WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 

Pages:   || 2 |

«ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ И ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ТУБЕРКУЛЕЗА В ЯКУТИИ, УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ...»

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

ПРОТОДЬЯКОНОВА ГАЛИНА ПЕТРОВНА

ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ И ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ

ОСОБЕННОСТИ ТУБЕРКУЛЕЗА В ЯКУТИИ,

УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ

И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ

06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология,



эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Новосибирск 2015

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего образования «Якутская государственная сельскохозяйственная академия»

Научный консультант: Неустроев Михаил Петрович, доктор ветеринарных наук, профессор

Официальные оппоненты: Данко Юрий Юрьевич, доктор ветеринарных наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Санкт- Петербургская государственная академия ветеринарной медицины», профессор кафедры;

Власенко Василий Сергеевич, доктор биологических наук, доцент, ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных», заведующий лабораторией;

Линева Зинаида Ефремовна, доктор медицинских наук, профессор ФГАОУ ВПО «Северо-Восточный федеральный университет им. М.К. Аммосова», заведующая кафедрой

Ведущая организация: ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко»

Защита состоится «____» декабря 2015 г.

в _______часов на заседании диссертационного совета Д.006.045.01, созданного на базе ФГБНУ «Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока» по адресу:

630501, Новосибирская область, Новосибирский район, п. Краснообск, ФГБНУ ИЭВСиДВ, а/я 8, тел./факс (383) 348-44-62, E-mail: dis.ievsidv@list.ru

С диссертацией можно ознакомиться в Сибирской научной сельскохозяйственной библиотеке и на сайте ИЭВСиДВ: www.ievsidv.ru; автореферат размещен на сайте ВАК РФ: www.vak2.ed.gov.ru

Автореферат разослан «____»____________ 2015 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, Стеблева канд. ветеринар. наук, доц. Галина Михайловна

1

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Несмотря на достигнутые успехи, туберкулез, как животных, так и человека, остается одним из наиболее сложных, социально опасных и экономических значимых инфекций в мире, в том числе в России, и включен в перечень карантинных и особо опасных болезней животных (Приказ МСХ РФ № 81 от 17.05.2005).

Экстремальные природно-климатические условия Республики Саха (Якутия) в значительной мере влияют на гомеостаз сельскохозяйственных животных и обуславливают особенности проявления эпизоотического процесса инфекционных болезней, в том числе туберкулеза крупного рогатого скота.

В настоящий период в Якутии при содержании крупного рогатого скота в крестьянских, фермерских хозяйствах и подворьях граждан многократно возрос контакт населения с животными, что повысило риск взаимного заражения возбудителями болезней, свойственных животным и человеку, в том числе туберкулеза. При этом продукты питания не подвергаются ветеринарно-санитарному контролю и обработке, что приводит к заражению населения, особенно детей.

И, наоборот, животным постоянно скармливаются остатки пищи, контаминированные возбудителем туберкулеза, если семья представляет собой эпидемический очаг, в котором проживают больные люди. Взаимное заражение туберкулезом крупного рогатого скота и их владельцев в период относительного эпизоотического благополучия вызывает необходимость постоянного мониторинга за эпизоотическим и эпидемическим состоянием в тесном взаимодействии медицинской и ветеринарной служб.

В настоящее время в эпизоотологии туберкулеза на территории региона актуальной остается проблема неспецифической реактивности крупного рогатого скота к туберкулину, обуславливающей необоснованный убой продуктивных животных и большие экономические потери, что требует разработки методов дифференциальной диагностики.

В проблеме туберкулеза не до конца решены вопросы прижизненной диагностики для некоторых видов животных (северные олени, лесные бизоны), бактериологической, молекулярно-генетической на фоне неспецифической реактивности животных к туберкулину, а также специфической профилактики с использованием вакцины БЦЖ, решение которых актуально для науки и практики.





В последние годы сформировалось новое направление профилактики инфекционных болезней с помощью пробиотиков, являющихся антагонистами ряда возбудителей, в том числе микобактерий, в связи с чем актуально развитие этого направления.

Степень разработанности проблемы. Неоспоримо доказана тесная взаимосвязь заболеваемости туберкулезом животных, в том числе крупного рогатого скота, и человека (Р.В. Тузова, 1975; Я.А. Благодарный, 1984; А.С. Донченко, 1992; Е.Н. Писаренко, 1992; D. Cousins, D. Dawson, 1999; A. Sanami, 1999;

L. Legout., 2001; I. Pavlic, 2004; I. Kanter, 2004). С учетом новых условий хозяйствования требуется разработка комплексных региональных программ профилактики взаимного заражения патогенными возбудителями туберкулеза.

Одним из основных звеньев эпизоотической цепи при инфекционных болезнях является восприимчивое животное, в связи с чем ведущую роль играет специфическая профилактика (А.И. Бакулов, 1979), основы которой при туберкулезе животных с применением вакцины БЦЖ заложены М.М. Авербахом (1970), Б.Я. Хайкиным (1972), М.А. Сафиным (1981), В.И. Пионтковским (1982). Однако, как показала практика, ее эффективность не превышает 70%.

Предприняты попытки повышения иммуногенности вакцины БЦЖ с помощью иммуностимулирующих и иммунокоррегирующих препаратов (В.И. Литвинов и др., 1982; Б.М. Туякбаева и др., 1986; Л.А. Шарашенидзе, 1988; Г.Н. Спиридонов, 1988; С.Д. Басыбекова, 1995; А.С. Жумаш и др., 1995;

1995–2000; 2001; Р.А. Хамзин, 2006), но они не нашли практического применения. Перспективным является повышение протективных свойств вакцины БЦЖ с сочетанным применением иммуномодуляторов (Ю.С. Аликин, 1988;

Н.А. Александров и др., 1995-2000; А.С. Донченко, Н.А. Донченко, 2000;

И.П. Хабузов, 2001), в том числе препаратов РНК, способных усиливать специфический иммунитет (Э.Н. Шляхов, 1984; М.Н. Блинов, 1987; В.А. Фадина и др., 1988; А.М. Земсков и др., 1989; Ю.С. Аликин, 1998; А.С. Донченко, 2004).

Установлено антагонистическое действие пробиотиков на возбудителей ряда инфекционных болезней (И.Б. Павлова, 2005; А.Л. Лазовская и др., 2009;

Н.Д. Архипова, 2009; М.П. Неустроев и др., 2010; А.Н. Панин, 2012), а также предложен способ повышения антагонистической активности пробиотика из штамма бактерий Bacillus subtilis к патогенным микобактериям туберкулеза (М.А. Кульчицкая и др., 2008), однако способ предусматривает определение активности путем установления индекса блокирования роста микобактерий в течение длительного времени и отличается трудоемкостью.

Цель и задачи исследований. Целью исследований явилось эпизоотологическое и эпидемиологическое обоснование и разработка комплекса мероприятий по профилактике взаимного заражения туберкулезом животных и человека в Якутии, усовершенствование методов диагностики и специфической профилактики туберкулеза.

В задачи исследований входило:

– изучить особенности эпизоотического процесса туберкулеза крупного рогатого скота в природно-климатических условиях Якутии;

– усовершенствовать комплекс диагностических мероприятий при туберкулезе животных;

– определить взаимосвязь заражения крупного рогатого скота и населения возбудителями туберкулеза M. bovis и M. tuberculosis, разработать медиковетеринарные мероприятия в эпидемических очагах риска туберкулеза;

– разработать способ профилактики туберкулеза животных с использованием вакцины БЦЖ и иммуномодулятора полирибоната;

– изучить антагонистическое действие бактерий Bacillus subtilis к патогенным микобактериям.

Научная новизна. Дан ретроспективный анализ эпизоотической и эпидемической ситуации по туберкулезу Республики Саха (Якутия). Установлена взаимосвязь заболеваемости крупного рогатого скота и населения туберкулезом в РС (Я). Определены и взяты на учет эпидемические очаги туберкулеза, как потенциальные источники заражения крупного рогатого скота M. tuberculosis.

Предложены оптимальные технологические методы прижизненной диагностики туберкулеза северных оленей и лесных бизонов при содержании в природных парках.

Изучено влияние аэрации питательных сред на скорость роста разных видов патогенных и атипичных микобактерий, дана оценка информативности плотных и жидких питательных сред при культивировании микобактерий.

Определена диагностическая ценность детекции ДНК микобактерий туберкулеза методом ПЦР в биоматериале от крупного рогатого скота благополучных по туберкулезу хозяйств, ранее являвшихся неблагополучными, а также информативность теста при исследовании разного вида биоматериала.

Впервые установлена активизация эпизоотического процесса туберкулеза и неспецифической реактивности животных к туберкулину через 6–8 лет после всплеска солнечной активности, выраженной в числах Вольфа.

Установлена взаимосвязь неспецифических реакций на туберкулин с рядом болезней и патологическими процессами во внутренних органах.

Дано теоретическое обоснование и экспериментально установлена возможность повышения иммуногенных свойств вакцины БЦЖ при сочетанном применении с иммуномодулятором полирибонатом.

Экспериментально испытаны штаммы бактерий Bacillus subtilis, выделенных из мерзлотных почв Якутии. Установлены их антагонистические свойства к микобактериям туберкулеза обуславливающие снижение вирулентности за счет задержки образования корд-фактора.

Научная новизна исследований подтверждена патентами РФ на изобретения: «Способ профилактики туберкулеза животных» № 1790414 от 23.01.1993 г.

и «Способ подавления корд-фактора микобактерий туберкулеза», № 2422150 от 27.06.2011 г.

Теоретическая и практическая значимость. Установленные региональные особенности эпизоотического процесса туберкулеза крупного рогатого скота во взаимосвязи с эпидемической ситуацией в РС (Я) дополняют и расширяют имеющиеся данные и вносят определенный вклад в теорию и практику проблемы профилактики и ликвидации туберкулеза. Результаты исследований могут быть реализованы в системе противоэпизоотических и противоэпидемических мероприятий, а также в учебном процессе ВУЗов и нашли отражение в нормативно-технических и научно-методических документах, регламентирующих мероприятия при туберкулезе.

Комплексные медико-ветеринарные мероприятия в очагах туберкулезной инфекции реализуются во всех подсобных и крестьянских хозяйствах (подворьях) Якутии, в которых при профилактических аллергических исследованиях на туберкулез выявляются реагирующие на туберкулин животные или, по данным Роспотребнадзора – больные туберкулезом люди.

Мероприятия по дифференциальной диагностике туберкулеза крупного рогатого скота с применением уменьшенной дозы ППД туберкулина для млекопитающих и ПЦР-диагностики внедрены в хозяйствах улусов Якутии.

Схема специфической профилактики туберкулеза с использованием вакцины БЦЖ и иммуномодулятора полирибоната (использована при разработке «Наставления по применению полирибоната в ветеринарии в качестве иммуномодулятора») позволяет эффективно защитить молодняк крупного рогатого скота от заражения. Схема внедрена на 37 фермах (21,1 тыс. телят) модельного района Новосибирской области.

Результаты исследований явились основой учебно-методических пособий «Краевая эпизоотология Республики Саха (Якутия)» и «Лабораторная диагностика туберкулеза крупного рогатого скота», рекомендованных УМО высших учебных заведений РФ по образованию в области зоотехнии и ветеринарии, а также учебного пособия «Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота», зарегистрированного в качестве электронного ресурса Российской Академией образования, как отвечающее требованиям новизны и приоритетности.

Методология и методы исследований. Объектом исследований явились статистические данные, экспериментальные препараты, лабораторные и сельскохозяйственные животные, биологический материал, культуры патогенных и атипичных микобактерии, питательные среды для культивирования микобактерий, методы диагностики туберкулеза. Предмет исследований – научное обоснование, разработка и усовершенствование методов диагностики, специфической профилактики и взаимодействия ветеринарной и медицинской служб в системе противоэпизоотических мероприятий при туберкулезе.

В работе использовали аналитический, эпизоотологический, эпидемиологический, аллергический, патологоанатомический, бактериологический, серологический, иммунологический, гематологический, молекулярно-генетический, статистический и экономический методы исследований.

Основные положения, выносимые на защиту:

– особенности эпизоотического и эпидемического процесса туберкулеза на территории Республики Саха (Якутия), их взаимосвязь и мероприятия по профилактике;

– усовершенствованный комплекс диагностических исследований при туберкулезе животных;

– способ профилактики туберкулеза крупного рогатого скота с сочетанным применением вакцины БЦЖ и иммуномодулятора полирибоната;

– антагонистическое действие пробиотика «Сахабактисубтил» на биологические свойства микобактерий туберкулеза.

Степень достоверности и апробация результатов. Достоверность результатов обусловлена большим объемом статистического и экспериментального материала, использованием современных методов и методик исследований, производственным испытанием и статистической обработкой данных.

Результаты исследований доложены на международных, всероссийских и региональных научно-практических конференциях и симпозиумах: «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Л., 1989), III Всесоюзной конференции по эпизоотологии (Новосибирск, 1991), «Основные научные исследования по туберкулезу с.-х. животных в Сибири» (Новосибирск, 1995), «Актуальные проблемы ветеринарно-санитарного контроля сельскохозяйственной продукции» (М., 1997), «Региональные проблемы сельскохозяйственного производства в РС (Я)» (Якутск, 1999), «Современные проблемы туберкулеза ХХI века» (Томск, 1999), «Проблемы стандартизации и развития сельского хозяйства Казахстана, Сибири и Монголии» (Алма-Ата, 2000), молодых ученых аграрных ВУЗов России (Якутск, 2003), симпозиуме Японо-Российского медицинского обмена (Ниигата, 2004), «Актуальные вопросы ветеринарной медицины»

(Новосибирск, 2004), «Современные проблемы эпизоотологии» (Новосибирск, 2004), «Проблемы и перспективы ветеринарии в XXI веке» (Улан-Удэ, 2005), «Наука в аграрном вузе: инновации, проблемы и перспективы» (Якутск, 2006), «Энтузиазм и творчество молодых ученых в развитии фундаментальной и прикладной науки» (Троицк, 2006), ХII Международной конференции по арктическим животным (Якутск, 2007), «Актуальные проблемы инфекционных болезней животных, рыб и пчел» (М., 2011), «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии и медицине» (С.-Пб., 2011), Польша (Пшемысль, 2012), «Здоровьесбережение народа: интеграция Восток– Запад» (Якутск, 2014), «Найновите научни постижения» (София, 2014).

Публикация материалов исследований. По теме диссертации опубликованы 63 научные работы, в том числе 14 статей, в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ («Аграрная наук», «Ветеринарная патология», «Сибирский вестник сельскохозяйственной науки», «Зоотехния», «Аграрный вестник Урала», «Вестник ветеринарии», «Вестник РАСХН», «Ветеринарная медицина», «Якутский медицинский журнал»). Получено 2 патента на изобретения РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 305 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 49 таблицами, 21 рисунком и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, заключения, списка использованной литературы (664 источника, из них 104 зарубежных авторов) и 15 приложений.

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 Материал и методы исследований

Работа выполнена в 1985-2014 гг. на кафедре «Паразитология и эпизоотология животных» ФГБОУ ВПО «Якутская государственная сельскохозяйственная академия» Министерства сельского хозяйства Российской Федерации в соответствии с тематическими планами НИР 02.02.03. «Усовершенствовать бактериологический метод диагностики туберкулеза животных»; 08.02.02. «Разработать систему контроля за проявлением микобактериозов крупного рогатого скота в Якутии». Отдельные исследования проведены в ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока и ГНУ Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Россельхозакадемии, а также совместно с НПО «Фтизиатрия» МЗ РС (Я), территориальными управлениями «Роспотребнадзора» в рамках целевых республиканских программ «Комплексный план мероприятий по обеспечению ветеринарного благополучия животноводства Республики Саха (Якутия) на 1997–2000 годы», «Неотложные меры борьбы с туберкулёзом в Якутии на 1998–2004 годы» и «Неотложные меры борьбы с туберкулёзом в Якутии на 2005–2011 годы», в разработке которых мы приняли непосредственное участие.

В процессе работы использовали следующие экспериментальные препараты: вакцина БЦЖ производства Ставропольского НИИ вакцин и сывороток;

иммуномодулятор полирибонат – односпиральная РНК (получен в НИКТИ БАВ ГНЦ БВ «Вектор», г. Бердск); пробиотики из штаммов бактерий Bacillus subtilis, выделенных из мерзлотных почв Якутии. В опытах использовали музейные штаммы патогенных M. bovis (шт. 14, ВНИИБТЖ; шт. 8), M. tuberculosis (шт. Н37Rv и шт. 492, изолированный от больного туберкулезом человека), M. avium (шт. 19) и атипичных M. smegmatis, M. fortuitum, M. intracellulare, белый стафилококк (шт. 209 Р) культур микобактерий.

В общей сложности в экспериментах использовали 1130 голов крупного рогатого скота разного возраста, 150 северных оленей, 25 лесных бизонов, 490 морских свинок, 54 кролика, 60 белых мышей, 28 кур.

В исследованиях использовали следующие методы:

Аналитический и монографический – при анализе научной литературы по проблеме туберкулеза животных и человека, написании учебнометодических пособий и рекомендаций, включающих материалы диссертации.

Эпизоотологический и эпидемиологический – при анализе эпизоотической и эпидемической ситуации по туберкулезу по интенсивным и экстенсивным показателям в пространственно-временном диапазоне (В.Д. Беляков, 1979;

С.И. Джупина, 1991; Л.Б. Черкасский, 1994; И.А. Бакулов и др., 2001).

Сведения по эпизоотологии и эпидемиологии туберкулеза получены в Департаменте ветеринарии МСХ РС (Я), МЗ РС (Я), Якутском НИИ туберкулеза МЗ РФ. Использованы также результаты собственных аллергических, патологоанатомических, иммунологических и бактериологических исследований.

Аллергический – на лабораторных животных, крупном рогатом скоте и северных оленях в соответствии с «Наставлением по применению (ППД) туберкулинов для млекопитающих и для птиц» (1999) с туберкулинами различных серий ФГУП «Курская биофабрика».

Патологоанатомический. На крупном рогатом скоте – для послеубойной экспертизы реагирующих на туберкулин, на лабораторных животных – в опытах с заражением культурами микобактерий и суспензией биоматериала согласно «Наставлению по диагностике туберкулеза животных» (1986, 2002).

Экспертизе подвергали внутренние паренхиматозные органы, кишечник и лимфатические узлы. Индекс пораженности туберкулезом органов определяли по методикам В. Войтека (1963), А.И. Тогуновой (1965), А.А. Триус (1976).

Бактериологический (микроскопический, культуральный, биологический)

– согласно «Наставлению по диагностике туберкулеза животных» (2002) и «Методам лабораторной диагностики туберкулеза», ГОСТ 26072–89, СТ СЭВ 3457–81). Биологическую пробу ставили на морских свинках, кроликах и курах.

Загрузка...

Мазки для прямой микроскопии окрашивали по Цилю-Нильсену и просматривали под микроскопом «Микмед 6» (увеличение 1000). Препараты фотографировали с помощью цифровой камеры микроскопа (модель DСМ 500, 5 МПикс., USB 2.0) в программе MiniSee. В люминесцентной микроскопии препараты окрашивали аурамином.

Для культивирования микобактерий использовали плотные (ЛевенштейнаЙенсена, Финн-2, Гельберга, Павловского) и жидкие (ВКЛ, Сотона, Моделя, ГДР, Школьниковой) питательные среды. Суспензии различных концентраций микобактерий готовили методом последовательных разведений биомассы в физиологическом растворе (Методические рекомендации «Современные методы микробиологической диагностики туберкулеза». М., 1975). Учет и оценку колоний культур микобактерий проводили по схеме Г.Н. Першина (1971).

Серологический. Использован для определения содержания в сыворотке крови экспериментальных животных комплементсвязывающих антител в РСК с комплексным туберкулезным антигеном Украинского НИИЭВ. Титры антител учитывали в крестах и натуральных логарифмах (В.И. Левенсон, 1969).

Иммунологический – при изучении клеточного иммунитета в реакции бласттрансформации лимфоцитов (М.М. Авербах, 1974; М.А. Сафин, 1980); реакции специфического лизиса лейкоцитов (А.Д. Адо, 1963); опсоно-фагоцитарной реакции (С.И. Плященко, В.Т. Сидоров, 1980; П.Н. Смирнов и др., 1989); уровня общего белка (рефрактометрически) и его фракций (электрофорез в геле агарозы по В.М. Чекишеву, 1977).

Гематологический. Морфологический состав крови изучали на гематологическом анализаторе «Соваs Мinos Stex» (Австрия). Лейкограмму выводили путем подсчета относительного содержания клеток в мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимза. Содержание Т- и В-лимфоцитов определяли методом Е-ЕАС-розеткообразования (П.Н. Смирнов и др., 2003).

Молекулярно-генетический. Использовали метод ПЦР при исследовании цельной крови, сыворотки крови, носовой слизи, молока, паренхиматозных органов и лимфатических узлов согласно «Наставлению по применению тестсистемы для выявления и дифференциации M. bovis и M. tuberculosis методом полимеразной цепной реакции (ПЦР)» (2002) с тест-системами производства НПО «Нарвак» (2004, 2005) и ООО «Ветбиохим» (2010).

Экономический – при разработке методики и расчете экономического ущерба, причиняемого туберкулезом крупного рогатого скота, неспецифическими реакциями на туберкулин и экономической эффективности схемы дифференциальной диагностики туберкулеза в благополучных по туберкулезу хозяйствах.

Производственное испытание и внедрение. Противоэпизоотические и противоэпидемические мероприятия, разработанные на основе экспериментальных данных, испытаны и внедрены в хозяйствах различных форм собственности Новосибирской области и Республики Саха (Якутия), резервате северных оленей «Табсылын» Якутской государственной сельскохозяйственной академии, питомнике-бизонарии «Усть-Буотама» природного парка «Ленские столбы».

Математическая обработка. Цифровой материал обрабатывали в среде программных приложений «Microsoft Excel» и «StatSoft Statistica 6» по показателям средних значений (M±m), достоверности статистической разницы опытных и контрольных показателей (Р) и коэффициента корреляции (r).

2.2 Результаты исследований 2.2.1 Особенности эпизоотического процесса туберкулеза крупного рогатого скота в природно-климатических условиях Якутии Краткая характеристика территории. Территория Якутии составляет 3083,5 тыс. кв. км и занимает 18,1% территории России. Расположена в зонах многолетней мерзлоты в экстремальных природно-климатических условиях горной, тундровой и таёжной местности. Свыше 40% территории находится за полярным кругом в тундровой зоне. Климат – резко континентальный. Зима продолжительная, суровая. Средняя температура января составляет –40 - –50°С.

Лето короткое, но теплое. Средняя температура июля в Центральной Якутии составляет от +18 до +35° С.

Сельское хозяйство Якутии имеет животноводческое направление. Наиболее развиты мясное и мясомолочное скотоводство, табунное коневодство и оленеводство. Используется пушной, рыбный промысел и клеточное звероводство.

В республики разводят две основные породы крупного рогатого скота:

симментальская и холмогорская, а также местный якутский скот. Сельское хозяйство региона – уникальная, особо сложная производственная, социальноэкономическая и экологическая система, в которой животноводство развивается в чрезвычайно суровых природно-климатических условиях.

Естественная резистентность крупного рогатого скота в Якутии. Показатели естественной резистентности определяли в крови и сыворотке крови коров и телят симментальской и холмогорской пород ОПХ «Красная Звезда». По показателю фагоцитарной активности макрофагов крови у коров и телят проявилась определенная сезонная динамика. Низкий уровень фагоцитоза животных обеих пород выявлен в апреле, высокий – в октябре (табл.1). Уровень фагоцитоза и лизоцимной активности сыворотки крови был выше у симментальского скота во все сезоны года. Комплементарная и бактерицидная активность сыворотки крови животных обеих пород находились на одном уровне.

Полученные данные свидетельствуют, что организм крупного рогатого скота, районированного в Якутии, характеризуется относительно высокой фагоцитарной активностью крови. Так, если в Западной Сибири этот показатель составляет 28,6-39,5% (Н.В. Попова, 1998), то у животных Якутии он оказался выше в 2-2,5 раза, что, по всей вероятности, связано с активацией макрофагального звена иммунной защиты в экстремальных природно-климатических условиях. Показатели естественной резистентности у телят были достоверно выше, чем у взрослых животных. По уровню комплементарной активности сыворотки крови возрастной разницы не выявлено, но установлено достоверное преимущество у потомства симментальской породы в летний период. Лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови в осенний период была достоверно выше у животных симментальской породы.

Таблица1 – Естественная резистентность крупного рогатого скота в Якутии

–  –  –

Таким образом, в экстремальных климатических условиях Якутии крупный рогатый скот симментальской породы обладает более высокой резистентностью, чем холмогорской, что свидетельствует о высокой адаптации первых и предрасположенности холмогорского скота к инфекционным болезням, в том числе туберкулезу.

Ретроспективный анализ эпизоотической ситуации. На территории Якутии туберкулез крупного рогатого скота впервые установлен в 1922 г., однако патологоанатомические признаки его отмечали еще до революции (А.В. Лысков и др., 1980). В 1893-1903 гг. на Якутской городской скотобойне ежегодно уничтожались с характерными для туберкулеза поражениями до 21,4% легких (арх. «Якутский Ветеринар»).

Динамика неблагополучия. В динамике неблагополучия с 1961 г. прослеживается относительная стабильность числа неблагополучных пунктов. В среднем ежегодно в эпизоотический процесс было вовлечено 13 неблагополучных ферм, а общее их количество, с учетом повторяемости, составило 365.

Заболеваемость. Суммарно за анализируемый период выявлено 21,8 тыс.

больного туберкулезом крупного рогатого скота, в основном коров. По относительному показателю заболеваемость составила 0,33% от числа исследованных животных. В отдельные годы этот показатель был в 2–3 раза выше (1964 г. – 0,86%, 1979 г. – 0,67%, 1978 г. – 0,64%, 1973 и 1977 г. – 0,56%).

Очаговость. Интенсивный показатель проявления эпизоотического процесса (среднее количество заболевших животных в одном неблагополучном пункте) составил 90,1 гол. Пик показателя приходился на 1974-1979 гг., а также на период, предшествующий официальному благополучию региона.

Пораженность туш. Установлена высокая пораженность туберкулезом туш больных животных, составившая за период анализа – 6379 гол. или 29,3% от числа убитых. В отдельные периоды показатель превышал 40 (1966, 1980, 1982, 1984 гг.) и даже 50% (1962, 1963 гг.). У 22,3% животных поражения носили генерализованный характер и были подвергнуты технической утилизации.

Взаимосвязь эпизоотического процесса с солнечной активностью. Сопоставление заболеваемости и чисел солнечной активности Вольфа (интернетресурс www.sidc.be/silso/DATA/yearssn.dat) не выявило четкой периодической повторяемости туберкулеза крупного рогатого скота, однако хорошо выражены фазы низкого и высокого уровня показателя с волнообразным характером его динамики и наличие временного сдвига в фазах развития сопоставляемых процессов (рис.1).

Рисунок 1 – Сопоставление временных рядов заболеваемости крупного рогатого скота туберкулезом и чисел солнечной активности Вольфа В корреляционном анализе установлено, что активизация эпизоотического процесса туберкулеза по показателям заболеваемости, очаговости и пораженности туш проявляется с запаздыванием в 6–7 лет после вспышек солнечной активности, выраженной в числах Вольфа (r = 0,65-0,82). Полученные данные имеют важное значение для прогнозирования эпизоотической ситуации по крупным административным территориям.

Экономический ущерб. С учетом коэффициентов ущерба для региона Сибири (Ю.И. Смолянинов, 2006) и поправочных ценовых коэффициентов на продукцию животноводства определен экономический ущерб, причиненный туберкулезом крупного рогатого скота в Якутии за 1961-1988 гг. При выбытии из оборота стада 21,7 тыс. больного скота, экономика животноводства недополучила 61,6 тыс. т молока, 1284 т мяса в живой массе и 12 тыс. голов приплода с общим экономическим ущербом в сумме 583 млн. руб. В структуре преобладали потери молока от снижения качества (сортности) – 64,2%, сокращения срока продуктивного использования коров (10,9%) и вынужденного обеззараживания молока в высокотемпературном режиме (7,1%).

Особенности проявления неспецифических реакций на туберкулин. Во многих хозяйствах при профилактических аллергических исследованиях на туберкулез выявляются реагирующие на туберкулин животные, при убое которых характерных для туберкулеза изменений не обнаруживают и диагноз не подтверждается при бактериологическом исследовании биоматериала. Проявление этих реакций вносит неопределенность в эпизоотическую ситуацию, обуславливает экономические потери от убоя реагирующих на туберкулин животных.

Возникают проблемы при реализации племенных животных.

Динамику проявления изучали по материалам статистической ветеринарной отчетности за 1989–2012 гг., а также результатов собственных исследований. За этот период в благополучных по туберкулезу хозяйствах суммарно дали реакцию на туберкулин почти 14,6 тыс. голов крупного рогатого скота или 0,18% от числа исследованных животных, но в отдельные годы (1996, 2001) показатель превышал 0,4%.

Как и при туберкулезе выявлены фазы активизации неспецифической реактивности крупного рогатого скота к туберкулину, проявляющиеся с лагом запаздывания в 6-7 лет после всплеска солнечной активности (r = 0,62-0,76).

Сезонную динамику изучали в благополучных по туберкулезу хозяйствах Таттинского, Горного, Мегино-Кангаласского и Намского улусов Якутии (1529 гол.) с неспецифическим фоном сенсибилизации к туберкулину. Животных исследовали ППД туберкулином для млекопитающих ежемесячно в течение года. Результаты исследований не показали достоверной разницы в количестве реагирующих на туберкулин животных в различные месяцы, хотя в летний период (июнь, июль, август) реактивность была в 1,3-1,5 раз выше.

Возрастная динамика. Реагирующих на туберкулин животных (144 гол.) распределяли в группы по возрасту. Установлено, что молодняк в возрасте до одного года и коровы 7-9 лет и старше не проявляют реактивности к туберкулину. Невысокий показатель реагирующих (0,4%) установлен у животных в возрасте 1-2 года и наибольший – среди коров 3-7 лет (3,1-3,5%), что, очевидно, связано с более высокой естественной резистентностью в этом возрасте.

Интенсивность проявления. Среднее утолщение кожной складки в месте введения туберкулина у животных благополучных по туберкулезу хозяйств (359 гол.) составило 3,8±1,0 мм, причем основная масса реакций (80%) не превышала 3-4 мм. Утолщение складки на 7-8 мм выявлено у единичных животных (1,4-0,6%), а реакции с интенсивностью 9 мм и выше отсутствовали. У больных туберкулезом животных (278 гол.) среднее утолщение кожной складки при введении туберкулина было достоверно выше (Р0,05), чем у реагирующих животных благополучных стад – 5,3±0,9 мм. При этом у части больных животных интенсивность реакций составила 6-10 мм и выше.

Указанное обстоятельство, на наш взгляд, требует пересмотра параметров оценки реакций на внутрикожное введение ППД туберкулина для млекопитающих в благополучных по туберкулезу хозяйствах. Реагирующим на туберкулин целесообразно считать животное с утолщением кожной складки не менее 5 мм, что снизит количество положительных туберкулиновых проб и позволит более объективно отобрать животных для диагностического убоя.

Гематологический и иммунный статус изучали в благополучных по туберкулезу хозяйствах улусов с развитым скотоводством – Амгинского, Горного, Мегино-Кангаласского, Таттинского и Сунтарского, расположенных в различных природно-климатических зонах РС (Я). Пробы крови (всего 200) реагирующих и не реагирующих (контроль) на туберкулин животных брали в период читки реакций в пластиковые гематологические контейнеры емкостью 0,5 мл с антикоагулянтом ЭДТА, нанесенным методом напыления.

Установлено, что гематологические показатели, лейкограмма и содержание субпопуляций лимфоцитов в периферической крови реагирующего на туберкулин крупного рогатого скота благополучных по туберкулезу хозяйств Якутии имеют свои особенности лишь на популяционно-территориальном уровне, однако значимых изменений опытных и контрольных животных не установлено.

Экономическое значение. Расчеты по разработанной нами методике показали, что вероятный экономический ущерб от необоснованного убоя реагирующих на туберкулин животных из благополучных по туберкулезу хозяйств Якутии за 1989-2012 г. составляет 414,8 млн. руб. При этом экономика животноводства могла потерять 17,5 тыс. т молока (384,5 млн. руб.) и 5,8 тыс. голов приплода (30,3 млн. руб.).

Факторы неспецифической реактивности к туберкулину. Исследования Н.И. Прокопьевой и др. (2006, 2007), Г.Г. Спиридоновой (1996), Н.А. Обоевой (2004) и результаты собственных исследований свидетельствуют, что в организме реагирующего на туберкулин крупного рогатого скота и внешней среде на территории РС (Я), кроме патогенных M. bovis и M. tuberculosis персистируют 11 видов фотохромогенных, нефотохромогенных и быстрорастущих атипичных микобактерий I, II и VI групп по классификации Раньона, родококки, грибы рода Aspergillus и нокардии. Нами из 317 проб биоматериала от реагирующих на туберкулин животных благополучных по туберкулезу хозяйств Намского, Горного, Таттинского, Мегино-Кангаласского, Чурапинского и Сунтарского улусов Якутии изолированы 77 культур микобактерий, из которых 14, по комплексу культуральных, биологических и биохимических свойств, отнесены к M. bovis, 1 – к M. tuberculosis, и 62 (80,5%) – к атипичным.

Не отрицая роли атипичных микобактерий, как основной в проявлении неспецифических реакций на туберкулин, во многих случаях при бактериологическом исследовании биоматериала не удавалось их изолировать. Аллергические исследования в благополучных по туберкулезу хозяйствах 14 улусов республики показали высокое совпадение проявления туберкулиновых реакций и заболевания актиномикозом – 22,9%, лейкозом (гематологически больные) – 16,7%, гиподерматозом (7,3%) и другими болезнями.

При ветеринарно-санитарной экспертизе 289 животных патологические процессы (12 видов) во внутренних органах обнаружены у 121, или у 41,9% реагирующих на туберкулин коров. Чаще выявляли склероз лимфатических узлов (7,3%), лейкоз (6,8%) и лимфаденит (4,8%). Частота других патологических процессов, в том числе паразитарного характера, была незначительной.

Таким образом, определенную этиологическую роль в проявлении неспецифической реактивности крупного рогатого скота к туберкулину в благополучных по туберкулезу хозяйствах РС (Я) имеют некоторые заболевания и поражения внутренних органов.

Схема дифференциации туберкулиновых реакций. В основу схемы поло-жен объективный выбор животных для диагностического убоя с последующим бактериологическим исследованием биоматериала по взаимодействующим критериям: пониженная реактивность организма животных в стадах с неспецифическим фоном сенсибилизации к ППД туберкулину для млекопитающих в уменьшенной дозе – 5000 МЕ; выпадение при повторном исследовании через 30-45 дней реакций у большинства животных (до 70%), сенсибилизированных факторами нетуберкулезной этиологии; положительный результат ПЦР (обнаружение ДНК M. bovis или M. tuberculosis) из биоматериала от повторно реагирующих на туберкулин в уменьшенной дозе животных (рис. 2).

Рисунок 2 – Схема диагностических исследований в хозяйствах с невыясненной этиологией туберкулиновых реакций Противоэпизоотическая и экономическая эффективность. В результате внедрения схемы дифференциально-диагностических мероприятий в 1989гг. из 4518 гол. крупного рогатого скота (в основном коров), давших реакцию на туберкулин, 318 гол. или 7% по комплексу диагностических тестов подвергнуты убою с отбором проб биоматериала для бактериологического исследования. Остальные реагирующие на туберкулин животные оставлены в стаде, а продукция от них (молоко, мясо, приплод) использовалась без ограничений.

Предотвращенный экономический ущерб, рассчитанный по разработанной методике, составил 119,3 млн. руб. При этом предупреждены потери 5027,4 тыс. т молока и 1680 голов приплода.

2.2.2 Усовершенствование диагностики туберкулеза

Влияние аэрации на эффективность культивирования микобактерий.

При культивировании микобактерий на питательных средах чаще всего используют ватно-марлевые пробки. При этом бактериологические пробирки с посевами культур микобактерий или биоматериала от животного закупоривают пробками c последующей герметизацией парафином для создания относительно анаэробных условий. Анализ научной литературы свидетельствует о единичных и разноречивых данных по эффективности культивирования на питательных средах микобактерий с использованием различных видов пробок.

Установлено, что первичный рост патогенных микобактерий (M. bovis, M. tuberculosis и M. avium) сравнительно одинаков и не превышает 7 сут.

Обильный рост наблюдали на 16-е сутки с использованием ватно-марлевых пробок под парафином и резиновых с желобком, обеспечивающих анаэробные условия культивирования. Наименьший срок обильного роста культуры M. tuberculosis (16 сут.) наблюдали в пробирках, закупоренных резиновыми пробками с желобком (аэробные условия) Условия аэрации не влияли на интенсивность роста культуры M. avium.

Отличительной особенностью роста атипичных микобактерий M. smegmatis, M. fortuitum, M. intracellulare) явился хороший первичный и обильный рост в пробирках под ватно-марлевыми и резиновыми с желобком пробками, способствующие аэрации питательной среды (аэробные условия).

Таким образом, для культивирования возбудителя туберкулеза бычьего вида оптимальными являются только анаэробные условия, для других видов микобактерий (как патогенных, так непатогенных) – аэробные, что достигается использованием различных видов пробок.

Информативность питательных сред при культивировании микобактерий. В опытах использовали распространенные в бактериологической диагностике туберкулеза плотные и жидкие питательные среды. На каждую из сред (по 10 пробирок) высевали патогенные и атипичные культуры микобактерий.

Скорость роста культуры M. bovis была одинаковой при культивировании на плотных питательных средах Финн-2, Гельберга и Павловского. Первичный рост появлялся на 7-е сутки, обильный – на 25-е. Для M. tuberculosis наиболее информативной оказалась среда Финн-2, первые колонии на которой регистрировали на 7-е сутки, а обильный рост на 19-е. Примерно одинаковую эффективность для M. avium показали все испытуемые среды с некоторым преимуществом среды Левенштейна-Йенсена.

Эффективными для культивирования атипичных микобактерий M. smegmatis и M. fortuitum оказались среды Финн-2 и Гельберга, на которых первичный рост регистрировали через 2-е сут., а обильный – через 7. Наилучшие ростовые свойства культуры M. intracellulare проявлялись на среде Павловского.

Жидкие питательные среды, в отличие от твердых (для индикации микобактерий), используются в основном, для накопления биологической массы бактерий в промышленном производстве биопрепаратов и специализированных НИУ. В опытах на этих средах культура M. bovis лучше всего растет на среде Сотона и ВКЛ, образуя пышную толстую пленку. Для M. tuberculosis предпочтительней среда Моделя; M. avium – Моделя и Сотона; M. smegmatis и M. intracellulare – ГДР; M. fortuitum – среда ВКЛ.

Молекулярная диагностика туберкулеза. Целью исследований явилось определение диагностической ценности детекции ДНК микобактерий туберкулеза методом ПЦР в биоматериале (кровь, сыворотка крови) от реагирующего на туберкулин крупного рогатого скота ранее неблагополучных по туберкулезу хозяйств. В двухступенчатой «гнездовой» модификации ПЦР с использованием внутренних и внешних праймеров исследован биоматериал от 394 животных 15-ти улусов Якутии (Наставление по применению тест-системы для выявления и дифференциации M. bovis и M. tuberculosis методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), 2002; тест-система производства НПО «Нарвак»).

В целом из биоматериала ДНК М. bovis и М. tuberculosis обнаружены в 114 пробах или в 28,9%. Контрольные образцы дали отрицательный результат.

При этом ДНК М. bovis обнаружены в 82 пробах биоматериала (21,4%). Фрагменты ДНК M. tuberculosis регистрировали в 8,1% случаев.

Учитывая столь высокий уровень обнаружения ДНК микобактерий от реагирующего на туберкулин крупного рогатого скота благополучных по туберкулезу хозяйств, 40 положительных проб биоматериала исследовали еще в двух повторностях. Результаты ДНК-позитивности первичного исследования во всех случаях совпали с результатами повторных анализов.

Электрофорез в агаровом геле показал, что ПЦР наиболее информативна с сывороткой крови – 66,6% от числа исследованных проб, несколько ниже с цельной кровью (58,3%) и носовой слизью (50%). Из проб лимфатических узлов показатель составил 33,3%, молока – 16,7%.

Особенности прижизненной диагностики туберкулеза у северных оленей и лесных бизонов. Данные о прижизненной диагностике туберкулеза у северных оленей отрывочны (В.А. Поляков, 2006). Целью исследований явилась разработка технологии прижизненной диагностики туберкулеза у северных оленей в условиях паркового содержания. Исследования проводили на 150 северных оленях резервата «Табсылын» Якутской ГСХА.

Попытки внутрикожного введения (средняя треть шеи) оленям ППД туберкулина для млекопитающих с помощью безыгольного инъектора МБИ-7 «Овод» показали, что аллерген проникает через все слои кожи и локализуется в подкожной клетчатке и более глубоких мышечных тканях, что обусловлено создаваемым высоким давлением инъектора. Отметим, что кожа у северного оленя очень тонкая, а в области шеи ее толщина не превышает 1 мм (В.Г. Шелепов и др., 2003). Технологически приемлемым оказалось внутрикожное введение туберкулина с помощью шприца с иглами для туберкулинизации. Технически возможно также использование пальпебральной и офтальмопробы.

В связи с реинтродукцией американских бизонов в Якутии, завезенных из Канады и содержащихся в питомниках природных парков, возникла угроза вспышек инфекционных болезней, в том числе туберкулеза. Ввиду агрессивности бизонов не представляется возможным аллергическая диагностика туберкулеза. С учетом методического наставления «Мониторинг благополучия диких животных по туберкулезу в зоопарках и цирках Российской Федерации»

(М.И. Гулюкин и др., 2012) отобрано и исследовано в ПЦР 25 проб фекалий (Наставление по применению тест-системы для выявления и дифференциации M. bovis и M. tuberculosis методом полимеразной цепной реакции, 2002). ДНК микобактерий во всех пробах фекалий не обнаружена.

2.2.3 Взаимосвязь туберкулеза крупного рогатого скота и человека в Республике Саха (Якутия) Эпидемическая ситуация. В период до и начала 20-го века в Якутии туберкулез имел крайне широкое распространение и приводил к гибели коренных жителей целых поселений (В.П. Николаев, 2005), что явилось причиной низкого естественного прироста населения (Н.А. Попов, 1910). По архивным данным инфицированность населения палочкой Коха достигала 14%, в том числе детей

– 60-100%, что характеризовало туберкулез как национальную катастрофу.

В современный период основные эпидемиологические показатели туберкулеза (заболеваемость, болезненность, бациллярность, смертность) в РС(Я) коррелируют с общероссийскими, однако особенностью процесса является высокая заболеваемость детей, превышающая данные по РФ в 2,3–3,6 раза (рис. 3).

Рисунок 3 – Динамика заболеваемости детей туберкулезом в Якутии и Российской Федерации (на 100 тыс. населения) Взаимное заражение крупного рогатого скота и людей. Патогенность для крупного рогатого скота и человека возбудителей туберкулеза бычьего и человеческого видов обуславливает межвидовую взаимосвязь эпизоотического и эпидемического процессов. Важным показателем этой взаимосвязи является выделение от людей культур M. bovis, а от крупного рогатого скота – M. tuberculosis. В 50-80-е годы прошлого столетия от больных туберкулезом людей в Якутии изолировали до 20% культур M. bovis (В.П. Белогурова, 1958;

Ю.П. Афанасьева, 1961; В.Т. Захаров, 1981; Г.И. Алексеева, 1994). В связи с ликвидацией туберкулеза крупного рогатого скота в Якутии, выявление возбудителя туберкулеза бычьего вида от людей, по данным МЗ РС(Я), не превышают 0,6%. M. tuberculosis от животных изолируют реже, но это не умаляет их потенциальной роли в эпизоотологии и эпидемиологии туберкулеза.

В результате комплексных, совместно с Якутским НИИ туберкулеза, медико-ветеринарных исследований выявлены случаи тесной взаимосвязи туберкулеза людей и животных. Так, впервые в регионе от реагирующей на туберкулин коровы частного сектора (Намский улус) мы изолировали и идентифицировали по комплексу тестов культуру возбудителя туберкулеза человеческого вида (M. tuberculosis). При этом хозяин животного состоял на учете в улусном противотуберкулезном диспансере (II группа).

Отметим важный в эпизоотолого-эпидемическом отношении случай изоляции M. tuberculosis от свиней в крестьянском хозяйстве «Алгыс» Намского улуса, в котором при аллергическом исследовании на туберкулез 96 свиней 16 или 16,7% дали реакцию на введение ППД туберкулинов для млекопитающих и для птиц. Из биоматериала от убитых животных нами изолирована и идентифицирована по биохимическим тестам и в биологической пробе на морских свинках и кроликах культура M. tuberculosis. Установлено, что поголовье свиней обслуживали 4 привлеченных больных туберкулезом человека.

Из биоматериала от реагирующей на туберкулин коровы одного из подворий Сунтарского улуса, в семье которых глава, две дочери и два сына являлись больными туберкулезом, мы изолировали культуру, представленную двумя видами микобактерий в ассоциации – M. bovis и M. tuberculosis. Исследование в ПЦР проб крови, сыворотки крови и носовой слизи показало наличие ДНК микобактерий туберкулеза у отца и двоих детей.

Характеристика эпидемических очагов риска туберкулеза для крупного рогатого скота. В классическом определении эпидемический очаг туберкулеза – это местонахождение источника инфекции антропонозного (M. tuberculosis) или зоонозного (M. bovis) характера, в пределах которого возможно распространение возбудителя и учитываемого по месту проживания больного. Мы, с учетом эпизоотологической направленности, использовали видоизмененное определение этого очага – эпидемический очаг риска туберкулеза для крупного рогатого скота, так как в таком очаге, кроме больного туберкулезом человека, должен содержаться восприимчивый к заражению крупный рогатый скот.

Для учета и характеристики очагов туберкулеза использовали данные Роспотребнадзора, поселковых администраций о количестве крупного рогатого скота и подворного обхода мест проживания больных туберкулезом лиц по разработанной схеме. Эпидемические очаги риска туберкулеза за 2008-2012 гг. выявлены в 19-ти сельских улусах Якутии, их количество по годам оставалось относительно постоянным – 136-145 (табл. 2). В одном очаге содержалось в среднем 6,1 голов крупного рогатого скота, в том числе 2,3 коровы. Набольшее среднегодовое количество очагов зарегистрировано в подворьях владельцев скота Сунтарского (16,2), Мегино-Кангаласского (15,8), Верхневилюйского (12,8), Усть-Алданского (11,4), Намского (11) и Чурапинского (10,8) улусов.

Таблица 2– Динамика и характеристика эпидемических очагов риска туберкулеза для крупного рогатого скота в Якутии за 2008–2012 гг.

–  –  –



Pages:   || 2 |
 
Похожие работы:

«АНДОСОВА ЛАРИСА ДМИТРИЕВНА КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНЫЕ АСПЕКТЫ В ОЦЕНКЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ ШЕЙКИ МАТКИ ПРИ ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ 14.03.10 – клиническая лабораторная диагностика Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Нижний Новгород – 2014 Работа выполнена в ГБОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия» Минздрава России Научный консультант: Конторщикова Клавдия Николаевна – доктор биологических наук, профессор Официальные оппоненты:...»

«Худоногова Елена Геннадьевна БИОЛОГИЯ, ЭКОЛОГИЯ И ПРОДУКТИВНОСТЬ ПОЛЕЗНЫХ РАСТЕНИЙ ПРЕДБАЙКАЛЬЯ: АНАЛИЗ, ПРОГНОЗИРОВАНИЕ И ОПТИМИЗАЦИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ Специальность 03.02.01 – ботаника (биологические науки) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Оренбург 2015 Работа выполнена на кафедре ботаники, плодоводства и ландшафтной архитектуры в ФГБОУ ВО «Иркутский государственный аграрный университет имени А.А. Ежевского» Научный консультант:...»

«Кузнецова Наталья Владимировна СОВРЕМЕННОЕ ГИДРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ РЕКИ ЯХРОМА КАК МОДЕЛЬНОЙ МАЛОЙ РЕКИ ПОДМОСКОВЬЯ 03.02.10 – гидробиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук МОСКВА 2015 Работа выполнена на кафедре экологии Дмитровского рыбохозяйственного технологического института ФГБОУ ВПО «Астраханский государственный технический университет» (ДРТИ ФГБОУ ВПО «АГТУ»), п. Рыбное Научный руководитель: Вундцеттель Михаил...»

«АФГОНОВ МУХАММАДАЛИ МИРАЛИЕВИЧ Системно-деятельностный подход к гуманитарно-краеведческой воспитательной деятельности в общеобразовательных учреждениях Республики Таджикистан 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования (педагогические науки) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора педагогических наук Душанбе 2015 Работа выполнена на общеуниверситетской кафедре педагогики Таджикского национального университета доктор педагогических наук,...»

«Абросимова Светлана Борисовна Совершенствование методов селекции картофеля на устойчивость к золотистой цистообразующей нематоде (Globodera rostochiensis (Woll.) Специальность: 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата сельскохозяйственных наук Москва – 2014 Диссертационная работа выполнена в Государственном научном учреждении Всероссийский научно-исследовательский институт картофельного...»

«Шумилова Анна Алексеевна ПОТЕНЦИАЛ БИОРАЗРУШАЕМЫХ ПОЛИГИДРОКСИАЛКАНОАТОВ В КАЧЕСТВЕ КОСТНОПЛАСТИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ 03.01.06 – Биотехнология (в том числе бионанотехологии) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Красноярск – 2015 Работа выполнена на базовой кафедре биотехнологии Института фундаментальной биологии и биотехнологии, Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего профессионального образования...»

«ПОПОВ Игорь Юрьевич ВЫМИРАНИЕ MARGARITIFERA MARGARITIFERA (L.) НА ЮГЕ АРЕАЛА В РОССИИ И МОДЕЛЬ ПРИРОДОХРАННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ 03.02.08 – экология Автореферат диссертации на соискания учёной степени доктора биологических наук Санкт-Петербург Работа выполнена в Санкт-Петербургском государственном университете Официальные оппоненты: Иешко Евгений Павлович, доктор биологических наук, Институт биологии Карельского научного центра РАН заведующий лабораторией паразитологии животных и...»

«АСКАРОВ АЙБУЛАТ ДАМИРОВИЧ ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ И ЗАЩИТНЫХ ХАРАКТЕРИСТИК ДРЕВЕСНО-КУСТАРНИКОВЫХ НАСАЖДЕНИЙ В УСЛОВИЯХ Г. УФЫ ПРИ ДЕЙСТВИИ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ Специальности: 03.02.01. – Ботаника (биология), 03.02.08 – Экология (биология) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Оренбург – 2015 Диссертационная работа выполнена на кафедре экологии и природопользования ФГБОУ ВПО «Башкирский государственный педагогический университет...»

«Бирюкова Лидия Игоревна Диагностика, клинико-морфологическая характеристика и лечение накожного папилломатоза и дерматоза внутренней поверхности ушной раковины у лошадей 06.02.04 – ветеринарная хирургия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Москва 2015 Работа выполнена в ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии МВА имени К.И. Скрябина» Научный руководитель: Сотникова Лариса Федоровна, доктор...»

«УДК 574.587 Барбашова Марина Александровна МАКРОБЕНТОС ЛАДОЖСКОГО ОЗЕРА И ЕГО ИЗМЕНЕНИЯ ПОД ВЛИЯНИЕМ ФАКТОРОВ СРЕДЫ 03.02.08 – экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург Работа выполнена в лаборатории гидробиологии Федерального государственного бюджетного учреждения науки Институт озероведения Российской академии наук Научные руководители: Слепухина Татьяна Дмитриевна, доктор биологических наук Курашов Евгений...»

«Шапурко Валентина Николаевна РЕСУРСЫ И ЭКОЛОГИЧЕСКОЕ КАЧЕСТВО ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ (НА ПРИМЕРЕ БРЯНСКОЙ ОБЛАСТИ) Специальность 03.02.08 – Экология (биологические науки) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Брянск 2014 Работа выполнена на кафедре экологии и рационального природопользования ФГБОУ ВПО «Брянский государственный университет имени академика И.Г. Петровского» доктор сельскохозяйственных наук, профессор Научный...»

«ВОЛОДИНА ИРИНА АЛЕКСАНДРОВНА ОЦЕНКА ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА ЛЮЦЕРНЫ ИЗМЕНЧИВОЙ ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ ВЫСОКОПРОДУКТИВНЫХ СОРТОВ В УСЛОВИЯХ СРЕДНЕГО ПОВОЛЖЬЯ 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений АВТОРЕФЕРАТ диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Пенза 2015 Диссертационная работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном научном учреждении «Поволжский научно-исследовательский институт селекции и семеноводства имени...»

«БАММАТОВ ДЖАНБОЛАТ МУСАЕВИЧ СОЧЕТАННЫЕ ПРИРОДНЫЕ ОЧАГИ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ В РАВНИННО-ПРЕДГОРНОЙ ЧАСТИ РЕСПУБЛИКИ ДАГЕСТАН 14.02.02 – эпидемиология 03.02.03 микробиология Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Ставрополь – 2013 Работа выполнена в Федеральном казнном учреждении здравоохранения «Дагестанская противочумная станция» и Федеральном казнном учреждении здравоохранения «Ставропольский научно-исследовательский противочумный...»

«Моисеева Елена Владимировна БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ РАЗВЕДЕНИЯ РАДУЖНОЙ ФОРЕЛИ PARASALMO (= ONCORHYNCHUS) MYKISS В УСЛОВИЯХ ПЛЕМЕННЫХ ЗАВОДОВ 03.02.06 – Ихтиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Москва 2015 Работа выполнена на кафедре водных биоресурсов и аквакультуры Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Кубанский государственный...»

«Чичерина Екатерина Александровна БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВИРУЛЕНТНЫХ ШТАММОВ ВИРУСА БОЛЕЗНИ МАРЕКА 06.02.02. «Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Владимир 2015 Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном учреждении «Федеральный центр охраны здоровья животных» (г. Владимир) Ирза Виктор Николаевич, доктор ветеринарных...»

«СТОЛПОВСКАЯ Елена Владимировна СИНТЕЗ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ КОМПЛЕКСНЫХ СОЕДИНЕНИЙ НА ОСНОВЕ ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНА – ПРОДУКТА ГЛУБОКОЙ ПЕРЕРАБОТКИ ДРЕВЕСИНЫ ЛИСТВЕННИЦЫ 05.21.03 технология и оборудование химической переработки биомассы дерева; химия древесины АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата химических наук Иркутск Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Иркутском институте химии им. А.Е. Фаворского Сибирского...»

«Амирханян Михаил Артурович Влияние профессиональных физических и эмоциональных нагрузок на окклюзионно-артикуляционные параметры зубочелюстной системы 14.01.14 – Стоматология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2015 Работа выполнена на кафедре клинической стоматологии и имплантологии ФГБОУ ДПО «Институт повышения квалификации Федерального медикобиологического агентства» Заслуженный деятель науки России, Научный руководитель...»

«Новикова Любовь Александровна СТРУКТУРА И ДИНАМИКА ТРАВЯНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ ЛЕСОСТЕПНОЙ ЗОНЫ НА ЗАПАДНЫХ СКЛОНАХ ПРИВОЛЖСКОЙ ВОЗВЫШЕННОСТИ И ПУТИ ЕЕ ОПТИМИЗАЦИИ 03.02.01 – ботаника Автореферат диссертации на соискание учёной степени доктора биологических наук Саратов – 2011 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Пензенский государственный педагогический университет имени В.Г. Белинского»...»

«Мечов Максим Павлович КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РЕПАРАТИВНОГО ОСТЕОГЕНЕЗА ПРИ ИМПЛАНТАЦИИ ФИКСАТОРОВ С ПОКРЫТИЕМ НА ОСНОВЕ МЕТАЛЛОВ IV ГРУППЫ 06.02.04 – ветеринарная хирургия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Москва – 2015 Работа выполнена на кафедре ветеринарной хирургии ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана» Научный руководитель Шакирова Фаина Владимировна доктор...»

«Бантыш Ольга Борисовна Биосинтез пептид-нуклеотидного антибиотика микроцина С и его гомологов Специальность 03.01.03 молекулярная биология АВТОРЕФЕРАТ Диссертация на соискание учной степени кандидата биологических наук Москва Работа выполнена в лаборатории молекулярной генетики микроорганизмов Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института биологии гена Российской академии наук. Научный руководитель: Северинов Константин Викторович, доктор биологических...»









 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.