связи с возможностью возникновения у пациентов с КК инвалидности по зрению или профессиональной нетрудоспособности.





Ранняя диагностика КК возможна только при наличии современной высокотехнологичной и дорогостоящей лечебно-диагностической базы, позволяющей проводить кератотопографию при обследовании пациентов с подозрением на КК. Лечебные мероприятия, выполняемые с целью стабилизации или оптической коррекции этого вида кератэктазии, также требуют высоких финансово-экономических затрат и высокого профессионализма врачебного персонала. Отдельного рассмотрения заслуживает эффективность проводимой при КК терапии, сопряженной с рисками повторных хирургических вмешательств в результате отсутствия желаемых результатов или развития рецидивов [81, 217, 240]. Большое количество опубликованных за последние годы научных работ, посвященных КК, говорит об актуальности данной проблемы [38, 41, 43, 57].

Вопросы этиологии и патогенеза КК в системе современных медицинских знаний широко освещены на междисциплинарном уровне (офтальмология, генетика, гистология, цитология, биохимия, иммунология, аллергология, эндокринология и др.). Несмотря на многочисленные сообщения в специальной литературе об исследованиях, свидетельствующих в пользу той или иной теории развития КК и данных об его ассоциации с другими заболеваниями, вопрос о причинах и механизмах его развития остается открытым.

Химический состав слезной жидкости при заболеваниях глаз может претерпевать существенные изменения [12, 15, 32, 35, 37, 39, 40, 56]. В ряде современных исследований отмечена связь КК с аномальным составом слезы [20, 21, 23, 52, 53, 143, 165, 166, 167]. Имеются сообщения о минеральном дисбалансе (железо и цинк) в роговице при КК [52]. Получены предварительные данные об уменьшении кислотности слезы и аномальном распределении меди в роговице при развитии КК. В 2011г. С.Э. Аветисов и соавт. предложили гипотезу о принципиально новом патогенетическом механизме развития КК, связанном с недостаточностью медь-зависимого фермента лизилоксидазы [8].

В связи с вышеизложенным можно сделать вывод о необходимости детального изучения минерального метаболизма в тканях роговицы и в слезной жидкости в патогенезе КК – уточнить характер и роль нарушений обмена минералов в роговице, изучить минеральные компоненты слезы и провести анализ ее кислотности и осмолярности.

Цель: изучение распределения минеральных элементов в тканях роговицы и неорганических биохимических параметров слезы (минеральный состав, кислотность и осмолярность) в норме и при кератоконусе.

Задачи:

1. Изучить минеральный состав роговичных дисков без признаков патологических изменений и роговичных дисков, удаленных при сквозной кератопластике (СКП) по поводу КК III ст. с помощью методов рентгенофлуоресцентного анализа и энергодисперсионной (XRF) рентгеновской спектроскопии на базе сканирующего электронного микроскопа (SEM-EDS).

2. Адаптировать методы XRF и SEM-EDS для изучения биологических объектов; разработать методики элементного анализа тканей роговицы в соответствии с ее зонами и слоями.

3. Определить минеральные компоненты, входящие в состав слезы в норме и при КК, методом электронно-зондового рентгеноспектрального анализа (РСМА).

4. Разработать методику позволяющую с высокой pH-метрии, точностью оценивать кислотность содержимого конъюнктивальной полости;

разработать программное обеспечение для компьютерного колориметрического анализа лакмусовых проб слезы.

5. Изучить статистическое распределение кислотности слезы в норме (среди здоровых лиц, не страдающих заболеваниями глаз, и пациентов с миопическим астигматизмом) в зависимости от рефракции, возраста, половой принадлежности, аллергологического анамнеза и привычки к табакокурению.

6. Выявить статистические особенности распределения кислотности слезы в норме (среди здоровых лиц, не страдающих заболеваниями глаз, и пациентов с миопическим астигматизмом) и при КК.

7. Изучить статистическое распределение осмолярности слезы при КК.

Научная новизна

1. Впервые на репрезентативном материале изучен минеральный состав роговицы в норме и при КК. При КК выявлено аномальное перераспределение минеральных элементов в тканях роговицы.

2. Разработаны методики проведения XRF и SEM-EDS для оценки состояния роговицы.

3. Впервые в репрезентативном материале проведено исследование минерального состава слезной жидкости в норме и при КК.

4. Впервые обнаружены значимые концентрации бора в слезе в норме и при КК. Предложена гипотеза боратной буферной системы в качестве наиболее надежной составляющей механизма, поддерживающего стабильность нормального кислотно-основного состояния слезы.

5. Впервые на репрезентативном материале проведено изучение кислотности слезы в норме (у здоровых лиц и пациентов с миопическим астигматизмом) и при КК.

6. Разработана оригинальная методика прецизионной pH-метрии, позволяющая оценивать кислотность сред конъюнктивальной полости при помощи лакмусовых тест-полосок высокой чувствительности. Разработано оригинальное программное обеспечение для проведения компьютерного колориметрического анализа лакмусовых тест-полосок с пробами слезы.

7. Выявлена гетерогенность уровня содержимого pH конъюнктивальной полости.

8. Установлено естественное возрастное изменение кислотности слезы:

уменьшение pH ее вязкого компонента.

9. Впервые выявлено достоверное отличие кислотности содержимого конъюнктивальной полости у пациентов с КК от аналогичного показателя в норме.

10. Впервые на репрезентативном материале изучена осмолярность слезы у пациентов с КК.

11. Предложена новая теория патогенеза КК, основанная на принципе «порочного круга».

Теоретическая и практическая значимость работы Разработанные методики XRF и SEM-EDS для изучения тканей роговицы могут быть адаптированы для изучения других биологических объектов. Выявленные нарушения минерального метаболизма в роговице и сдвиг рН вязкого компонента слезы в щелочную сторону при КК, а также новая теория патогенеза КК по принципу «порочного круга» в дальнейшем предполагают разработку патогенетических методов терапии, диагностики и профилактики этого заболевания. Предложенная гипотеза боратной буферной системы слезы может быть рассмотрена в контексте создания местно действующих фармакологических препаратов. Разработанную методику pH-метрии содержимого конъюнктивальной полости применяют в научно-исследовательской работе ФГБНУ «НИИГБ». Выявленная гетерогенность кислотности содержимого конъюнктивальной полости в норме и при КК является предметом будущих научно-исследовательских работ.

Методология и методы диссертационного исследования Методологической основой диссертационной работы явилось применение комплекса методов и основных принципов научного исследования, соблюдены схема и этапы последнего. Сочетание качественных и количественных методик исследования позволили предложить гипотезу о возможных причинно-следственных связях в этиопатогенезе КК.

Работа выполнена в дизайне одномоментного кросссекционного исследования с использованием клинических, инструментальных, аналитических, лабораторных и статистических методов.

Положения, выносимые на защиту

1. При КК III ст. нарушен минеральный обмен в роговице. Аномальное распределение минеральных элементов в роговице характеризует преимущественное накопление железа, меди и цинка в зоне пигментного кольца Флейшера (Fleischer B.) в поверхностных слоях стромы, в области боуменовой мембраны и в эпителии роговицы; центральная зона роговицы тотально обеднена всеми тремя элементами.

2. Методы рентгенофлуоресцентного анализа (XRF) и энергодисперсионной рентгеновской спектроскопии на базе сканирующего электронного микроскопа (SEM-EDS) могут быть использованы для изучения роговицы.

3. Минеральный компонент слезной жидкости в норме и при КК представлен преимущественно растворимыми соединениями хлора, натрия, калия и бора. Боратная буферная система может выступать в качестве вероятной составляющей механизма, поддерживающего нормальное кислотно-основное состояние слезы. Минеральный состав слезы при КК аналогичен таковому у здоровых лиц.

4. Оригинальная методика pH-метрии с проведением компьютерного колориметрического анализа лакмусовых проб может быть использована для измерения кислотности биологических сред, в т.ч. для измерения кислотности содержимого конъюнктивальной полости. Содержимое конъюнктивальной полости гетерогенно; кислотность свободной слезной жидкости достоверно выше ее вязкого компонента, имеющего более щелочной характер.

5. Естественную возрастную изменчивость кислотности слезы характеризует физиологическое уменьшение pH (закисление) ее вязкого компонента. Кислотность свободной слезной жидкости не зависит от возраста, половой принадлежности, аллергологического анамнеза, привычки к табакокурению и рефракции. Статистическое распределение pH свободной слезной жидкости и вязкого компонента слезы пациентов с миопическим астигматизмом не отличается от аналогичного показателя здоровых лиц.

6. У здоровых лиц и у пациентов с миопическим астигматизмом распределение pH свободной слезной жидкости является нормальным, а при КК имеет признаки полимодальности. Кислотность вязкого компонента слезы пациентов с КК в более молодом возрасте превышает норму.

7. Связь кислотности слезы с патогенезом КК возможна согласно предложенной теории патогенеза КК по принципу «порочного круга».

8. Статистическое распределение осмолярности слезы при КК не имеет отличительный особенностей от нормы.

Степень достоверности и апробация результатов Достоверность полученных результатов определяет репрезентативный объем материала с использованием современных методов исследований и объективных методов обработки данных. В работе использовано современное сертифицированное офтальмологическое, аналитическое и лабораторное оборудование, условия исследования стандартизированы для выполнения поставленных задач. Анализ материала и статистическая обработка полученных данных выполнены с применением современных методов и в соответствии с современными стандартами сбора и обработки научных данных.

Основные положения и материалы диссертации доложены на:

1. Научно-практической конференции с международным участием «VI Российский общенациональный офтальмологический форум» (Москва, 2013)

– «Изменение химического состава роговицы при кератоконусе (предварительное сообщение)»;

2. XII Международной научно-практической конференции «Федоровские чтения – 2014. Современные технологии лечения патологии роговицы»: «Современные технологии лечения патологии роговицы»

(Москва, 2014) – «Новые данные о происхождении кольца Флейшера при кератоконусе»;

3. V Международном симпозиуме «Осенние рефракционные чтения»:

«Индуцированные аметропии» (Москва, – «Новая концепция 2014) патогенеза кератоконуса»;

4. «XIV Всероссийской школе офтальмолога» (ВШО – 2015) (Московская обл., 2015) – «Биохимические неорганические параметры слезы при кератоконусе»;

5. X Съезде офтальмологов России (Москва, 2015) – «Физикохимический барьер в роговице – основа новой концепции патогенеза кератоконуса»;

6. Заседании проблемной комиссии Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Научно-исследовательский институт глазных болезней» (ФГБНУ «НИИГБ») – 08.06.2015 г.

Личный вклад автора в проведенное исследование Личный вклад автора состоит в непосредственном участии в подготовке и проведении всех экспериментальных и клинических исследований, обработке и интерпретации полученных дынных, анализе результатов, подготовке публикаций и докладов по теме диссертации.

–  –  –

Публикации По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ, в том числе 3 – в журналах, входящих в перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, рекомендованных ВАК.

Структура и объем диссертационной работы Диссертация изложена на 144 страницах машинописного текста, иллюстрирована 16 таблицами и 30 рисунками. Работа состоит из введения, главы обзора литературы, главы о материале и методах настоящих исследований, главы о результатах собственных исследований, заключения, выводов и списка литературы, включающего 251 источник, из них 66 – русскоязычных и 185 – иностранных.

ГЛАВА 1

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

–  –  –

Кератоконус (КК) как самостоятельная нозологическая форма впервые был описан в 1729 г. английским офтальмологом Бенедиктом Дудделем (Duddell Benedict) в «Трактате о заболеваниях роговой оболочки глаза, и о различных видах катаракт (англ. «A treatise of the diseases of the horny-coat of the eye, and the various kinds of cataract»; Лондон, издательство «Clark & Roberts») [133, 240, 244]. К настоящему времени существенно усовершенствованы методы ранней диагностики, мониторинга, коррекции и лечения этого эктатического заболевания роговицы. Менее изученными остаются вопросы, связанные с этиологией и патогенезом КК.

Энциклопедическое толкование определяет патогенез как «механизмы возникновения и развития болезни и отдельных ее проявлений на различных уровнях организма», в то время как этиология – это «раздел патологии, изучающий проблему причинности в медицине». Подробный анализ приведенных в доступной литературе работ показал, что представленные авторами результаты относятся не только к рассмотрению этиологических или патогенетических факторов КК, но и к оценке ряда сопутствующих проявлений, как местного, так и общего характера.

Наиболее широкое распространение на сегодняшний день получила генетическая теория развития КК, в частности выявлены факты семейной наследственности, конкордантности между идентичными близнецами и ассоциации КК с другими генетическими нарушениями. Несколько локусов, ассоциированных с КК, в том числе в случаях семейного анамнеза, были картированы; тем не менее, мутации генов, непосредственно ответственные за развитие этого заболевания, так и не были определены [81, 174, 197].

Согласно эпидемиологическим исследованиям лица азиатского происхождения страдают КК чаще, чем европеоидное население [127]. Для первых также характерны более раннее начало заболевания и более высокая частота трансплантаций роговицы по поводу КК [202]. Тем не менее, частота встречаемости КК среди пациентов, относящихся к европеоидной расе, значительно выше, чем среди представителей негроидной расы и лиц латиноамериканского происхождения [247]. Наибольшая частота встречаемости КК (2,3%) имеет место в некоторых регионах Индии и Израиля [142, 186].

Семейный анамнез выявляют в 6–23,5% случаев КК [46, 77, 111, 134, 186, 187, 199, 208, 247]. Вариабельны схемы наследования КК. Даже в пределах одной генеалогической схемы клиническая картина заболевания широко варьирует [46]. Известно, что монозиготные близнецы, обладающие идентичными генотипами, сходны и в фенотипах, включая проявления генетически детерминированных заболеваний. В парах идентичных близнецов описаны случаи КК: страдать кератэктазией могут оба близнеца или один из них; клиническая картина заболевания у близнецов может быть как идентичной, так и иметь значительные различия. То есть в отношении КК монозиготные близнецы могут проявлять как конкордантность, так и дискордантность [46, 81, 83, 90, 134, 178, 200]. У дизиготных близнецов, имеющих различные генотипы, течение КК варьирует так же, как у обычных братьев и сестер [235].

В доступной специальной литературе приведены данные о различных типах наследования при изучении семейных анамнезов КК. Имеются сообщения об аутосомно-рецессивном варианте наследования КК [153].

Загрузка...

Аутосомно-доминантный тип наследования с вертикальной передачей также был выявлен в семьях, члены которых страдали КК. Высказано предположение о возможности неполной пенетрации или вариабельности экспрессии генов, предрасполагающих к развитию КК [131, 197, 208, 213]. В связи с этим некоторые исследователи считают КК наследственным заболеванием, фенотипические проявления которого зависят от множественных факторов окружающей среды [114, 197].

В ряде эпидемиологических исследований отмечают связь развития КК с полом, хотя имеющиеся данные носят разноречивый характер [117–119, 172, 177, 186].

Некоторые авторы указывают на возможную ассоциацию КК с заболеваниями, вызванными патологическими изменениями соединительной ткани и ее метаболизма, со множеством врожденных или наследственных (генных и хромосомных) болезней, с пролапсом митрального клапана и с дистрофиями роговицы [31, 81, 106, 111, 139, 140, 170, 185, 187, 215, 237, 243]. Приведенные данные позволяют предположить, что вышеперечисленные патологические состояния – разнообразные клинические проявления нарушений обмена коллагена.

Высказано предположение о том, что в развитии КК существенную роль играют воспалительные медиаторы, а также стимулирующие воспаление факторы, такие как хроническое трение глаз, аллергические и воспалительные заболевания переднего отрезка глаза, розацеа-кератит, синдром «болтающегося», или «дряблого» века (англ. floppy eyelid). В этих условиях эпителий роговицы начинает продуцировать литические ферменты и воспалительные цитокины, которые активируют кератоциты и вызывают повреждение тканей роговицы [81].

При КК отмечены изменения состояния клеточного и гуморального иммунитета, как местного, так и системного характера [2, 20, 23, 29, 64].

В ряде исследований изучены иммуногенетические аспекты возникновения КК. Так, была выявлена ассоциация распределения антигенов гистосовместимости и гаплотипов HLA I класса с развитием и клинической картиной КК [17, 22].

Кроме этого, КК может сочетаться с рядом аутоиммунных нарушений [193]. При прогрессировании заболевания было выявлено повышение титров специфичных антител к тканям роговицы [53].

По данным различных исследователей в 35–57% случаев КК может быть ассоциирован с разнообразными атопическими заболеваниями [77, 81, 134, 145, 149, 150, 186, 209, 239, 247].

Тем не менее, в ряде исследований к этиологическому фактору КК относят не сами атопические состояния, а травмирующее роговицу трение глаз при дискомфорте, вызванном аллергическим поражением глаз [82, 138, 145, 148, 171, 180, 246, 248]. Выявлена корреляция КК с трением (чесание) глаз, в результате которого может возникать каскад патологических изменений [179]. Имеются сведения о развитии КК в случае психологически обусловленного трения глаз (моторные навязчивости) при стрессе, эмоциональном напряжении или по привычке, а также в случае поведенческих аномалий психотического характера [145, 158, 175]. В качестве предрасполагающих к КК факторов механической травмы рассматривают синдром «болтающегося» века, положение во сне лицом вниз, синдром обструктивного апноэ [81, 105, 110, 163, 191]. Существует мнение, согласно которому контактные линзы могут быть причиной постоянной механической травмы роговицы и, соответственно, предрасполагать к развитию КК; тем не менее, этот вопрос остается спорным [3, 19, 33, 152, 166].

При КК в слезе, роговице и камерной влаге выявлены признаки оксидативного стресса, нарушения окислительных процессов и реакций энергообразования [21, 46, 53, 93, 148, 165, 167, 188, 221, 250].

КК сопровождают изменения концентраций минеральных элементов в крови (титан, свинец, алюминий, никель, цинк) и в роговице (цинк, железо, медь) [8, 46, 52, 198].

При КК наблюдают также дисбаланс витаминов: уменьшение содержания токоферолов в роговице и в крови [46].

В табл. 1 в обобщенном виде представлены биохимические изменения, характерные для КК [4, 8, 10, 17, 20–23, 46, 52, 53, 64, 93, 94, 134, 137, 143, 146–148, 162, 165–167, 188, 198, 209, 221, 250].

Имеются данные об ассоциации КК со снижением кислотности слезы [8]. Отрицательная корреляция pH с курением позволила авторам выдвинуть предположение о том, что токсичные продукты табакокурения могут оказывать влияние на обменные процессы в роговице [8, 220].

На основе взаимосвязи КК с гормональными изменениями была выдвинута эндокринная теория происхождения этого заболевания. У пациентов, страдающих сахарным диабетом, отмечено более тяжелое течение КК [161]. Ряд клинических наблюдений свидетельствует о возможной связи КК с беременностью и лактацией [87, 200, 219]. Описаны редкие клинические случаи сочетания дисфункции щитовидной железы и КК [67, 126, 135, 157].

В группе пациентов с КК чаще фиксируют диабет, артериальную гипертонию, заболевания почек и остеопороз. Они также чаще принимают ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента, адреноблокаторы, кортикостероиды, нестероидные противовоспалительные препараты, иммуносупрессивные препараты и бифосфонаты [79].

Несмотря на то, что большинство исследователей разделяют мнение о существенной роли неблагоприятных факторов окружающей среды в развитии КК, данные, подтверждающие этот факт, практически отсутствуют.

Анализ эпидемиологической обстановки на Урале показал, что максимальная заболеваемость КК имеет место в зонах радионуклидного загрязнения [18].

Развитию заболевания могут способствовать психоэмоциональный стресс и высокие нагрузки, а также моторные навязчивости [116, 145].

–  –  –

В контексте патогенеза КК рассматривают морфологические и множественные гистохимические изменения тканей роговицы, так как они носят дистрофический и/или дегенеративный характер. Многие авторы считают, что в основе развития КК лежат патологические изменения тканей роговицы, при этом особую роль отводят ее соединительно-тканной строме.

Гистологическая картина роговицы, в т.ч. выявляемая при конфокальной микроскопии, при КК имеет ряд особенностей, характерных как для заболевания в целом, так и для его стадий. Особое значение отводят уменьшению количества кератоцитов, которое связывают с усилением их апоптоза. Характерные гистологические изменения роговицы при КК представлены в табл. 2 [7, 27, 31, 51, 52, 81, 152, 183, 192, 217, 240].

Несмотря на то, что ведущую роль в патогенезе КК большинство авторов отводят предрасполагающим к его развитию морфофункциональным особенностям роговицы, такой феномен как рецидив заболевания на роговичном трансплантате после перенесенной сквозной кератопластики (СКП) свидетельствует в пользу того, что возможными первопричинами могут быть другие, не связанные с гистологией роговицы, факторы [68, 89].

Таблица 2. Гистологические изменения при кератоконусе Гистологические Патологические изменения структуры гистологических структур Эпителий, Изменение профиля толщины эпителия характеризует иррегулярность в том числе: толщины со смещением тончайшей точки темпорально и вниз; зона истонченного эпителия на вершине конуса окружена кольцом утолщенного эпителия в виде «пончика» (англ.

«doughnut pattern»).

Нарушение адгезии и ослабление межклеточных контактов приводят к разрывам слоев и десквамации пластами.

Эпителий «врастает» в разрывы боуменовой мембраны.

поверхностные Клетки увеличены в размерах и деформированы (удлинение, чешуйчатые веретенообразная, лентовидная форма).

эпителиоциты; Наблюдают их спиралевидную организацию и слущивание.

Характерна вакуольная дистрофия и некробиоз с отечностью и гиперрефлективностью ядер.

крылатые Клетки увеличены в размерах.

(отросчатые, Ядра увеличены в размерах, неравномерно распределены, отечны и шиповатые) гиперрефлективны.

эпителиоциты;

базальные Клетки увеличены в размерах, местами отсутствуют. Характерны их призматические полиморфизм и дегенерация.

эпителиоциты; Ядра увеличены в размерах, неравномерно распределены.

Наблюдают образование высокорефлективных депозитов, отложение железа.

базальная Характерно утолщение базальной мембраны с отложением депозитов и мембрана; неравномерной рефлективностью.

Боуменова мембрана неравномерно утолщена, местами отсутствует.

Боуменова В разрывы происходит врастание эпителия или «выпадение»

мембрана подлежащего коллагена стромы.

Наблюдают неравномерное распределение протеогликанов и гликопротеинов.

Строма, Истончение стромы сопровождает ее гомогенизация в том числе: (бесструктурность) с помутнением и гиперрефлективностью.

Наблюдают складчатость (Z-образные складки) и микрострии.

Снижена объемная доля коллагеновых волокон.

Нарушено ортогональное расположение пластин и архитектоника волокнистых структур.

Число пластин уменьшено.

Увеличены межфибриллярные промежутки.

При разрывах десцеметовой мембраны развивается отек.

Возможно наличие фибробластов и фибробластоподобных клеток в строме (фибротизация стромы).

Наблюдают снижение объемной доли основного вещества.

кератоциты; Снижается плотность клеток с уменьшением их количества. Клетки обладают повышенной рефлективностью.

Наблюдают нарушение организации (дезориентация) клеток.

Для ядер характерны гиперрефлективность и структурные изменения со снижением четкости их границ.

–  –  –

Опубликованы данные о биомеханических параметрах роговицы при КК. При проведении двунаправленной аппланации роговицы обнаружено, что при КК биомеханические показатели роговицы коррелируют со сниженными при этом заболевании изменениями ее толщины. Существует также гипотеза о биомеханической декомпенсации в тканях роговицы, приводящей к прогрессированию КК [5, 6, 81, 217].

На основании морфологических, функциональных, биохимических и иммунологических изменений, выявленных при КК, было предложено несколько теорий происхождения этого заболевания.

Н.А. Пучковская и З.Д. Титаренко (1990) основное значение в механизме изменений роговицы при КК придают снижению активности фермента глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы, что в свою очередь приводит к торможению восстановления глутатиона и вызывает увеличение уровня перекисей липидов, которые взаимодействуют с белками, мембранами и ферментами [46]. На этом фоне происходит высвобождение лизосомальных гидролитических ферментов и лизис внутриклеточных структур, приводящий к гибели клеток и развитию атрофических процессов с истончением роговицы.

Е.А. Каспарова приводит следующую схему факторов (2002) патогенеза и гистологических изменений при КК [33]. Постоянное раздражение и травмирование эпителия (ношение контактных линз, чесание глаз и др.) вызывает повышенный апоптоз кератоцитов с увеличением уровня лизосомальных ферментов, что приводит дегенерации эпителия, боуменовой мембраны и стромы роговицы.

В предварительном сообщении С.Э. Аветисов и соавт. (2011) предоставили данные о возможном влиянии недостаточной кислотности слезы на миграционные способности меди в роговице [8]. В этом случае медь накапливается в зоне кольца Флейшера, а соответствующий дефицит меди в центральной зоне приводит к инактивации медь-зависимого фермента лизилоксидазы, формирующего поперечные «сшивки» в новообразованном коллагене, и, соответственно, к развитию КК.

«Каскадную гипотезу» происхождения КК предложили M.C. Kenney и D.J. Brown (2003): дефекты в ферментной системе роговицы приводят к оксидативному стрессу, который может усиливаться при ультрафиолетовом или механическом воздействии [147]. Накопление цитотоксичных продуктов оксидативного распада инициирует целый каскад биохимических, иммунологических и молекулярных изменений.

Разнообразие клинических форм и типов течения заболевания, би- или монолатеральность процесса, вовлечение в процесс центральной части или средней периферии роговицы, начало в детском или более позднем возрасте, семейный анамнез или спорадические случаи – все эти факторы косвенно свидетельствуют о возможной полиэтиологичности КК.

Мультифакториальность патогенетических аспектов КК и наличие преобладающего этиологического фактора были отмечены некоторыми исследователями как характеристики этого заболевания [145, 197].

Современные представления об этиологии и патогенезе КК весьма разрозненны и противоречивы, что дает возможность предполагать различные варианты причин и развития патологического процесса, приводящего к единому или аналогичному клиническому исходу (клинические проявления). При изобилии наблюдений и выявленных корреляций зачастую нет четкого определения причинно-следственных связей между обнаруженными изменениями и развитием КК. Наличие изменений морфологического, иммунного и биохимического характера бесспорно; неясен вопрос о первичности или вторичности этих изменений.

Необходимо дальнейшее изучение и другого аспекта этого вопроса – до настоящего времени отсутствует четкое разделение непосредственных причин развития КК и неблагоприятных факторов, предрасполагающих к его формированию или усугубляющих его течение.

1.2. Бионеорганическая химия соединительной ткани и роговицы

Соединительная ткань является гистологической основой роговицы.

Строма (собственное вещество), занимающее 90% всей толщины роговицы, преимущественно состоит из коллагеновых волокон и включает в себя фибробласты, кератоциты и межклеточное вещество. Межклеточное вещество состоит из основного вещества и волокнистых структур – правильно ориентированных коллагеновых волокон. Коллагеновые фибриллы организованы в единообразные пластины, погруженные в бесструктурное основное вещество. Основное вещество содержит много воды и сформировано молекулами гликозаминогликанов (мукополисахариды), протеогликанов и гликопротеинов. Передняя и задняя пограничные мембраны, боуменова и десцеметова мембраны, соответственно, представлены преимущественно коллагеновыми волокнами [26, 31].

Общеизвестно, что качественные характеристики соединительнотканных структур, а, соответственно, и роговицы, во многом зависят от некоторых минеральных элементов и их метаболизма (минеральный метаболизм).

1.2.1. Роль металлов в метаболизме соединительной ткани

Отдельные минеральные элементы, определяющие качественные характеристики соединительнотканных структур, принимают непосредственное участие в модуляции активности ферментов, определяющих скорость синтеза и распада коллагеновых и эластиновых волокон. Прежде всего, к таким элементам относят магний, кальций, медь, цинк, марганец и бор [65]. Ионы металлов играют эссенциальную роль в нормальной физиологии соединительной ткани. В правильной организации коллагеновых волокон и основного вещества участвуют ферменты ката- и анаболизма, активность которых зависит от специфичных металлов. Их наличие, концентрация и биологическая доступность играют ключевую роль в активировании или ингибировании энзимов и определяют скорость ферментативных реакций [50].

Анаболизм коллагена ферментируют такие энзимы как гидроксилазы, лизилоксидаза и гликозилтрансферазы. Гидроксилазы пролина и лизина, участвующие в посттрансляционных модификациях коллагена, содержат в активном центре атом железа. Медь-содержащая лизилоксидаза формирует поперечные связи коллагеновых фибрилл. Гликозилтрансферазы, кофактором которых является марганец, участвуют в гликозилировании гидроксилизина молекул коллагена [9].

В реакциях катаболизма коллагена участвуют некоторые металлозависимые энзимы – коллагеназы и металлопротеиназы. Тканевая коллагеназа – металлозависимый фермент, который содержит цинк в активном центре. Матриксные металлопротеиназы – семейство внеклеточных цинк-зависимых эндопептидаз – способны разрушать все типы белков внеклеточного матрикса, в том числе и коллаген [50].

Основные металлозависимые ферменты и их роль в патологических процессах, происходящих в соединительнотканных структурах представлены в сводной табл. 3 [9, 50].

Модулирование биомеханических свойств и транспорта веществ в соединительной ткани осуществляется не только за счет коллагеновых волокон, но и посредством основного аморфного вещества – в значительной степени за счет изменения физико-химических свойств гликозаминогликанов. Под действием гиалуронидаз, активность которых ингибируют медь и железо, снижается вязкость гликозаминогликанов межклеточного матрикса [50].

–  –  –

Как известно, роговица, имеющая высокую проницаемость для кислорода, получает его непосредственно из окружающей атмосферы [78, 91, 115, 218, 226]. Поскольку в тканях роговицы присутствует в значительных концентрациях свободный кислород, все ее структурные компоненты (клетки, волокна и основное аморфное вещество) подвержены его воздействию, что предполагает наличие мощных факторов антиоксидантной защиты в роговице. Супероксиддисмутазы (СОД) – группа антиоксидантных ферментов, которые, предотвращая развитие оксидативного стресса в тканях, защищают их от токсического действия активных форм кислорода. В организме человека кофакторами СОД выступают медь и цинк, или марганец. СОД1 содержится в цитоплазме, СОД2 – в митохондриях и СОД3– в межклеточном веществе. В СОД1 и СОД3 ионы меди расположены в активном центре, а ионы цинка являются структурными компонентами фермента; СОД2 содержит в активном центре марганец [50, 249].

Отдельно следует подчеркнуть роль металлов в метаболизме соединительнотканных структур глаза. При миопии выявлены нарушения минерального обмена и биомеханических свойств склеры. Нарушение обмена металлов в этом случае проявляется изменением и состава, и распределения минеральных элементов в заднем отделе глазного яблока:

отмечено уменьшение содержания металлов, отсутствие алюминия, бора и хрома, а также снижение уровней цинка, меди и железа [30]. Элементный анализ конъюнктивы при птеригиуме показал значительное уменьшение концентраций хрома, марганца, цинка и селена [190].

1.2.2. Роль металлов в метаболизме роговицы и пигментации роговицы

К настоящему времени о роли и составе минеральных компонентов в тканях роговицы известно немногое. Ранее сообщалось только о том, что из минеральных элементов роговица человека содержит цинк [72]. С развитием методов элементного анализа еще несколько металлов было обнаружено в здоровых тканях роговицы мелких млекопитающих (крысы) – преимущественно кальций и цинк. Относительно высокие концентрации кальция обнаружены в эпителиоцитах. Содержание цинка было выше в базальной части эпителия и задних слоях стромы роговицы. Также в эпителии были картированы железо и медь. Железо было обнаружено и в кератоцитах [236].

О непосредственной роли металлов в метаболизме роговицы также известно относительно немного. Вместе с тем, в настоящее время стало очевидно, что нарушения минерального обмена на системном уровне являются причиной патологических изменений роговицы, а на местном – проявляются симптоматически при некоторых ее заболеваниях.

В доступной литературе имеются немногочисленные данные об изменениях роговицы при нутритивной недостаточности минеральных элементов. Так, при нехватке магния в пище у крыс ученые наблюдали повышение концентраций кальция в плазме крови, уменьшение количества микроворсинок и микроскладок поверхностных эпителиоцитов, увеличение количества митохондрий аномальной формы в базальных эпителиоцитах, конденсацию хроматина в ядрах базальных клетках эпителия, отложения депозитов высокой плотности и макрофагоподобные клетки в субэпителиальных слоях стромы роговицы, эндотелиоциты пентагональной и квадратной формы, истончение и фрагментацию клеточных мембран, дегенерацию клеток и коллагеновых волокон, увеличение размеров митохондрий, нарушение синтеза белков [130, 229]. При алиментарной недостаточности цинка у крыс выявлено уменьшение количества микроворсинок и микроскладок поверхностных клеток эпителия роговицы, а также неоваскуляризация передних слоев стромы и увеличение количества миелинизированных волокон роговицы [72, 144, 168].

В плазме крови пациентов, страдающих резистентной формой язвы роговицы, обнаружена существенно сниженная по сравнению с нормой концентрация цинка [201].

Лентовидная кератопатия ассоциирована с гиперкальциемией, вызванной системными состояниями, такими как гиперпаратиреоз, интоксикации витамином D, метастатическое поражение костей, саркоидоз [245].

Некоторые разновидности дистрофии Фукса (Fuchs Е.) вызваны мутацией гена ZEB1, ответственного за синтез белков-доменов типа «цинковые пальцы», или «цинк-пальцевых» белков, являющихся факторами транскрипции [184, 211]. Мутации гена ZNF469, кодирующего синтез белковдоменов типа «цинковые пальцы», выявлены в 23% случаев КК. Мутации этого гена являются причиной развития «синдрома ломкой роговицы» (англ.

brittle cornea syndrome) с аутосомно-рецессивным типом наследования, проявляющегося истончением и спонтанной перфорацией роговицы [238].

В результате нарушения обмена меди с ее избыточным накоплением в тканях формируется кольцо Кайзера–Флейшера (Kayser В., Fleischer В.); это наблюдают при болезни Вестфаля–Вильсона–Коновалова (Westphal K.F.O., Wilson S.A.K., Коновалов Н.В.), обусловленной дефицитом церулоплазмина, а также при других состояниях, сопровождающихся гиперкупремией [31, 71, 124, 206].

О взаимосвязи КК с системными нарушениями метаболизма металлов свидетельствуют и результаты многочисленных исследований.

Недостаточность магния в организме приводит к молекулярным и цитологическим изменениям в роговице, характерным для КК [229]. В плазме крови у пациентов с КК зафиксировали увеличенное содержание титана и свинца и уменьшенное – алюминия, никеля и цинка [46, 198]. При содержании собак и крыс на диете с низким содержанием кальция и витамина D у них наблюдали развитие КК [155, 156].

Нарушение минерального обмена непосредственно в роговице сопровождает некоторые ее заболевания. Лентовидная кератопатия – дегенеративное заболевание роговицы, при котором происходит отложение солей кальция под эпителием в боуменовой мембране, в базальной мембране эпителия и в передних слоях стромы [31, 141].

Кольцо Кайзера–Флейшера является метаболической кератопатией, развивающейся в результате отложения меди в периферической части десцеметовой мембраны [31]. Случаи отложения меди на границе десцеметовой мембраны и эндотелия на средней периферии роговицы были зарегистрированы при применении эстроген-содержащих оральных контрацептивов, и в центральной оптической зоне – при выраженной гиперкупремии [71, 124, 206].

При анализе пигментаций роговицы особую роль отводят обмену железа [125, 173]. Отложение железа в эпителии на границе средней и нижней трети роговицы наблюдают у пожилых лиц в виде линии Хадсона– Стэли (англ. Hudson A.C., Stahli J.) [194, 195].

Имеются сообщения о формировании пигментированной дуги в пределах эпителия центральной оптической зоны роговицы в результате оптической коррекции гиперметропии жесткими контактными линзами (ортокератология) [101, 154].

Характерным проявлением птеригиума является линия Стокера (Stocker F.W.) в эпителии роговицы, прилежащая к головке птеригиума в зоне его роста [159].

Эпителиальное отложение железа в зоне роговицы, смежной с фильтрационной подушкой, формируемой в процессе антиглаукомной хирургической операции, именуют линией Ферри (Ferry A.P.) [245].

Образование пигментированных отложений в эпителии также возможно в результате хирургических вмешательств на роговице:

имплантации интрастромальных роговичных колец, радиальной кератотомии, фоторефракционной кератэктомии (англ. photorefractive keratectomy, или PRK) и лазерного кератомилеза (англ. laser-assisted in situ keratomileusis, или LASIK) [76, 160, 205, 222].

При КК в тканях роговицы обнаруживали дисбаланс концентраций цинка, железа и меди [8, 52].

1.2.3. Современные представления о кольце Флейшера

При обследовании пациентов с КК можно выявить ряд морфологических изменений роговицы, характерных для данного заболевания, в том числе пигментное кольцо Флейшера, расположенное в основании конуса (парацентральная зона роговицы) [151, 240]. Согласно данным литературы пигментное кольцо встречается в 57% случаев КК и является наиболее часто обнаруживаемым при биомикроскопии симптомом.

Как правило, его выявляют при средней или развитой стадии КК; некоторые авторы этот симптом считают признаком прогрессирования заболевания [81, 113, 240].

В 1906 г. в Мюнхенском Медицинском Еженедельнике появилась статья «О кератоконусе и об особом пигментном образовании в роговице»

(нем. «ber keratokonus und eigenartige pigmentbildung in der kornea», журнал «Mnchener Medizinische Wochenschrift») немецкого врача Бруно Флейшера (Fleischer Bruno). Автор связывал появление пигментного кольца с эпителиальными отложениями гемосидерина вследствие нарушения сферичности роговицы и последующего аномального неравномерного распределения слезной пленки в основании эктазии [240]. Тем не менее, пигментное кольцо может образовываться и на начальной стадии КК, даже если по данным кератотопографии роговица еще не изменена.

При гистологическом исследовании в сочетании с качественной химической реакцией на железо с «берлинской лазурью» было доказано присутствие этого элемента в зоне пигментного кольца – депозиты синего цвета, расположенные в базальных клетках эпителия кератоконусной роговицы [36].

«Берлинская лазурь», или «прусский синий», – синий пигмент, комплексное соединение, коллоидный раствор смеси гексацианоферратов (II) железа (III) от KFe3+[Fe(CN)6] до Fe3+4[Fe(CN)6]3. «Берлинскую лазурь»

получают, добавляя к растворам гексацианоферрата (II) калия K4[Fe(CN)6] соли трехвалентного железа (III), то есть ион железа (III):

Fe3+ + K4[Fe(CN)6] 3K+ + KFe3+[Fe(CN)6] (синий осадок) [45].

Таким образом, качественная химическая реакция доказывает только наличие иона железа (III). Методами аналитической химии присутствие других элементов в роговице при КК не определяли. Данные о наличии гемосидерина или других содержащих железо органических соединений в зоне кольца Флейшера в доступной специальной литературе отсутствуют.

В настоящее время применение современных методов аналитической химии позволило определить наличие других химических элементов в зоне пигментного кольца: С.Э. Аветисов и соавт. (2011) обнаружили избыточное накопление элементов халькофильной группы с одновременным их отсутствием в центральной зоне роговицы [8].

1.3. Понятие о физико-химическом барьере

Согласно геохимической классификации элементов, введенной норвежским геофизиком В.М. Гольдшмидтом (Goldschmidt V.M.) в 1937 и 1954 г., все химические элементы разделены на четыре группы:

– литофильные (элементы горных пород – кальций и магний);

– халькофильные (медь и обладающие сродством к ней – цинк и свинец);

– сидерофильные (железо и обладающие сродством к нему – никель);

– атмофильные (элементы атмосферы) [242].

Некоторые из них обладают двойственным характером.

Объединяющим фактором элементов в группах являются сходные физикохимические свойства, то есть общность характерных химических превращений атомов при определенных физических условиях. Эти свойства при однонаправленном воздействии внешних факторов приводят к их совместному накоплению во всевозможных средах.

Понятие «геохимические барьеры» изначально было введено в геохимии. Под ним подразумевались «участки земной коры, где на коротком расстоянии происходит резкое уменьшение интенсивности миграции химических элементов и, как следствие, их концентрации». За последние 50 лет произошло существенное расширение области применения термина «геохимические барьеры». Процессы миграции и осаждения химических элементов на «геохимических барьерах» уже рассматривают и анализируют не только в геологии, но и в различных сферах естествознания, включая медицину [11].

Выделяют три основных класса геохимических барьеров:

– физико-химические, образующиеся в результате изменения физикохимических условий (осаждение элементов, миграция которых происходит в средах с различными окислительно-восстановительными и кислотноосновными свойствами); ключевое значение имеет изменение формы существования химического элемента, при меньшей значимости его перемещения в пространстве;

– механические;

– биогеохимические [11].

По сути одни и те же геохимические барьеры могут лежать в основе различных явлений. Рассмотрим варианты физико-химического барьера на реакции преобразования двухвалентного железа в трехвалентное:

Fe2+ + 3 H2O Fe(OH)3 + 3 H+ [11].

Пример природного барьера – железосодержащие термальные источники. Типичный пример техногенного барьера – ржавчина, образующаяся на поверхности сантехнических коллекторов.



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |
Похожие работы:

«Покровский Вадим Сергеевич Новые подходы к созданию и экспериментальному изучению препаратов на основе противоопухолевых ферментов Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук 14.01.12. Онкология 03.01.04. Биохимия...»

«Лебедев Артем Евгеньевич МОДЕЛИРОВАНИЕ И МАСШТАБИРОВАНИЕ ПРОЦЕССОВ ПОЛУЧЕНИЯ АЭРОГЕЛЕЙ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ МАТЕРИАЛОВ НА ИХ ОСНОВЕ 05.17.08 Процессы и аппараты химических технологий ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата технических наук Научный руководитель доктор технических наук, профессор Н.В. Меньшутина Москва 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение Литературный обзор Типы аэрогелей и способы их получения 1.1...»

«ТОРРЕС МИНЬО КАРЛОС ХАВЬЕР ОЦЕНКА СОРТОВ АМАРАНТА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОХИМИЧЕСКИХ И МОЛЕКУЛЯРНЫХ МЕТОДОВ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ПРОДУКТОВ НА ОСНОВЕ ЛИСТОВОЙ БИОМАССЫ Специальности: 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений 06.01.09 овощеводство Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научные руководители: доктор, б. наук, профессор М. С. Гинс; доцент, к. с-х. наук Е.В....»

«ИВАНОВ ДМИТРИЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ПЕРЕМЕШИВАЮЩЕГО ОБОРУДОВАНИЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ САНИТАРНОГИГИЕНИЧЕСКИХ ИЗДЕЛИЙ 05.21.03 – Технология и оборудование химической переработки биомассы дерева; химия древесины Диссертация на соискание учёной степени кандидата технических наук Научный руководитель д.т.н., проф....»

«Никандрова Мария Владимировна МЕХАНИЗМ ФИКСАЦИИ ВЫСОКОАКТИВНЫХ ОТХОДОВ В ИЗМЕНЕННОМ ПОВЕРХНОСТНОМ СЛОЕ БОРОСИЛИКАТНОГО СТЕКЛА 02.00.14 «Радиохимия» ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата химических наук Научный руководитель: кандидат химических наук, доцент Богданов Роман Васильевич Санкт-Петербург ОГЛАВЛЕНИЕ...»

«ДУРЯГИНА АСИЯ МИНЯКУПОВНА МИНЕРАЛОГО-ГЕОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПЛАТИНОНОСНЫХ ЭЛЮВИАЛЬНЫХ ОБРАЗОВАНИЙ СВЕТЛОБОРСКОГО И НИЖНЕТАГИЛЬСКОГО МАССИВОВ, СРЕДНИЙ УРАЛ Специальность 25.00.09 – Геохимия, геохимические методы поисков полезных ископаемых Диссертация на соискание ученой степени кандидата геолого-минералогических наук...»

«САЛЕНКО ЕЛЕНА АЛЕКСАНДРОВНА ПРОГРАММИРОВАНИЕ УРОЖАЙНОСТИ ОЗИМОЙ ПШЕНИЦЫ В ЗОНЕ УМЕРЕННОГО УВЛАЖНЕНИЯ НА ОСНОВЕ ОПТИМИЗАЦИИ ПРИМЕНЕНИЯ МИНЕРАЛЬНЫХ УДОБРЕНИЙ 06.01.04 агрохимия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учной степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный руководитель: доктор сельскохозяйственных наук, профессор Есаулко...»

«                      ШИЛЯЕВА ЮЛИЯ ИГОРЕВНА ИССЛЕДОВАНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ ФАЗОВЫХ ПЕРЕХОДОВ I РОДА В НИТЕВИДНЫХ НАНОКРИСТАЛЛАХ (In, Sn, Zn) В ПОРАХ АНОДНОГО Al2O3 Специальность 02.00.04 – физическая химия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата химических наук Научный руководитель: доктор...»

«КИРЕЕВА ГАЛИНА СЕРГЕЕВНА ВНУТРИБРЮШИННОЕ ХИМИОПЕРФУЗИОННОЕ ЛЕЧЕНИЕ ДИССЕМИНИРОВАННОГО РАКА ЯИЧНИКА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Специальность: 14.01.12 онкология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор медицинских наук В.Г. Беспалов Санкт-Петербург ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК...»

«ВИННИЦКИЙ ДМИТРИЙ ЗИНОВЬЕВИЧ СИНТЕЗ И ИЗУЧЕНИЕ АНТИКОАГУЛЯНТНОЙ АКТИВНОСТИ ОЛИГОСАХАРИДОВ, РОДСТВЕННЫХ РАЗВЕТВЛЕННЫМ ФРАГМЕНТАМ ФУКОИДАНА ИЗ ВОДОРОСЛИ CHORDARIA FLAGELLIFORMIS 02.00.03 – органическая химия 02.00.10 – биоорганическая химия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата химических наук Научные руководители: с.н.с., к.х.н. Устюжанина Н.Е. н.с., к.х.н....»

«КОННИКОВ АНДРЕЙ ВАЛЕРЬЕВИЧ ФТОРОРГАНИЧЕСКИЕ РАЗБАВИТЕЛИ ТБФ В ПРОЦЕССАХ ЭКСТРАКЦИОННОГО ИЗВЛЕЧЕНИЯ АКТИНИДОВ ИЗ АЗОТНОКИСЛЫХ РАСТВОРОВ 02.00.14 – Радиохимия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата химических наук Научный руководитель: Член-корреспондент РАН Тананаев Иван Гундарович ОЗЁРСК – 201 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 1.1...»

«Шахгильдян Георгий Юрьевич Фосфатные стекла, активированные наночастицами металлов и ионами редкоземельных элементов Специальность 05.17.11 – Технология силикатных и тугоплавких неметаллических материалов Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук Научный руководитель доктор химических наук, профессор В.Н. Сигаев Москва 2015год Оглавление Введение Глава 1. Аналитический обзор...»

«ФЕДОРЕНКО АНДРЕЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ УДК 621.357.2+661.872:882 ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКИЙ СИНТЕЗ ТИТАНА(ІІІ) СУЛЬФАТА В ТЕХНОЛОГИИ ПРОИЗВОДСТВА ТИТАНА(IV) ОКСИДА 05.17.03 – техническая электрохимия Диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук Научный руководитель: Першина Екатерина Дмитриевна, доктор химических наук, доцент Симферополь – 2015 г. СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ.. 1....»

«ГОЛИВЕЦ ЛИДИЯ ТУХФАТОВНА БОЛЕЗНЬ ФАБРИ: КЛИНИКО-БИОХИМИЧЕСКИЙ И МОЛЕКУЛЯРНО – ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ У РОССИЙСКИХ ПАЦИЕНТОВ 03.02.07 «генетика» Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: Д.м.н. Захарова Е.Ю. Москва 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ ОГЛАВЛЕНИЕ..2 ВВЕДЕНИЕ...6 Актуальность темы исследования..6 Степень разработанности темы исследования.8 Цель...»

«УДК 622.276.6 Диева Нина Николаевна ГИДРОДИНАМИЧЕСКОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ ТЕРМОХИМИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ НА ПЛАСТЫ ТРУДНОИЗВЛЕКАЕМЫХ УГЛЕВОДОРОДОВ Специальность: 01.02.05 – Механика жидкости, газа и плазмы диссертация на соискание учёной степени кандидата технических наук Научный руководитель: кандидат физико-математических наук Кравченко Марина Николаевна МОСКВА 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1....»

«Соколова Татьяна Владимировна МЕТОДИКА ИНТЕГРАЛЬНОЙ ЭКОЛОГО-ГЕОХИМИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ ДОННЫХ ОТЛОЖЕНИЙ ИСКУССТВЕННО СОЗДАННЫХ ВОДНЫХ ОБЪЕКТОВ В УСЛОВИЯХ ПРИРОДНОГО И ТЕХНОГЕННОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ Специальность 25.00.36 – «Геоэкология» (науки о Земле) Диссертация на соискание ученой степени кандидата географических наук...»

«ОХЛОПКОВ АЛЕКСЕЙ СЕРГЕЕВИЧ СВОЙСТВА ТОВАРНОЙ СЫРОЙ НЕФТИ, ПОЗВОЛЯЮЩИЕ ИДЕНТИФИЦИРОВАТЬ ИСТОЧНИК НЕФТЯНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ ОКРУЖАЮЩЕЙ ПРИРОДНОЙ СРЕДЫ 03.02.08 Экология (химические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук Научный руководитель: Доктор химических наук, профессор ЗОРИН...»

«ХОРОХОРИН АЛЕКСАНДР ЕВГЕНЬЕВИЧ Стратегия развития современных нефтехимических комплексов, мировой опыт и возможности для России Специальность: 08.00.14. – Мировая экономика Диссертация на соискание ученой степени кандидата экономических наук Научный руководитель доктор экономических наук, профессор, член-корреспондент РАН Е.А. Телегина Москва – 201 Оглавление ВВЕДЕНИЕ Глава 1. Современный нефтехимический сектор в структуре мировой экономики 1.1. Современный мировой...»

«РАЕНБАГИНА ЭЛЬМИРА РАШИДОВНА СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНИЧЕСКОЙ ЭКСПЛУАТАЦИИ ГАЗОБАЛЛОННЫХ АВТОМОБИЛЕЙ ПУТЕМ ОБЕСПЕЧЕНИЯ ВОЗМОЖНОСТИ СЛИВА ГАЗА Специальность 05.22.10 – Эксплуатация автомобильного транспорта Диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук Научный руководитель доктор технических наук, профессор Певнев Н.Г. Омск –...»

«Волков Алексей Владимирович ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ РАЗЛИЧНЫХ СПОСОБОВ, ФОРМ И ДОЗ ЦИНКОВЫХ УДОБРЕНИЙ ПОД ЯРОВУЮ ПШЕНИЦУ НА ДЕРНОВО-ПОДЗОЛИСТЫХ ПОЧВАХ Специальность 06.01.04-агрохимия Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических...»









 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.