WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 

Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |

«Анохина Елена Николаевна ПОЛИМОРФИЗМЫ ГЕНОВ ПРО- И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ, МУТАЦИИ ГЕНОВ BRCA1/2 ПРИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЯХ ОРГАНОВ ЖЕНСКОЙ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ ...»

-- [ Страница 1 ] --

ФГБОУ ВПО «Адыгейский государственный университет»

На правах рукописи

Анохина Елена Николаевна

ПОЛИМОРФИЗМЫ ГЕНОВ ПРО- И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ

ЦИТОКИНОВ, МУТАЦИИ ГЕНОВ BRCA1/2 ПРИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ

НОВООБРАЗОВАНИЯХ ОРГАНОВ ЖЕНСКОЙ РЕПРОДУКТИВНОЙ

СИСТЕМЫ

14.03.09 – клиническая иммунология, аллергология



Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Научный руководитель:

доктор биологических наук Тугуз А.Р.

Майкоп 2015 Оглавление Список сокращений…………………………………………………………… 3 Введение ………………………………………………………………………. 5 Глава I. Обзор литературы ………………………………………………… Гены-маркеры, ассоциированные со злокачественными 1.1.

новообразованиями женских репродуктивных органов……………….

1.1.1. Распределение мутаций генов BRCA 1/2 при неоплазиях женских 13 репродуктивных органов в мировых популяциях.…………………… 1.1.2. SNP промоторных регионов генов цитокинов и их ассоциация с 22 неоплазиями женских репродуктивных органов…………………….

1.2. Сывороточные уровни, спонтанная и стимулированная продукция 34 цитокинов in vitro PBMC больных и доноров………………….............

Глава II. Материалы и методы исследования ……………………………… 38

2.1. Реактивы, тест-системы и материалы………………………………….. 38

2.2. Экспериментальные методы …………………………………………… 39

2.3. Контингент обследованных лиц………………………………………..... 45

2.4. Статистическая обработка данных ……………………………………… 47 Глава III. Результаты исследований ………………………………………… 48

3.1. Мутации генов BRCA1/2 при злокачественных новообразованиях женских репродуктивных органов у жителей РА ……………..……… 48

3.2. Полиморфизмы генов про- и противовоспалительных цитокинов …... 50

3.3. Сывороточные уровни, спонтанная и стимулированная in vitro продукция цитокинов PBMC ………………………………………….. 69

3.4. Влияние генотипов и гаплотипов промоторных регионов генов цитокинов на продукцию медиаторов………………………………… 78 Обсуждение результатов……………………………………………………… 87 Выводы………………………………………………………………………….

Практические рекомендации ……………………………………………….. 100 Список литературы……………………………………………………………. 101 Приложения ………………………………………………………………….. 130 Список сокращений АПК – антиген-презентирующие клетки ЗНО – злокачественные новообразования ИФА – иммуноферментный анализ ЛПС – липополисахариды мРНК – матричная (информационная) рибонуклеиновая кислота ПЦР – полимеразная цепная реакция РА – Республика Адыгея РФ – Российская Федерация РМЖ – рак молочной железы РТМ – рак тела матки РШМ – рак шейки матки РЯ – рак яичника ТАЕ буфер – трис-ацетатный буфер ФГА – фитогемагглютинин ЭДТА – этилендиаминтетраацетат натрия BRCA1/2 – гены Breast cancer antigen1/2 CD – кластер дифференцировки (от англ. cluster of differentiation) ELISA – иммуноферментный анализ (от англ. enzyme-linked immunosorbent assay) FS – фетальная сыворотка (от англ. fetal serum) G-CSF – гранулоцитарный колониестимулирующий фактор GM-CSF – гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (от англ. granulocyte colony stimulating factor) IFN – интерферон Ig – иммуноглобулин IL – интерлейкин (от англ. interleukin) IL-2R – рецептор интерлейкина 2 IL-4R – рецептор интерлейкина 4 MHC – главный комплекс гистосовместимости (от англ. Major histocompatibility complex) NK – естественные киллеры (от англ. natural killer) PBMC – мононуклеарные клетки периферической крови (от англ. peripheral blood mononuclear cells) PCR- Real Time – полимеразная цепная реакция в режиме реального времени (от англ. polymerase chain reaction in real time) rs – цифровая эталонная последовательность полиморфизмов (от англ. reference sequence) SNP – единичные нуклеотидные полиморфизмы (от англ. single nucleotide polymorphisms) Th1 – Т-хелперы 1-го типа Th2 – Т-хелперы 2-го типа TNF – фактор некроза опухолей (от англ. tumor necrosis factor) UTR – нетранслируемый участок гена (от англ. UnTranslated Region)

Введение

Актуальность исследования. Злокачественные новообразования (ЗНО) женских репродуктивных органов занимают одно из ведущих мест в структуре общей заболеваемости и смертности населения стран мира и России (Давыдов и др., 2009; Чиссов и др., 2012; Каприн и др., 2013).





Ежегодно в мире регистрируется около 1 млн. больных с впервые выявленным диагнозом рака молочной железы (РМЖ) и более 400 000 летальных исходов (Kamangar et al, 2006). В Европе показатели заболеваемости РМЖ по данным International Agency for Research on Cancer (IARC, 2012г.) составили в среднем 80,4 на 100 тыс. женского населения (в России – 76,7; в Нидерландах Дании - 86,2; Франции - 83,2; Бельгии - 82,2; Швеции - 81,0).

В большинстве индустриальных стран мира неоплазии женских репродуктивных органов имеют самые высокие показатели смертности. За последние 10 лет (2003-2013 гг.) в России и Республике Адыгея наблюдается устойчивая тенденция к росту смертности от рака молочной железы (прирост в 2013 г. составил 2,63 и 4,7% соответственно), яичников (3,39 и 1,9% соответственно), тела и шейки матки (8,82/3,56% и 6,04/5,9% соответственно), что в значительной степени обусловлено поздней диагностикой заболеваний (Каприн и др., 2015).

Одним из подходов, способствующих раннему выявлению рака молочной железы, яичников (РЯ), тела (РТМ) и шейки матки (РШМ), является молекулярногенетические исследования (Nathanson et al., 2001; Venkitaraman, 2001). ЗНО женских репродуктивных органов преимущественно ассоциируют с генами BRCA (Breast cancer antigen) - BRCA1 и BRCA2, локализованными соответственно в 17 и 13 соматических хромосомах (www.genecards.org). Функции генов BRCA1/2 связаны с поддержанием стабильности генетического аппарата клеток, репарации ДНК, обеспечивающей целостность генома (Wang Y. et al., 2000). Мутации и многочисленные полиморфные варианты генов BRCA1/2, снижающие супрессивный эффект продуктов генов BRCA1/2 на опухолевые клетки и обуславливающие развитие ЗНО молочной железы, желудка и других локализаций, неравномерно распределены в мировых популяциях, чаще выявляются у евреек-Ашкенази с РМЖ (до 22%), но для других этнических групп не имеют высокой прогностической значимости (Levy-Lahad et al., 1997;

Mehdipour et al., 2006; Krajc et al., 2008; Esteves et al., 2009; Brozek et al., 2011;

Kwong et al., 2012; Blay et al., 2013).

Актуальность исследования обусловлена поиском прогностически информативных генов-маркеров – ранних предикторов неопластических процессов для разных этнических групп. Гены медиаторов иммунной системы – иммунорегуляторных низкомолекулярных про- и противовоспалительных цитокинов, регулирующих системные воспалительные реакции организма, могут быть вовлечены в патофизиологические процессы, включая и неопластические (Кологривова и др., 2011). В ряде работ представлены весьма противоречивые сведения о роли цитокинов при некоторых злокачественных новообразованиях (Han et al., 2008; Konwar R. et al., 2009; Roszak et al., 2012).

Фактором, определяющим двойственную роль цитокинов в развитии системных заболеваний могут быть полиморфизмы их генов в виде точечных мутаций (SNP – single nucleotide polymorphisms) с заменой одного нуклеотида на другой, делеций нуклеотидов или небольших фрагментов гена, инсерций, многочисленных тандемных повторов частей генов и т.д.. SNP в экзонах, интронах и в промоторных участках регулируют интенсивность экспрессии и, соответственно, биологические эффекты цитокинов (Кутихин и др., 2012).

Цель работы: исследование ассоциации полиморфизмов генов основных про- и противовоспалительных цитокинов со злокачественными новообразованиями женских репродуктивных органов.

Задачи:

1. Анализ распределения мутаций генов-супрессоров опухолевого роста BRCA1/2 (5382insC, 185delAG, 4153delA, Cys61Gly, 2080delA, 3819delGTAAA, 3875delGTCT, 6174delT) у доноров и онкологических больных.

2. Типирование полиморфизмов генов IL-17A (G197A), IL-17F (A7488G, His161Arg), IL-2 (T330G), IL-12B (А1188С), IL-10 (G1082A, C819T, C592A), ILC589Т), ассоциированных со злокачественными новообразованиями органов женской репродуктивной системы.

3. Выявление опухолевой прогрессии и прогностически SNP-маркеров неблагоприятных гистотипов низкодифференцированной аденокарциномы молочной железы.

4. Исследование влияния полиморфизмов генов IL-17A (G197A), IL-2 (T330G), ILG1082A, C819T, C592A), IL-4 (C589Т) на спонтанную и стимулированную in vitro продукцию цитокинов в культуре мононуклеарных клеток крови доноров и онкологических больных.

Научная новизна работы.

Впервые у жителей Республики Адыгея в норме и при онкопатологии:

- определены частоты 8 мутаций генов BRCA1/2 у доноров и больных со злокачественными новообразованиями женских репродуктивных органов;

типированы аллельные варианты генов основных про- и противовоспалительных цитокинов: IL-17А (G197A), IL-17F (A7488G, His161Arg), IL-2 (T330G), IL-4 (C589Т), IL-10 (G1082A, C819T, C592A), IL-12В (А1188С) в этнических группах населения РА;

- установлены аллельные варианты генов IL-17А (G197) и IL-10 (819T), ассоциированные с опухолевой прогрессией и прогностически неблагоприятным гистотипом низкодифференцированной аденокарциномы молочной железы.

- выявлены этнические различия по ассоциации полиморфизмов генов основных про- и противовоспалительных цитокинов со злокачественными новообразованиями женских репродуктивных органов (у русских женщин - G197 аллель IL-17A, 819T полиморфный вариант IL-10, у адыгеек - 161Arg полиморфизм IL-17F, 592A аллель IL-10).

Впервые в России и мире исследовано влияние полиморфизмов генов IL-2, IL-4, IL-10, IL-17A и гаплотипов гена IL-10 на сывороточные уровни и продукцию цитокинов in vitro онкологических больных с гистологически PBMC верифицированным диагнозом рака молочной железы.

Научно-практическая значимость:

На основании экспериментальных данных показано, что с неоплазиями женских репродуктивных органов ассоциированы полиморфизмы генов противовоспалительных IL-4, IL-10, влияющие на продукцию цитокинов.

Типированные молекулярно-генетические детерминанты опухолевой прогрессии и прогностически неблагоприятных гистотипов неоплазий расширят представления о механизмах клеточной трансформации и будут способствовать разработке медиаторной концепции канцерогенеза.

Полученные новые данные могут быть востребованы в предиктивной медицине и включены в перечень скрининговых панелей онкологических диспансеров для донозологической диагностики ЗНО женских репродуктивных органов; использованы в преподавании дисциплин федерального компонента генетики, иммунологии для биологических факультетов университетов, для разработки курса лекций по клинической генетике, клинической иммунологии в медицинских ВУЗах, на курсах повышения квалификации медицинских работников.

Положения, выносимые на защиту:

Мутации генов BRCA1/2 прогностически не значимы при ЗНО 1.

женских репродуктивных органов в этнических группах населения РА.

Факторами риска развития РМЖ, РТМ, РШМ являются 161Аrg 2.

аллель, His161Аrg генотип гена IL-17F, 592A аллельный вариант гена IL-10 (преимущественно у адыгов), G197 аллель гена IL-17А, 819T полиморфизм гена IL-10, А1188А генотип и А1188 аллель гена IL-12В (у русских женщин), 589T аллель гена IL-4 (для адыгов и русских).

Опухолевая прогрессия сопряжена с носительством G197 аллели гена 3.

IL-17A, Т330 аллельного варианта гена IL-2, 589T аллели гена IL-4, А1188 – ILВ, G1082 и 819T аллелей гена IL-10.

онкологических больных по сравнению с донорами

4. PBMC характеризуются гипопродукцией медиаторов, регулирующих основные этапы реализации базовой воспалительной реакции и противоопухолевого иммунитета:

триггерного IL-17, ростового IL-2, противовоспалительного IL-10.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы представлены в материалах научно-практических конференций: VIII ежегодной научной конференции студентов и аспирантов базовых кафедр Южного научного центра РАН (Ростов-на-Дону, 2012); Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы медицинской науки» (Ярославль, 2012); II Всероссийской научной конференции молодых ученых «Проблемы биомедицинской науки третьего тысячелетия» 2012);

(Санкт-Петербург, Международной научной конференции молодых ученых, аспирантов и студентов «Перспектива-2013» (Нальчик, 2013); 18-ой международной Пущинской школеконференции молодых ученых «Биология – наука XXI века» (Пущино, 2014); VI съезде вавиловского общества генетиков и селекционеров (ВОГиС) и ассоциированных генетических симпозиумах (Ростов-на-Дону, 2014).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 15 печатных работ, из них 1 методическое пособие; 8 статей в ведущих рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК РФ; 6 публикаций – в материалах российских конференций.

Внедрение результатов исследования.

Работа выполнена в рамках аналитической ведомственной целевой программы, проводимой по заданию Минобрнауки РФ в 2012-2014 гг. (ЕЗН, код ГРНТИ 34.2341, 34.23.53, 34.13.37, № проекта 4.1334.2011, № гос. контракта 01201276009).

Материалы диссертационного исследования внедрены в учебный процесс Адыгейского государственного университета и лечебного факультета Майкопского государственного технологического университета в рамках биологических и клинических дисциплин: нормальная физиология, медицинская генетика, иммунология для подготовки биологов и врачей общей практики.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 137 страницах компьютерного текста, содержит 46 таблиц, иллюстрирована 10 рисунками, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя используемой литературы и приложения. Список литературы включает 48 отечественных и 232 иностранных источников.

11

Глава I. Обзор литературы

1.1 Гены-маркеры, ассоциированные со злокачественными новообразованиями женских репродуктивных органов В структуре общей заболеваемости и смертности населения стран мира одно из ведущих мест занимают злокачественные новообразования. К нозологиям с многолетней тенденцией к росту относят неоплазии женских репродуктивных органов: молочной железы, матки, шейки матки и яичников. В РФ по данным Ассоциации онкологов России 30,8% случаев приходится на ЗНО женских репродуктивных органов. В Республике Адыгея за последние 10 лет уровень заболеваемости ЗНО этих локализаций возрос в 2,5 раза и составил 116,9 человек на 100 тыс. населения [Чиссов и др., 2012; Каприн и др., 2013-2015].

С развитием онкогенетики выявлены гены, вовлеченные в канцерогенез и ассоциированные с новообразованиями молочной железы, яичников и др.

нозологий [Miki et al., 1994; Wooster et al., 1995]. В современных геномных базах (Breast Cancer Information Core (BIC) database, International Cancer Research Partnership (ICRP) database, Cancer Genomics Hub (CGHub) database, Online Mendelian Inheritance in Man (OMIM) собраны сведения о генах и их аллельных вариантов, вовлеченных в патогенез онкологических заболеваний. К генаммаркерам, ассоциированным со ЗНО женских репродуктивных органов относят гены BRCA1 и BRCA2 (www.research.nhgri.nih.gov). Наиболее распространенные мутации гена BRCA1 185delAG и 5382insC, повышающие риск развития злокачественных новообразований женских репродуктивных органов обнаружены в этнических группах населения Америки, Африки, Восточной, Центральной Европы, в том числе и России (Центральный и Сибирский регионы), но распределены в мировых популяциях неравномерно и редко выявляются даже при наследственных формах РМЖ и РЯ. Для жителей Австралии, Японии, Китая и Северной Европы характерны высокие частоты минорных мутаций BRCA1, не встречающиеся в других регионах мира [Vehmanen et al., 1997; Southey et al., 1999; Khoo et al., 2000; Bjorge et al., 2004; Suter et al., 2004; Sugano et al., 2008;

Kwong et al., 2012]. Этногеографический анализ не выявил универсальных мутаций генов BRCA1/2 – маркеров злокачественных новообразований женских репродуктивных органов, поэтому представляется целесообразным поиск иных, более информативных и прогностически значимых мутаций других геновкандидатов ЗНО.

Научный интерес представляют гены про- и противовоспалительных цитокинов, регулирующие системные воспалительные реакции организма, которые могут быть вовлечены в патофизиологические процессы, включая и неопластические. Интерлейкины оказывают плейотропные биологические эффекты на различные типы клеток, участвуя в формировании воспалительной реакции и запуская каскад цитокиновой сети. Действие медиаторов на злокачественно-трансформированные клетки приводит к апоптозу, стимуляции процессов клеточного деления, инициации дифференцировки и поликлональной экспансии клеток. В цитоплазме малигнизированных клеток выявляется практически весь спектр молекул, способных обрабатывать регуляторные сигналы цитокинов и запускать определенные механизмы [Свердлов, 2001;

Белецкий и др., 2002; Антонов и др., 2004; Кетлинский и др., 2008].

Фактором, определяющим роль цитокинов в развитии системных заболеваний, могут быть полиморфизмы их генов в виде точечных мутаций (SNP) с заменой одного нуклеотида на другой, делеций нуклеотидов или небольших фрагментов гена, инсерций, многочисленных тандемных повторов частей генов и т.д.. SNP в экзонах, интронах и в промоторных участках генов регулируют интенсивность экспрессии и, соответственно, биологические эффекты цитокинов [Кологривова и др., 2011].

1.1.1 Распределение мутаций генов BRCA 1/2 при неоплазиях женских репродуктивных органов в мировых популяциях BRCA1/2 – гены-супрессоры, нормальная функция которых связана с подавлением опухолевого роста, поддержанием стабильности генетического аппарата клеток. Продукты, кодируемые генами BRCA1, BRCA2 образуют большой комплекс белков, названных BASC (BRCA1-associated genome surveillance complex), участвующих в гомологичной рекомбинации и репарации ДНК, которые по данным Wang Y. et al. (2000) обеспечивают целостность генома и оказывают супрессивный эффект на опухолевые клетки.

BRCA1, ответственный за наследственную предрасположенность к РМЖ и РЯ у евреек-Ашкенази, картирован Miki et al. (1994) на длинном плече 17 хромосомы (17q21) и состоит из 22 кодирующих и 2 некодирующих экзонов, разделенных интронами, (рис. 1).

Рис.1 Цитогенетическая структура 17 хромосомы и расположение гена BRCA1;

стрелкой указано месторасположение гена (по данным GeneCards®) Wooster et al. (1995) клонировали второй ген BRCA2, локализованный в 13 хромосоме (13q12) и обуславливающий наследование повышенного риска развития РМЖ. Tavtigian et al. (1996) при секвенировании гена BRCA2 выявили 26 кодирующих и 1 некодирующий экзоны, разделенные интронами (рис.2).

Рис.2 Цитогенетическая структура 13 хромосомы и расположение гена BRCA2;

стрелкой указано месторасположение гена (по данным GeneCards®)

–  –  –

пуриновых оснований на пиримидиновые в структуре кодонов, транзиции – замена пуринового основание на другие пуриновые или пиримидинового на другое пиримидиновое основание и полиморфизмы – точечные мутации, связанные с замещением одного нуклеотида и др. (табл.1).

–  –  –

Из 1089 известных мутаций гена BRCA1 исследованы частоты 185delAG;

5382insC; 300TG (Cys61Gly); 4154delA; 4730insG; 2080delA; 2080insA;

IVS13+1GA; 2430TC; 1806CT; 3888delGA; 916delTT; 3415delC; Ser955Stop;

Glu5331Ala; exon13ins6kb; 2594delC; 3604delА; 3347delAG; 1135insA; 1675delA;

IVS5+3AG; 2478insG; IVS8-57delT; 4184del4; Tyr856His; 1081delG; 2372delTG.

Наиболее распространенные мутации гена BRCA1 185delAG; 5382insC; 300TG распределены в мировых популяциях (Cys61Gly); 4154delA; 2080delA неравномерно. По данным электронных баз HuGEN, Pubmed для гена BRCA2 наиболее изучены мутации: 6174delT, 6261insGT, IVS16-2AG, 3492insT, 8765delAG, 6503delTT, 4512insT, 5579insA, IVS6+1GA, 9132delC, Cys315Ser, Glu1037Stop, 2041delA, Ser1882Stop.

Загрузка...

Мутации генов BRCA1 и BRCA2 в канцерогенезе. Делеции, инсерции и др. мутации в генах BRCA1/2 могут вызвать потерю функциональных возможностей белков и привести к ошибкам репликации, повышенной чувствительности к генотоксическим воздействиям, запускать системные патологические процессы, приводящие к злокачественной трансформации клеток и развитию неоплазий [Карпухин и др., 2002; Любченко и др., 2007; Kadouri et al., 2007]. Так как первоначально мутации генов BRCA1 и BRCA2 были обнаружены в ассоциации с новообразованиями молочной железы (breast cancer), то соответственно получили название Breast Cancer antigen (BRCA). Однако, по результатам исследований, представленных в международных базах данных, мутации и полиморфизмы в генах BRCA1/2 могут быть ассоциированы со злокачественными новообразованиями не только женских репродуктивных органов (молочной железы, тела и шейки матки, яичников), но и других локализаций: желудка, толстой кишки, поджелудочной железы, мочевого пузыря, желчевыводящих путей и др. [Cybulski et al., 2008; Mai et al., 2009; Gallagher et al., 2010; Manguoglu et al., 2010; Slater et al., 2010; Hughes et al., 2012].

Мета-анализы многочисленных этногенетических исследований подтверждают вовлеченность в канцерогенез разных мутаций генов BRCA1/2 (30 и 15 соответственно), поэтому их часто относят к генам-маркерам спорадических и семейных форм ЗНО, несмотря на низкую (до 30%) выявляемость даже при герминальных неоплазиях [Diez et al., 1999; Osorio et al., 2002; Loureno et al., 2004; Mehdipour et al., 2006; Blay et al., 2013].

Высокопенетрантными герминальными мутациями являются 185delAG;

5382insC; 300TG (Cys61Gly); 4154delA в гене BRCA1 и 6174delT в BRCA2.

Внутри- и межэтнические распределения этих генов-маркеров опухолевой прогрессии при однотипных ЗНО различаются и т.к. у некоторых народов они встречаются чаще, получили название эффекта основателя (founder effect или родоначальник мутаций), передаются из поколения в поколение, специфичны для некоторых этнических групп и используются для определения генетического родства народов [Einbeigi et al., 2001; Baudi et al., 2001; Kadouri et al., 2007].

Для выявления общих универсальных маркеров, ассоциированных со злокачественными новообразованиями женских репродуктивных органов нами проведен мета-анализ по спектру наиболее часто встречающихся мутаций гена

–  –  –

185delAG гена BRCA1 одна из наиболее распространенных в мире мутаций, ранее считавшаяся специфичной для евреек-Ашкенази при РМЖ, с высокой частотой выявлена в географически удаленных странах мира: 22,7% Израиль [Levy-Lahad et al., 1997); 22,0% - Египет [El-said El-Debaky et al., 2011];

20,7% и 16,4% – Индия [Vinodkumar et al., 2007; Vaidyanathan et al., 2009]; 18,0% – Канада [Phelan et al., 2002] и др. (Приложение А). Следует отметить, что высокие значения частот 185delAG мутации гена BRCA1 представлены в исследованиях на малых выборках больных [Levy-Lahad et al., 1997; Vinodkumar et al., 2002]. У женщин славянской языковой группы (России, Украины, Польши, Белоруссии – стран Восточной Европы) с РМЖ и РЯ частота 185delAG составляет 0 - 3,1%, поэтому спорным остается вопрос об использовании этой мутации как маркера, ассоциированного с риском развития ЗНО [Gorski et al., 2004; Смирнова, 2008;

Zakhartseva et al., 2009; Silin et al., 2009; Порханова, 2009; Любченко, 2009;

Часовникова и др., 2010; Brozek et al., 2011; Лобейко, 2012].

Распространенность 5382insC гена BRCA1 проанализирована в 45 работах (табл. 2); частота мутации в небольших выборках онкологических больных разных этнических групп (Египет, n=50; Польша, n=200; Россия, n=224, Чехия,

n=151, Румыния, n=26) составляет соответственно 56,0% : 34,0% : 28,6% : 12,0% :

11,5%. В больших выборках обследованных больных (Польша, n=4177) частота 5382insC не превышает 4,5%. По другим мутациям и полиморфизмам гена BRCA1 в международных базах имеются немногочисленные сведения (HuGEN, Pubmed).

Делеция 6174delT гена BRCA2 с частотой 1,2 - 16,4% выявлена при РМЖ и РЯ у афро-американок и евреек-Ашкенази, проживающих в США, Израиле, Канаде [Struewing et al., 1997; Neuhausen et al., 1998; Georgiou et al., 2003; Lavie et al., 2010]. У славянок с ЗНО женских репродуктивных органов частота этой мутации не превышает 1% [Diez et al., 1999; Zakhartseva et al., 2009; Silin et al., 2009; Ходорович, 2009; Порханова, 2009; Поспехова, 2011; Фарахтдинова, 2012].

В результате проведенного мета-анализа нами не определены общие мутации генов BRCA1/2, которые при скрининговых исследованиях могут быть использованы как унифицированные маркеры ЗНО молочной железы, яичников, тела и шейки матки, поэтому на следующем этапе работы представлялось целесообразным провести сравнительный анализ частот наиболее известных мутаций BRCA1/2 в некоторых этнических группах и регионах мира.

Евреи Ашкенази. Распространенность мутации BRCA1/2 в популяциях евреев по данным G. J.Mann et al. (2006) составляет около 0,2%, однако у евреекАшкенази 29 - 41% случаев рака молочной железы и яичников связано с наследованием одной из трех founder mutations в генах BRCA1/2 (185delAG, 5382insC - BRCA1 и 6174delT - BRCA2), однако и у других народов около 10% ЗНО женских репродуктивных органов обусловлено этими же мутациями.

Делеция 185delAG, встречающаяся у 1% евреев, вносит значительный вклад (16при ранних (до 50 лет) случаях РМЖ [Robles-Daz et al., 2004]. Мутации 5382insC в гене BRCA1 и 6174delT в гене BRCA2 обнаружены соответственно у 0,13% и 1,52% Ашкенази [Roa et al., 1996]. Наиболее распространенная в популяции евреев-Ашкенази делеция во втором экзоне гена BRCA1 185delAG возникла, по мнению S. L. Neuhausen et al. (1996), примерно в 1235 г. нашей эры.

Европа. В странах Восточной Европы распространена мутация гена BRCA1 в 20 экзоне – 5382insC, частота которой колеблется от 5,4 до 8,9% у жительниц Белоруссии и Украины [Zakhartseva et al., 2009; Silin et al., 2009; Uglanitsa et al., 2010]. Для северных регионов Европы характерно наличие других мутацийоснователей гена BRCA1: в Норвегии - 3347delAG, 1135insA, 1675insA, Финляндии - 3604delA, Дании - 2594delC, в Германии у больных наследственным РМЖ в возрасте до 41 года частота мутации 5382insC гена BRCA1 составляет 1,1% [Vehmanen et al., 1997; Sarantaus et al., 2001; Bergthorsson et al., 2001; Bjorge et al., 2004].

В странах Центральной и Южной Европы спектр мутаций гена BRCA1 при ЗНО женских репродуктивных органов значительно шире [Osorio et al., 2002;

Pohlreich et al., 2005; Capalbo et al., 2006; Koumpis et al., 2011; Blay et al., 2013]. У женщин Западной Польши в 3% случаев семейного РМЖ и РЯ выявлена мутация гена BRCA1, а для Словении характерна миссенс-мутация 1806СТ, которая с меньшей частотой обнаружена у жительниц Чехии [Pohlreich et al., 2005; Krajc et al., 2008]. В России наиболее распространенной мутацией гена BRCA1 является 5382insC, обнаруженная в 9% случаев раннего (до 40 лет) развития РМЖ, на долю которой приходится около 90% всех мутаций гена BRCA1, типированного для Центрального и Сибирского регионов России [Карпухин и др., 2002; Grudinina et al., 2005; Krylova et al., 2006].

Носительство 5382insC среди разных народов Европейских государств (Польши, Германии, Бельгии, Чехии, Румынии, Латвии, Белоруссии) как у евреевАшкенази, по мнению некоторых исследователей, объясняется ее независимым происхождением. Е.Н. Имянитов (2010) предполагает вероятность славянского происхождения мутации BRCA1 5382insC, а обнаружение данного варианта у евреев-Ашкенази в Восточной Европе является следствием длительного сосуществования славян и евреев на территории Прибалтики и некоторых государств (Приложение В).

Страны Азии и Африканского континента характеризуются минорными мутациями, не встречающимися в других географических зонах (Приложение Г).

В китайской и корейской популяциях среди пациенток РМЖ распространенность мутаций гена BRCA1/2 не превышает 1,1% [Khoo et al., 2002; Kwong et al., 2012;

Son et al., 2012; Kang et al., 2013]. Согласно исследованиям N.M. Suter et al. (2004) и по данным международной базы BIC, мажорная Tyr856His миссенс-мутация, выявляемая в 4,2% у онкологических больных в Китае, характерна также для населения Малайзии (HuGEN, Pubmed).

W. Mahfoudh et al. (2012) рассматривают 916delTT гена BRCA1 как founder mutation при РЯ и РМЖ у жительниц Туниса (частота составляет 12,5%). В Японии, согласно работам K. Sugano et al. (2008), семейные формы ЗНО женских репродуктивных органов ассоциированы с несколькими нонсенс-мутациями гена BRCA1: Leu63Stop, Tyr130Stop, Glu908Stop, Gln934Stop и др. 185delAG гена BRCA1 с частотой 0,4-2,4% встречается в этнических группах Ирана и Вьетнама [Yassaee et al., 2002; Mehdipour et al., 2006; Ginsburg et al., 2010].

Северная и Южная Америка.

На территории Соединенных Штатов Америки носительство мутаций гена BRCA1 напрямую зависит от происхождения популяций (табл. 3).

–  –  –

Для американцев с европейскими корнями характерны мутации, специфичные и для жительниц Европы. У латиноамериканских женщин, имеющих в анамнезе ЗНО женских репродуктивных органов преобладает мутация 5382insC - 8,5% и 185delAG - 1,2% [Loureno et al., 2004; Dufloth et al., 2005;

Esteves et al., 2009].

Австралия. Среди англо-австралийцев распространены делеции 3888delGA и 3415delC гена BRCA1, не характерные для жителей других стран и частей света [Southey et al.,1999].

Таким образом, наиболее распространенные мутации гена BRCA1 185delAG и 5382insC, ассоциированные с риском развития злокачественных новообразований женских репродуктивных органов обнаружены в разных этнических группах населения Америки, Африки, Восточной, Центральной Европы, в том числе и России (Центральный и Сибирский регионы), но распределены в мировых популяциях неравномерно и выявляются с низкими значениями частот даже при наследственных формах РМЖ и РЯ.

1.1.2. SNP промоторных регионов генов цитокинов и их ассоциация с неоплазиями женских репродуктивных органов Среди многочисленных факторов, вызывающих злокачественную трансформацию клеток, особая роль отводится эндогенным биорегуляторам и, в частности, медиаторам иммунной системы про- и противовоспалительным цитокинам, вовлеченным в системный воспалительный процесс [Smyth et al., 2004]. В многочисленных работах исследовано участие в канцерогенезе преимущественно провоспалительных цитокинов. Иммунопатогенетическая роль противовоспалительных цитокинов изучена в меньшей степени [Forones et al., 2001; Mocellin et al., 2004; Lyon et al., 2008; Hamidullah et al., 2012; Тугуз, 2002;

Антонеева и др., 2014].

Полиморфизмы генов цитокинов являются результатом единичных нуклеотидных замен в некодирующих областях генов и при этом могут влиять на продукцию медиаторов, что опосредовано изменением функциональных сайтов, контролирующих транскрипцию, созревание и транспортировку соответствующих мРНК. Таким образом, формируется механизм, связывающий генетические варианты цитокинов с их экспрессией в норме и при патологии.

Изучение влияния аллельных вариантов генов цитокинов на уровень продукции медиаторов раскрывает механизмы основных путей формирования полиморфности системы цитокинов [Hodges et al., 1994; Bidwell et al., 1999;

Haukim et al., 2002].

Полиморфизмы генов IL-17А (G197А) и IL-17F (His161Arg, A7488G) Интерлейкин 17А (IL-17А) из семейства IL-17 (IL-17A, IL-17B, C, D, E, F) впервые охарактеризован как цитотоксический T-лимфоцит-ассоциированный антиген-8 с широким спектром биологических эффектов и участвующий в физиологических и патофизиологических воспалительных процессах [Afzali et al., 2007; Iyoda et al., 2010]. Как ключевой медиатор иммунной системы, IL-17А синергичен с основными провоспалительными цитокинами IL-1, TNF-, IL-6, стимулирует продукцию других факторов воспаления: циклооксигеназы-2, хемокинов (IL-8, моноцитарного хемотоксического и макрофагального воспалительного протеинов), активирует нейтрофилы, G-CSF, GM-CSF;

макрофаги, Т-лимфоциты, фибробласты, эндотелиоциты и др. клетки. Кроме этого участвует в гемопоэзе, обладает иммуномодулирующими IL-17А свойствами, однако, в ряде работ отмечена вовлеченность IL-17А в патогенез аутоиммунных, сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний посредством тех же механизмов активации клеточной адгезии, стимулирования пролиферации эндотелиоцитов, мезенхимальных стволовых и опухолевых клеток in vitro [Numasaki et al., 2003; Paunovic et al., 2008; Zhu X. et al., 2008; Martin-Orozco et al., 2009; Chen S. et al., 2010; Chen J. et al., 2011].

Роль IL-17А в развитии системных заболеваний обусловлена SNP гена медиатора в экзонах, интронах и в промоторных участках, регулирующих интенсивность экспрессии и, соответственно, биологические эффекты IL-17А, ген которого локализован в 6 хромосоме (рис. 3): 6p12.2 (www.genecards.org).

Рис.3 Локализация гена IL-17А в 6-ой хромосоме, стрелкой указано месторасположение гена (по данным GeneCards®) Ген IL-17А состоит из трех экзонов (с 5'UTR и 3'UTR нетранслируемыми и кодирующими областями) и двух интронов (рис.4) Рис.4 Схема строения гена IL-17А (по данным Atlas of Genetics and Cytogenetics in Oncology and Haematology) В гене IL-17А человека идентифицировано 74 SNP, 10 из которых наиболее изучены: 112GA и 175TC в 5 некодирурующем регионе, 1230GA во 2 экзоне;

rs8193037 (121GA), rs2275913 (197GA), rs3819024 (444AG), rs9791323 расположены в 5 (525AC), rs8193036 (737CT), rs4711998 (877AG) кодирующем регионе; rs3819025 (45GA) – в первом интроне. Из шести SNP гена ассоциированных с заболеваниями (ревматизмом, ревматоидным IL-17А, артритом, бронхиальной астмой, аллергическими заболеваниями, множественным склерозом, злокачественными новообразованиями желудка, молочной железы и др., в мировых популяций исследованы преимущественно G197A (rs2275913) или 197GA [Shibata et al., 2009; Wu et al., 2010; Zhang et al., 2011; Кутихин и др., 2012; Wang L. et al., 2012]. Установлена ассоциация гомозиготного A197A генотипа (OR=3.02; 95%CI, 1.86-4.91; p0.0001) и 197A аллеля (OR=1.42; 95%CI, 1.09-1.85; p=0.010) гена IL-17A у больных раком желудка интестинального типа [Shibata et al., 2009].

IL-17F. Четыре из 157 SNP IL-17F: 482AG (A7488G, His161Arg; rs763780), 34-361GT (rs7771466), 377AG (rs2397084), 368CG (rs612242) типированы при бронхиальной астме, колитах, кардио-васкулярных заболеваниях, раке желудка и молочной железы, артритах и рассеянном склерозе [Shibata et al., 2009; Wu et al., 2010; Paradowska-Gorycka et al., 2010; Wang L. et al., 2012; Qian et al., 2012].

Аллельные варианты генов IL-17А и IL-17F, вовлеченные в патогенез многих системных заболеваний, в ряде работ рассматриваются совместно [Wu et al., 2010; Paradowska-Gorycka et al., 2010; Quan et al., 2012]. Из 8 SNP гена IL-17А и IL-17F у жительниц Китая по данным Wang L. et al. (2012), со злокачественными новообразованиями молочной железы достоверно (р=0,0029) ассоциирована 197A аллель гена IL-17А. Частоты G/A аллелей IL-17A в группах доноров и больных с РМЖ составили соответственно 0,640:0,360 и 0,574:0,426.

Аналогичные результаты получены Quan Y. et al. (2012) при раке шейки матки (р=0,008). Значимых различий для полиморфизмов His161Arg гена IL-17F не представлено.

В России у онкологических больных Кемеровской области со злокачественными новообразованиями желудочно-кишечного тракта исследованы G197/197A полиморфизмы IL-17А (rs2275913). Частоты G197/197A аллелей у доноров и больных, по данным А.Д. Еникеевой с соавторами (2012 г.) достоверно не различались (соответственно 0,620/0,380, и 0,623/0,377, 2=0,01; р=0,91).

Ассоциации G197/197A полиморфизмов IL-17А и His161/161Arg аллелей IL-17F с другими локализациями новообразований в РФ не исследованы (HuGEN, Pubmed).

SNP гена IL-10 (1082G/A, 819C/T, 592C/A) Основной противовоспалительный – плейотропный цитокин, IL-10 ключевой регулятор иммунного ответа, который вырабатывается Th2-клетками, моноцитами, цитотоксическими Т-клетками, продуцируется не только разными популяциями иммунокомпетентных клеток, но и опухолевыми тканями. IL-10 способен ингибировать синтез других цитокинов, подавлять экспрессию молекул MHC II класса, пролиферацию Т-клеток, развитие гиперчувствительности замедленного типа, проявляет опухоль-стимулирующие и опухоль-ингибирующие свойства. Различные опухолевые линии способны продуцировать IL-10, подавляющий Т-клеточный иммунный ответ, активность Т-лимфоцитов, снижение экспрессии антигенов MHC I класса [Turner et al., 1997; Rao et al., 2006;

Alvero et al., 2012; Dobrzanski et al., 2012; Симбирцев, 2004; Кетлинский и др., 2008].

Mocellin et al. (2004) объясняют противоположные эффекты IL-10 полиморфизмами гена, регулирующими уровень его продукции (гипо- или оверэкспрессия) или структурные изменения соответствующих белковых продуктов с различной активностью. Однонуклеотидные замены в геномной ДНК

– SNP в специфических генах-кандидатах влияют на экспрессию и активность кодируемых белков и приводят к развитию новообразований, в том числе рака молочной железы [Jong et al., 2002]. По данным Turner et al. (1997) и Gibson et al.

(2001) SNP в промоторной области гена IL-10 воздействуют на экспрессию гена и, следовательно, играют определенную роль в патогенезе и клиническом течении рака молочной железы.

Ген IL-10 локализован на 1-ой хромосоме 1q31-1q32 (рис. 5) и состоит из пяти экзонов и четырех интронов (www.genecards.org). Сообщается, что несколько важных полиморфных сайтов в гене IL-10, в том числе три в области промотора (1082G/A, 819C/T, 592C/A) могут влиять на транскрипцию мРНК и экспрессию IL-10 in vitro [Eskdale et al., 1997].

Рис.5 Локализация гена IL-10 в 1-ой хромосоме, стрелкой указано месторасположение гена (по данным GeneCards®) В международных базах данных за последние пять лет в 155 работах отмечена ассоциация основных полиморфизмов промоторного региона гена IL-10 (1082G/A, 819C/T, 592C/A) с развитием злокачественных новообразований, в 8 из них – с РМЖ и РШМ (HuGEN, Pubmed). В некоторых исследованиях показано участие IL-10 в патогенезе, прогнозе течения рака молочной железы и шейки матки, однако еще не идентифицированы определенные полиморфизмы IL-10 как маркеры, ассоциированные у разных народов с новообразованиями женских репродуктивных органов [Langsenlehner et al., 2005; Howell et al., 2007; Gerger et al., 2010]. В таблице 4 обобщены данные (статистически не всегда значимые) по распределению и возможной ассоциации трех полиморфизмов гена IL-10 со ЗНО органов женской репродуктивной системы у разных народов. В России исследования по ассоциации полиморфизмов гена IL-10 с неоплазиями женских репродуктивных органов единичны.

–  –  –

Из всех аллельных вариантов IL-10, наиболее изучена роль 1082G/A SNP в патогенезе РМЖ и РШМ у азиатских народов. Так, у японских женщин с РШМ повышенная частота G1082 аллели достоверно (р=0,001) отличалась от группы контроля [Matsumoto et al., 2010]. Для здоровых и больных РМЖ жительниц Китая значимых различий не найдено [Wang Q. et al., 2011], но по данным Kong F.

высокие частоты 1082AA генотипа и ATA гаплотипа et al. (2010), (1082A/819T/592A) сопряжены с вовлеченностью в опухолевый процесс лимфатических узлов (соответственно p=0,041 и р=0,022) и увеличением размера опухоли (соответственно р=0,039 и р=0,028).

Abdolrahim-Zadeh H. et al. (2005) отмечают, что у иранских женщин полиморфизмы промоторного регионы гена IL-10 не могут рассматриваться как факторы риска развития РМЖ, однако достоверные различия найдены для 1082АА генотипа и ACC/ATA гаплотипа у больных РМЖ с положительным прогестерон-рецепторным статусом (соответственно р=0,03 и р=0,02).

1082G/A и 592C/A полиморфные варианты гена IL-10, исследованные в европейских популяциях Италии, Австрии и России, достоверно различаются у здоровых женщин и больных с РМЖ, что позволяет учитывать их возможную роль в канцерогенезе [Giordani et al., 2003; Langsenlehner et al., 2005; Gerger et al., 2010]. Благодатских А.Е. и др. (2011) рассматривают носительство 592АА генотипа как фактор повышенного риска возникновения РМЖ, ассоциированного с низкой экспрессией прогестероновых рецепторов, у 592СС гомозигот отмечена высокая вероятность лимфогенного метастазирования.

Таким образом, положительные ассоциации между частотами аллелей, генотипов или гаплотипов промоторного региона гена и IL-10 предрасположенностью к злокачественным новообразованиям женских репродуктивных органов, приведенные в 8 из 18 исследований (табл.4), весьма противоречивы. Одни и те же полиморфные варианты у разных народов могут играть как протективную, так и негативную роль в канцерогенезе.

Роль IL-2 и полиморфизмов гена IL-2 в канцерогенезе.

– основной провоспалительный цитокин, стимулирующий IL-2 пролиферацию и дифференцировку активированных Т-лимфоцитов в эффекторные Th-лимфоциты или цитотоксические Т-клетки, обнаружен в 1976 году в культуральной жидкости лимфоцитов, стимулированных митогенами, назван Т-клеточным ростовым фактором. IL-2 продуцируется преимущественно активированными Т-лимфоцитами, является фактором роста и активации естественных киллеров, В- и Т-лимфоцитов, стимулирует синтез и секрецию других лимфокинов: IL-4, IL-6, IFN, CSFs, TNFs. Противоопухолевый эффект ILреализуется путем повышения цитотоксичности Т-лимфоцитов, лимфокинактивированных и естественных киллеров [Morgan et al., 1976; Rosenberg, 2001;

Oppenheim, 2007; Бережная и др., 2000; Молчанов и др., 2001; Голвизин, 2001].

Мишенью действия IL-2 являются клетки, имеющие на поверхности мембраны специфический высокоаффинный рецептор (IL-2R). Взаимодействие IL-2 с IL-2R приводит к пролиферации Тh, которые затем воздействуют на дифференцировку и пролиферацию цитотоксических Т-клеток, NK-клеток, лимфокин-активированных киллеров, В-лимфоцитов и макрофагов, что обуславливает дальнейшее развитие иммунного ответа [Waldmann, 1993; Wei et al., 2010; Malek et al., 2010; Ярилин, 1997; Кетлинский и др., 2008].

Роль IL-2 в канцерогенезе связана с полиморфизмами гена в виде точечных мутаций – SNP в промоторных регионах, регулирующих интенсивность экспрессии и биологические эффекты медиатора [Wu et al., 2009; Sugimoto et al., 2010; Motoyama et al., 2011; Song et al., 2012]. IL-2 человека кодируется одним геном, локализованном в 4 хромосоме 4q27, включающим 6684 пар нуклеотидов и состоящим из 4-х экзонов и 3-х интронов (рис. 6).

Рис. 6 Локализация гена IL-2 в 4-ой хромосоме; стрелкой указано месторасположение гена (по данным GeneCards®) В мировых базах данных (HuGEN, Pubmed) исследована роль 10 полиморфных вариантов промоторного региона гена IL-2 в патогенезе бронхиальной астмы, рассеянного склероза, атеросклероза, ишемической болезни сердца, сахарного диабета [Matesanz et al., 2001; Fedetz et al., 2002; ScarelCaminaga et al., 2002; Amirzargar et al., 2007; Movahedi et al., 2008; Shahbazi et al., 2010; Sayad et al., 2013; Ding et al., 2013]. При ЗНО пищевода, желудка, легких, предстательной железы, мочевого пузыря, носоглотки, неходжкинской лимфоме изучена роль пяти SNP: 114Т/G, 330Т/G, 384G/T, 475А/Т, 631G/А [Shin et al., 2008; Wu et al., 2009; Sugimoto et al., 2010; Tindall et al., 2010; Wei et al., 2010;

Motoyama et al., 2011; Song et al., 2012; Shen et al., 2012].

Данные по распределению частот rs2069762 (T330G) гена IL-2 при ЗНО женских репродуктивных органов немногочисленны (HuGEN, Pubmed). Hu X.B. et (2013) отмечают ассоциацию гетерозиготного (р=0,0021) и al. T330G гомозиготного G330G генотипов (р0,0001) IL-2 с РМЖ у китайских женщин.

Исследована роль и других SNP гена IL-2 по 114, 384, 475 и 631 сайтам промоторного региона в патогенезе РМЖ. В работе Силкова А.Н. (2013) выявлен повышенный уровень (р=0,022) гетерозиготного генотипа G114T у больных РМЖ по сравнению с донорами. Горева Е.П. с соавт. (2010) не выявили ассоциации 631G/A и 475A/T полиморфных вариантов гена IL-2 с РМЖ, Erdei E. et al. (2010) отмечают неэффективность использования 384G/T SNP гена IL-2 в качестве маркера РМЖ.

Ассоциация SNP гена IL-4 с неоплазиями IL-4 - фактор дифференцировки Т- и В-клеток, продуцируется Tх2 и относится к группе гемопоэтинов, содержащий 129 аминокислотных остатков.

Наиболее сильный эффект IL-4 оказывает на регуляцию образования других цитокинов посредством участия в иммунном ответе и воспалительных реакциях.

IL-4 ограничивает синтез макрофагами провоспалительных IL-1, -6, -8, -12, TNFобразование высокоактивных метаболитов кислорода, азота, служит кофактором пролиферации покоящихся В-лимфоцитов, индуцирует в этих клетках синтез IgE и IgG. IL-4 способен генерировать активность лимфокинактивированных киллеров и усиливать противоопухолевую активность макрофагов. Механизм противоопухолевого эффекта IL-4 связан с блокированием клеточного цикла и повышением экспрессии молекул МНС I и II классов [Paul, 1991; Callard, 1991; Ярилин, 1997; Витковский и др., 2001; Симбирцев, 2004].

В ряде работ представлены весьма противоречивые сведения о роли IL-4 при некоторых злокачественных новообразованиях. Показано, что IL-4 обладает антипролиферативным эффектом, ингибирует опухолевый рост посредством активации макрофагов и индукции апоптоза, является активным стимулятором функций различных цитотоксических клеток, которые экспрессируют рецепторы к самому медиатору [Hoon et al., 1993; Hillman et al., 1994; Gooch et al., 1998;

Nagai et al., 2000]. Участие IL-4 в канцерогенезе может быть обусловлено SNP промоторных регионов гена цитокина, локализованного в 5 хромосоме 5q31.1 (рис.7).

Рис. 7 Локализация гена IL-4 в 5-ой хромосоме; стрелкой указано месторасположение гена (по данным GeneCards®) Полиморфизмы промоторного региона гена IL-4 исследованы в мировых популяциях в основном при бронхиальной астме и ревматоидном артрите [Moreno et al., 2007; Yang et al., 2011; Daneshmandi et al., 2012; Zhu N. et al., 2013; Inanir et al., 2013; Liang et al., 2014]. В европейских, американских и азиатских популяциях подтверждена ассоциация 8 SNP гена IL-4 с риском развития рака легких, желудка, кишечника, предстательной железы, почек и мочевого пузыря [El-Omar et al., 2003; Yannopoulos et al., 2007; Zhu J. et al., 2010; Kwon et al., 2011; Gomes et al., 2012; Li et al., 2012; Chu et al., 2012]. Полиморфизмы промоторного региона гена IL-4, связанные с неоплазиями женских репродуктивных органов, обсуждаются в немногочисленных работах. Так, Joshi N. et al. (2013) отмечают протективную роль 589Т аллеля гена IL-4 для жительниц Индии с РМЖ. Konwar R. et al. (2009) не установили достоверного (р=0,095) повышения частот C589T полиморфных вариантов гена IL-4 у больных РМЖ (Индия). Erdei E. et al., 2010 (США) определили значимые (р0,05) различия для частот 1098G/T генотипов ILу больных РМЖ по сравнению с донорами.

Полиморфизмы гена IL-12

– основной провоспалительный, плейотропный цитокин, IL-12 синтезируемый стимулированными макрофагами, В-клетками и другими АПК, которые модулируют адаптивный иммунный ответ, преимущественно стимулируя продукцию Кроме стимуляции Th1 и способности повышать Th1.

цитолитическую активность, опосредует физиологические реакции, IL-12 действуя в качестве сильного индуктора синтеза IFN и других цитокинов T- и NK-клетками периферической крови, генерируя противоопухолевый клеточный иммунитет [Gubler et al., 1991; Bright et al., 1999; Portielje et al., 2003; Ferlazzo et al., 2004; Paunovic et al., 2008; Rao et al., 2008; Ярилин, 1997; Витковский и др., 2001; Симбирцев, 2004].

Известно около 40 SNP гена IL-12В в промоторном регионе, интронах, экзонах, 3'UTR- и 5'UTR-регионах, влияющих на экспрессию медиатора при различных патологиях [Litjens et al., 2004; Wang J. et al., 2010; Morris et al., 2011;

Boca et al., 2013]. Ген IL12B картирован в 3 хромосоме 3q25.33 (рис. 8) Рис. 8 Локализация гена IL-12В в 3-ей хромосоме; стрелкой указано месторасположение гена (по данным GeneCards®) В базах данных (HuGEN, Pubmed) представлены работы по исследованию 12 SNP гена IL-12В, отражающие участие полиморфных вариантов гена медиатора в патогенезе псориаза, бронхиальной астмы, болезни Крона, туберкулеза, рассеянного склероза [Morahan et al., 2002; Randolph et al., 2004;

–  –  –

Достоверные различия по частотам A1188C аллельных вариантов IL-12В получены для жителей Европы, Китая, Индии и Южной Кореи. Roszak A. et al.

(2012), Chen X. et al. (2009), Tamandani D. et al. (2009), Han S.S. et al. (2008) отмечают ассоциированность «мутантного» 1188С аллеля и гетерозиготного A1188C генотипа гена IL-12В с РШМ. Повышение частот нормальной А1188 аллели и гомозиготного А1188А генотипа гена IL-12В у больных РМЖ по сравнению с донорами установлено для жительниц Норвегии Kaarvatn M.H. et al.



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |
 
Похожие работы:

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«Мансуров Рашид Шамилович Применение препарата Солунат при выращивании бройлеров 06.02.08. – кормопроизводство, кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор, Заслуженный деятель науки Российской...»

«СЕТДЕКОВ РИНАТ АБДУЛХАКОВИЧ РАЗРАБОТКА НОВЫХ СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЭШЕРИХИОЗОВ ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология Диссертация на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ и РТ Юсупов...»

«СЕРГЕЕВА ЛЮДМИЛА ВАСИЛЬЕВНА ПРИМЕНЕНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЗАКВАСОК ДЛЯ ОПТИМИЗАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МЯСНОГО СЫРЬЯ И УЛУЧШЕНИЯ КАЧЕСТВА ПОЛУЧАЕМОЙ ПРОДУКЦИИ Специальность 03.01.06 – биотехнология ( в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Доктор биологических наук, профессор Кадималиев Д.А. САРАНСК 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.....»

«ШИТОВ АЛЕКСАНДР ВИКТОРОВИЧ ВЛИЯНИЕ СЕЙСМИЧНОСТИ И СОПУТСТВУЮЩИХ ГЕОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ НА АБИОТИЧЕСКИЕ И БИОТИЧЕСКИЕ КОМПОНЕНТЫ ЭКОСИСТЕМ (НА ПРИМЕРЕ ЧУЙСКОГО ЗЕМЛЕТРЯСЕНИЯ И ЕГО АФТЕРШОКОВ) 25.00.36 – Геоэкология (науки о Земле) Диссертация на соискание ученой степени доктора геолого-минералогических наук Горно-Алтайск 201...»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»

«Тюрин Владимир Анатольевич МАРАЛ (CERVUS ELAPHUS SIBIRICUS SEVERTZOV, 1873) В ВОСТОЧНОМ САЯНЕ (РАСПРОСТРАНЕНИЕ, ЭКОЛОГИЯ, ОПТИМИЗАЦИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ) Специальность 03.02.08 – Экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Д-р биол. наук, профессор М.Н. Смирнов Красноярск 201 Содержание Введение.. 4 Глава 1. Изученность экологии марала.. Биология марала.. 9...»

«Алексеев Иван Викторович РАЗВИТИЕ КОМПЛЕКСНОГО ИНЖЕНЕРНО-ГЕОЛОГИЧЕСКОГО И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО МОНИТОРИНГА НА ЯКОВЛЕВСКОМ РУДНИКЕ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ ВЕДЕНИЯ ОЧИСТНЫХ РАБОТ ПОД НЕОСУШЕННЫМИ ВОДОНОСНЫМИ ГОРИЗОНТАМИ Специальность 25.00.08 – Инженерная геология,...»

«Смешливая Наталья Владимировна ЭКОЛОГО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ СИГОВЫХ РЫБ ОБЬ-ИРТЫШСКОГО БАССЕЙНА 03.02.06 Ихтиология Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент Семенченко С.М. Тюмень – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ...»

«Куяров Артём Александрович РОЛЬ НОРМАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ И ЛИЗОЦИМА В ВЫБОРЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У СТУДЕНЧЕСКОЙ МОЛОДЕЖИ СЕВЕРА 03.02.03 – микробиология 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание учёной степени кандидата...»

«Доронин Максим Игоревич ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО НЕКРОЗА ГЕМОПОЭТИЧЕСКОЙ ТКАНИ ЛОСОСЕВЫХ РЫБ 03.02.02 «Вирусология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, Мудрак Наталья Станиславовна Владимир 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ 1 ВВЕДЕНИЕ 2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1 Характеристика возбудителя инфекционного...»

«Шапурко Валентина Николаевна РЕСУРСЫ И ЭКОЛОГИЧЕСКОЕ КАЧЕСТВО ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ (НА ПРИМЕРЕ БРЯНСКОЙ ОБЛАСТИ) Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«БРИТАНОВ Николай Григорьевич ГИГИЕНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПЕРЕПРОФИЛИРОВАНИЯ ИЛИ ЛИКВИДАЦИИ ОБЪЕКТОВ ПО ХРАНЕНИЮ И УНИЧТОЖЕНИЮ ХИМИЧЕСКОГО ОРУЖИЯ 14.02.01 Гигиена Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор...»

«Кириллин Егор Владимирович ЭКОЛОГИЯ ОВЦЕБЫКА (OVIBOS MOSCHATUS ZIMMERMANN, 1780) В ТУНДРОВОЙ ЗОНЕ ЯКУТИИ 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д. б. н., профессор Мордосов И. И. Якутск – 2015 Содержание Введение.. Глава 1. Краткая физико-географическая...»

«Аканина Дарья Сергеевна РАЗРАБОТКА СРЕДСТВ ДЕТЕКЦИИ ВЫСОКОВИРУЛЕНТНОГО ШТАММА ВИРУСА ГРИППА А ПОДТИПА Н5N 03.02.02 – вирусология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Д.б.н., профессор Гребенникова Т. В. Москва 20 ОГЛАВЛЕНИЕ Список использованных сокращений 1. Введение 2. Обзор литературы 2.1. Описание заболевания 2.2. Общая характеристика вируса гриппа 2.3. Эпидемиология вируса гриппа А...»

«БАБЕШКО Кирилл Владимирович ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕДПОЧТЕНИЯ СФАГНОБИОНТНЫХ РАКОВИННЫХ АМЕБ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЛЯ РЕКОНСТРУКЦИИ ГИДРОЛОГИЧЕСКОГО РЕЖИМА БОЛОТ В ГОЛОЦЕНЕ Специальность 03.02.08 – экология (биология) диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат биологических наук Цыганов...»

«ТУРТУЕВА ТАТЬЯНА АНАТОЛЬЕВНА РАЗРАБОТКА СБОРА НЕЙРОПРОТЕКТИВНОГО И ЭКСТРАКТА СУХОГО НА ЕГО ОСНОВЕ 14.04.02 фармацевтическая химия, фармакогнозия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Научный руководитель: доктор фармацевтических наук, профессор НИКОЛАЕВА ГАЛИНА ГРИГОРЬЕВНА Улан-Удэ – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ...»

«Хохлова Светлана Викторовна ИНДИВИДУАЛИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ РАКОМ ЯИЧНИКОВ 14.01.12-онкология ДИССЕРТАЦИЯ На соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: Доктор медицинских наук, профессор Горбунова В.А Москва 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение Глава 1. Обзор литературы 1.1. Общая характеристика рака яичников 1.1.1. Молекулярно-биологические и...»

«ПОДОЛЬНИКОВА ЮЛИЯ АЛЕКСАНДРОВНА ОСОБЕННОСТИ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО СТАТУСА МОЛОКА КОРОВ УРБАНИЗИРОВАННОЙ ТЕРРИТОРИИ (НА ПРИМЕРЕ ОМСКОЙ ОБЛАСТИ) Специальность: 03.02.08 – экология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Заслуженный работник высшей школы РФ доктор...»

«СИДОРОВА ТАТЬЯНА АЛЕКСАНДРОВНА ОСОБЕННОСТИ АДАПТИВНЫХ РЕАКЦИЙ У ДЕВУШЕК К УСЛОВИЯМ ГОРОДСКОЙ СРЕДЫ 03.02.08 Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, доцент Драгич О.А. Омск-2015 СОДЕРЖАНИЕ Введение.. Глава 1 Обзор литературы.. 1.1. Механизмы адаптации организма человека к окружающей среде 1.2. Закономерности развития...»









 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.